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CORBRINCAPSULE单击此处编辑母版标题样式冬虫夏草知识介绍CORBRINCAPSULE冬虫夏草CORBRINCAPSULE冬虫夏草是我国的珍稀物种之一,与人参、鹿茸一起被誉为国药三宝,也是我国中药中的宝藏,具有独特的疗效。普遍认识:什么是冬虫夏草?把凡是由虫草属真菌寄生菌物结合体都通称为冬虫夏草。把冬虫夏草完全与虫草等同起来。错误认识:CORBRINCAPSULE什么是冬虫夏草?冬虫夏草是一种昆虫和真菌的复合体。被寄生的虫体是虫草蝙蝠蛾的幼虫。寄生的真菌是冬虫夏草菌(cordycepssinensis(BerK.)Sacc.),它属于真菌门,子囊菌纲,肉座目,麦角科,虫草属,虫草种。CORBRINCAPSULE8月左右雪线以下,阴坡半阴坡5月5-15日8-9月间3-10摄氏度子囊孢子感染蝙蝠蛾幼虫菌核(10月到次年五月,菌丝束)子座7月下旬子囊成熟分生孢子长出牙管僵虫冬虫夏草的有性型生活史形成僵虫过程CORBRINCAPSULE冬虫夏草价格逐年上涨,已成为一个高档消费品200160014000400007000015000002000040000600008000010000012000014000016000080年前80年95年2000年2003年2006年一公斤冬虫夏草逐年价格八十年代以来冬虫夏草价格上升趋势图CORBRINCAPSULE天然冬虫夏草生长在海拔较高的山顶部位,如青藏高原和云贵高原海拔3000-5000米高原上,雪线下的山地阴坡、半阴坡的灌木丛和草丛中。冬虫夏草的生长环境CORBRINCAPSULE冬虫夏草分布很不均匀。但根据学者的考察,认为它主要分布川青藏高原峡谷,产量最多的是青海、四川和西藏,其中冬虫夏草质量较好的是青海的玉树州。冬虫夏草的分布CORBRINCAPSULE地下虫体部分六月份开始尾部渐渐变空,失去药用价值。所以一年中只有五月中旬到六月中下旬的二三十天时间是挖冬虫夏草的季节。冬虫夏草的采集CORBRINCAPSULE冬虫夏草主要通过露出地面的子座识别。采摘时通常在子座的周围挖一个坑,将虫体包含在内,连土一起取出,破坏大量的植被,掠夺式采挖生态环境破坏极其严重。国家制定实施了有关虫草资源采集管理的相关法规。冬虫夏草的采集CORBRINCAPSULE冬虫夏草的采集CORBRINCAPSULE冬虫夏草的采集CORBRINCAPSULE冬虫夏草的药用价值公元780年,西藏的《藏本草》首次记载了冬虫夏草的药学功效。作为治病、防病、强身的药物已有一千二百年的历史。与人参、鹿茸一起被誉为国药三大宝。CORBRINCAPSULE天然冬虫夏草性温、味甘,归经入肺、肾二经。历部《中华人民共和国药典》记载其功用为:补肺益肾,化痰、平喘,主治久咳虚喘,劳嗽咯血,阳痿遗精,腰膝酸软,食欲不振,老人畏寒,病后久虚不复,及治诸虚百损等病症。冬虫夏草的药用价值CORBRINCAPSULE古代70多部中药学文献把冬虫夏草的功用归纳为:能阴阳并补,治劳嗽膈症,诸虚百损;功与人参、鹿茸同,但药性温和,老少病虚者皆宜食用……。同时,冬虫夏草由于仅分布于中国,又是数百年来我国和亚洲人民视为与天然人参、鹿茸相媲美的名贵滋补中药材,享有极高的声誉。新中国建立以来,我国有200多部药书详细记载了冬虫夏草的药效与用途。冬虫夏草的药用价值CORBRINCAPSULE20世纪以来科学研究证实虫草的药用部位是菌丝体冬虫夏草的药用部位CORBRINCAPSULE冬虫夏草含有的有效成分有:虫草酸(甘露醇)、虫草素(腺苷)、虫草多糖、腺嘌呤、尿嘧啶、多球壳菌素、维生素B1、B2、B12、E等,还有人体必需的微量元素锌、锰、钾、磷等,以及多种必需的氨基酸等。冬虫夏草的有效成分CORBRINCAPSULE蝙蝠蛾幼虫非常难饲养,喜低温,喜欢自食,代价非常昂贵;蝙蝠蛾幼虫上接种技术难题很高;能形成含子座的冬虫夏草很难。