药物分析实验实验一葡萄糖的分析

药物分析实验实验一葡萄糖的分析一、教学目的了解葡萄糖的全检过程；掌握葡萄糖中氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐等一般杂质检查的基本原理、操作方法及杂质限量计算；正确使用纳氏比色管、检砷器工作原理。葡萄糖结构D-葡萄糖中国药典收载：二、基本原理葡萄糖分子中具有醛基，还原碱性酒石酸铜生成红色氧化亚铜。本实验除了检查氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐等一般杂质外，还检查溶液的澄清度（目的检查不溶性杂质，如糊精、蛋白质等）、亚硫酸盐与可溶性淀粉（因制备时使用的酸可能带有亚硫酸盐，可溶性淀粉为引入的中间体）。C6H12O6+2Cu2++4OH-=C6H12O7+Cu2O↓+2H2O实验要求记录每个试验项目的称样质量记录酸度的检查、溶液的澄清度与颜色检查、氯化物的检查、硫酸盐的检查的实验现象给出实验结果、进行结果判定实验报告主要试剂及器皿酚酞指示液25%氯化钡溶液0.020mol/LNaOH溶液稀硝酸10μg/mLNaCl标准溶液稀盐酸100μg/mLK2SO4标准溶液器皿：50mL纳氏比色管电子天平试剂：三、实验操作（二）鉴别取本品约0.2g，加水5mL溶解后，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液，即生成氧化亚铜红色沉淀。（三）检查1.酸度的检查取葡萄糖2.0g至50mL比色管，加水20mL溶解后，加酚酞指示剂3滴与0.020mol/L氢氧化钠溶液0.20mL，应显粉红色。记录：称量质量和实验现象标准要求：溶液应粉红色单项判定：□合格□不合格2.溶液的澄清度与颜色检查取葡萄糖12.5g至50mL纳氏比色管中，加热水溶解后，放冷，用水稀释至25mL，观察，溶液应澄清无色。记录：称量质量和实验现象标准要求：溶液应澄清无色单项判定：□合格□不合格4.亚硫酸盐与可溶性淀粉检查取本品1.0g至试管中，加水10mL溶解后，加0.1mol/L碘试液1滴，应即刻显示黄色。7.氯化物的检查取葡萄糖0.60g至50mL纳氏比色管中，加水溶解使成25mL（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10mL（如溶液不澄清，应过滤），加水使成约40mL，摇匀，即得样品溶液。另取标准10μg/mL氯化钠溶液6.0mL，置于50mL比色管中，加稀硝酸10mL，加水使约成40mL，摇匀，即得对照溶液。于样品溶液和对照溶液中，分别加入1mL（用滴管滴20滴）0.1mol/L硝酸银溶液，用水稀释至50mL，摇匀，在暗处放置5min，在黑色背景下，从比色管上方向下观察比较，样品溶液如发生浑浊，与对照品比较不得更浓（0.010%）。杂质限量的计算％供试品量杂质的最大允许量杂质限量＝100％）供试品量（）标准溶液体积（）标准溶液浓度（＝100VCm%100mVCL氯化物的限量%100mcVLgmmLgcmLV60.0/100.6，，%10060.00.6/10gmLmLgL%100100000060.00.6/10gmLmLg%01.0%101%10010124实验记录举例实验项目实验现象实验结果标准要求实验结论氯化物如样品溶液没有标准对照液浑浊＜0.01%≤0.01%合格如样品溶液比标准对照液浑浊＞0.01%不合格8.硫酸盐的检查取葡萄糖2.0g至50mL纳氏比色管中，加水溶解使成约40mL（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性，如溶液不澄清，过滤），加稀盐酸2mL，摇匀，即得样品溶液。另取标准硫酸钾（100μg/mL）溶液2.0mL置于50mL比色管中，加水使成40mL，加稀盐酸2mL，摇匀，即得对照溶液。于样品溶液和对照溶液中，分别加入25%氯化钡溶液5mL，用水稀释至50mL，充分摇匀，放置10min，在黑色背景下，从比色管上方向下观察比较，样品溶液如发生浑浊，与对照品比较不得更浓。（0.010%）硫酸盐的限量%100mcVL2.0100/200VmLcgmLmg，，100/2.0100%2.0gmLmLLg%10010000000.20.2/100gmLmLg%01.0%101%100101249.铁盐的检查原理：铁盐在酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子，与一定量标准铁溶液同法处理后所呈颜色比较，判断供试品铁盐是否超限。)]