冬虫夏草能人工栽培,但价格非常昂贵,技术难度大冬虫夏草能否人工栽培?CORBRINCAPSULE冬虫夏草菌的生活史①,②冬虫夏草生活史1:冬虫夏草:①子座,②僵虫+菌核;2:子囊壳;3:子囊;4:子囊孢子;5:菌丝;6:分生孢子梗及顶生分生孢子;7:分生孢子;8:虫草蝙蝠蛾成虫;9:卵;10:幼虫;11:蛹分生孢子梗直接从子囊孢子上长出顶生分生孢子生活史:全型=有性型+无性型CORBRINCAPSULE1、温度的要求2、培养基的要求3、表面消毒4、分离材料冬虫夏草无性型菌的分离和鉴定难点CORBRINCAPSULE温度的要求冬虫夏草产区分布海拔3000-5000米青海-玉树州-杂多县(4600米)为何冬虫夏草生长在如此高海拔地区呢?冬虫夏草菌喜欢低温有关寄生虫(蝙蝠蛾幼虫)的分布低温、高湿、光线和特殊缺氧条件CORBRINCAPSULE温度的要求CORBRINCAPSULE1、温度的要求2、培养基的要求3、表面消毒4、分离材料冬虫夏草无性型菌的分离和鉴定难点CORBRINCAPSULE培养基的要求冬虫夏草菌是特异性寄生的真菌:◆自然条件下蝙蝠蛾幼虫的体液是冬虫夏草菌最喜欢的培养基。◆在高海拔地区从未发现冬虫夏草菌寄生在蝙蝠蛾幼虫以外的别的昆虫上,如地老虎等。CORBRINCAPSULE1、温度的要求2、培养基的要求3、表面消毒4、分离材料冬虫夏草无性型菌的分离和鉴定难点CORBRINCAPSULE表面消毒新鲜冬虫夏草表层消毒很难掌握!极易污染杂菌5月化冻,子座伸出(5CM),僵虫体表层组织疏松,体表杂菌大量进入虫草组织体内。因此,分离培养时,随便怎么消毒总会有大量杂菌先于虫草菌长出。CORBRINCAPSULE1、温度的要求2、培养基的要求3、表面消毒4、分离材料冬虫夏草无性型菌的分离和鉴定难点CORBRINCAPSULE8月下旬到9月中旬僵虫已经形成,用僵虫来分离冬虫夏草菌,成功率一般都可超过90%。最佳分离材料是虫草还是僵虫期?CORBRINCAPSULE华东为什么能得到真正的菌种要得到真正的冬虫夏草菌种,关键是在于分离菌种的场所、温度和方法。CORBRINCAPSULE目前世界上已发现同属“虫草属”的虫草已有三百五十种之多,其中在中国已发现过六十余种,包含:冬虫夏草和虫草冬虫夏草(C.sinensis)北冬虫夏草(C.militaris)大团虫草(C.ophioglossoides)亚香棒虫草(C.hawkesii)古尼虫草(C.gunnii)珊瑚虫草(C.martialis)镰刀状虫草(C.falcata)泰山虫草(C.taishanensis)山西虫草(C.shanxiensis)凉山虫草(C.liangshanensis)新疆虫草(C.gracilis)香棒虫草(C.barnesii)等……CORBRINCAPSULE冬虫夏草和虫草蝉花分布于安徽(淮北)、四川(都江堰)以及云南、江苏、浙江、福建和湖北等省。蛹虫草分布于河北、吉林、陕西、安徽、云南、广西、贵州、四川、台湾以及广东、湖北、湖南和山西等省。CORBRINCAPSULE冬虫夏草和虫草蚁虫草分布于安徽、江苏、浙江、四川、云南、广西、广东和湖北等省。下垂虫草分布于吉林、安徽、湖北、浙江、贵州、四川、广西、和海南等省。CORBRINCAPSULE冬虫夏草和虫草金龟子虫草黄蜂虫草大团囊虫草珊瑚虫草CORBRINCAPSULE虽然已发现的品种繁多,但其中具有药用价值的品种却并不多;有些还具有毒性,错误服用后可能会直接破坏人体的肌体功能。冬虫夏草和虫草最具有价值的是:冬虫夏草(Cordycepssinensis(Berks.)Sacc.)CORBRINCAPSULE购买冬虫夏草时要注意外观色泽,表面深黄色至黄棕色。冬虫夏草的真伪有些空壳冬虫夏草,提取有效成分后再出售,这种补品内容物少,外观不饱满,掰开后也不难鉴别。掰开细看,还可排除虫草中插入的铁丝等异物。断面为类白色,气微腥,味微鲜。以完整、虫体丰满肥大,外色黄亮、内色白者为佳。CORBRINCAPSULE不同品质的冬虫夏草混合。冒称高品质冬虫夏草。不法伎俩销售提取过有效成分的冬虫夏草。以次充好。断的冬虫夏草中插入铁丝、牙签等异物。用面粉、玉米、石膏等材料加水后,用特制模具压制成冬虫夏草形状。然后上色晾干,冒充冬虫夏草进行销售。CORBRINCAPSULE•蝙蝠蛾(Hepialusspp.)幼虫上的一种子囊真菌。•真菌界KingdomFungi•子囊菌门(Ascomycota)•子囊菌纲(Ascomycetes)(粪壳菌亚纲)•肉座菌目(Hypocreales)•麦角菌科(Clavicipitaceae)•虫草菌属(Cordyceps(Frey)Link.)之一种Cordycepssinensis(Berkeley)Saccardo,Michelia1:320(1878).SphaeriasinensisBerkeleyinHooker,Lond.Journ.Bot.II:207(1843).冬虫夏草菌CORBRINCAPSULE法则=双名法+合格发表+优先律–冬虫夏草头孢菌=不合格发表(专利)–蝙蝠蛾多毛孢=不合格发表(陈庆涛)–中华束丝孢=迟后发表(印院士)中国被毛孢HirsutellasinensisLiu,Guoetal.植物学命名法则CORBRINCAPSULE莫明和,迟胜起,张克勤2001中国被毛孢=冬虫夏草菌无性型通过个体发育生物学子囊孢子直接长出分生孢子梗及分生孢子分生孢子分生孢子梗子囊孢子子囊孢子及分生孢子CORBRINCAPSULE刘锡琎,真菌学报8(1)确定哪些菌种是真正的冬虫夏草菌种,关键是能将分离出的菌株在产地接种在蝙蝠蛾幼虫体上,或人工离体培养使之能长出含子囊孢子的子座来,才能肯定该菌种是真正的冬虫夏草菌种。目前能达到这个水平的菌种只有一个,是蝙蝠蛾被毛孢。(Hirsutellahepialichenetshen,sp.nov)谁是真正的冬虫夏草菌种?CORBRINCAPSULE天然冬虫夏草子座与人工冬虫夏草子座的形态完全一样生活史一致CORBRINCAPSULE在培养基中长出的人工子座生活史一致CORBRINCAPSULE蝙蝠蛾多毛孢菌与天然冬虫夏草一致的生物学证据生活史一致CORBRINCAPSULE氨基酸分析仪性状比较CORBRINCAPSULE基因决定性状CORBRINCAPSULE物种由DNA决定CORBRINCAPSULE分子水平一致为了证明冬虫夏草的无性型的确切种类,采用分子生物学手段,以rDNA18S和25S之间的转录间隔区(ITS区)为分子指标,通过对冬虫夏草及相关种类有性和无性阶段材料的ITS区序列进行比较分析,从基因水平对冬虫夏草的无性阶段进行分子鉴定。冬虫夏草无性型的分子鉴别赵锦1,王宁1,陈月琴1,李泰辉2,屈良鹄1(1中山大学生物工程研究中心.广州510275:2,广东省微生物研究所)CORBRINCAPSULErDNAgene结构模式图123456789101112细菌古菌真核生物保守区(相似性70%以上)高变区16S16SISR23SISR23S17S-18S5.8SITS1ITS225S-28SCORBRINCAPSULE模板DNA的制备及rDNA特定区域的PCR扩增采用CTAB法提取虫草总DNA。提取的总DNA以DPS纯化系统(包括玻璃粉,NaI)纯化后再用于PCR扩增。rDNAPCR扩增产物的克隆及序列测定PCR扩增产物经DNA纯化系统纯化后,与质粒载体连接,质粒载体为pTZ19,采用美国LifeScienceSequenaseVersion210(USB)测序试剂盒直接测定重组质粒的DNA序列。材料和方法分子水平一致CORBRINCAPSULE结果和分析分子水平一致CORBRINCAPSULEC1sinensis有性阶段ITS1区共有182碱基对,H1sinensisITS1区碱基数为184,P1sinensis,P1gunnii分别为223和209。C1sinensis与H1sinensis的序列有很大的相似性(97.1
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