()([663红SCNFeSCNFeH对照液葡萄糖铁盐的检查试验方法取葡萄糖2.0g至50mL纳氏比色管中，加水20mL溶解后，滴加硝酸3滴，小火煮沸5min，放冷，加水稀释使成45mL，加硫氰酸铵(30→100)3mL，摇匀，如显色，与标准Fe溶液（10μg/mL）2.0mL用同一方法制成的对照液比较，白色背景下从上向下观察，不得更深（0.001%）10、重金属检查法硫代乙酰胺法原理：pH3.5322322CHCSNHHOCHCONHHS黄色～棕黑色药物：PbSSHPbpH3.522黄色～棕黑色、对照：PbSSHPbNOpH3.523Vc重金属检查方法取50mL纳氏比色管两支，甲管中标准铅溶液（10μg/mL）2.0mL与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL后，加水稀释至25mL;取葡萄糖4.0g至于乙管，加水20mL溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL，加水稀释至25mL;再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2mL,摇匀，放置2min,同置白色背景上，从上向下观察，不得更深。11.砷盐原理锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量砷盐反应生成具挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸产生黄色至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液所生成的砷斑比较，判定药物中砷盐的含量。其反应式如下：AsO33-+3Zn+9H+AsH3+3Zn2++3H2OAsH3+2HgBr22HBr+AsH(HgBr)2黄色AsH3+3HgBr23HBr+As(HgBr)3棕色检砷装置的准备：取60mg醋酸铅棉花撕成疏松状，每次少量，用细玻璃棒轻轻而均匀的装入导气管中，装管高度约60mm，用镊子取出一片溴化汞试纸，置旋塞顶端平面上，盖住孔径，用橡皮筋固定。砷盐检查方法样品砷盐检查：取葡萄糖2.0g至检砷瓶中，加水5mL溶解后，加（浓）盐酸5mL与水稀释至28mL，加KI试液5mL与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10min后，加锌粉2g，迅速将导气管塞于瓶口上，并将检砷器置在25℃下反应45min，取出溴化汞试纸，将生成的砷斑与2ml标准砷溶液（1μg/mL）在相同条件下生成的砷斑比较，颜色不得更深(0.0001%)。注意：KI试液与氯化亚锡还可抑制锑化氢的生成。标准砷斑的制备：精密量取标准砷溶液（As1μg/ml）2ml，于另一个试砷瓶中，加盐酸5ml与蒸馏水21ml，照上述方法自“加碘化钾试液5ml”起，依法操作，即得。四、注意事项1．比色管的正确使用：选择配对的两支纳氏比色管，用清洁液荡洗除去污物，再用水冲洗干净。采用旋摇的方法使管内液体混合均匀。2．正确选用量具：根据检查试验一般允许误差为±10%的要求和药品、试剂的取用量。3．平行操作：标准品与样品必须同时进行实验，加入试剂量、顺序等均应一致。观察时，两管受光照的程度应一致，使光线从正面照入，比色时置白色背景上，比浊时置黑色背景上，自上而下地观察。4．砷盐检查时，取用的样品管与标准管应力求一致，管的长短，内径一定要相同，以免生成的色斑大小不同，影响比色。锌粒加入后，应立即将检砷管盖上，塞紧，以免AsH3气体逸出，反应时勿随意晃动。5.砷盐检查实验结束后，醋酸铅棉花自导气管上部全数夹出，废液倒入回收桶，切勿倒入水槽以免造成堵塞。本实验技术要点：1.比色管正确使用；2.点滴瓶用法；3.检砷瓶用法拿法及用法（醋酸铅棉花塞入的位置、长度及蓬松程度；导气管的密闭程度等）；下周预备实验-G板和H板的制备（每人做一个G和一个H）1.G板：玻璃背面先贴上标签（G板），取硅胶G粉5g，加18毫升水，向同一个方向研磨混合，去除表面气泡，从中心倒入洁净玻璃板，研钵棒助涂布均匀(快速)，拍板，转向，再拍板，平推，勿动！！-做完让老师看板，认可后方能离开。2.H板：玻璃背面先贴上标签（H板），取硅胶H粉5g，加18毫升CMC-Na，同上法制板，平推，勿动！！