研究OATP1B1-基因多态性与抗结核药物肝损害的关联

---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载-----------------------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载--------------研究OATP1B1基因多态性与抗结核药物肝损害的关联本文从网络收集而来，上传到平台为了帮到更多的人，如果您需要使用本文档，请点击下载按钮下载本文档（有偿下载），另外祝您生活愉快，工作顺利，万事如意！结核病是一种严重危害全民健康的慢性传染疾病，尤其是在非洲、东南亚和西太平洋地区，每年导致近200万人死亡。目前我国结核病年发病人数约为130万，死亡人数约13万，虽然结核病是一种古老的疾病，但其死亡率超过其他传染病死亡人数的总和。因此，结核病是我国重点控制的重大疾病之一。但抗结核药长期服用所导致的药物性肝损害(抗结核药物所致的肝损伤，antituberculosisdruginducedhepatotoxicity，ATDIH)，是结核病治疗过程中的最常见难题。抗结核药物致肝损害发生率为2%～28%，其传统的危险因素包括高龄、女性、饮酒、肝脏疾病的存在、代谢酶的遗传多态性、合并感染HBV、HCV，HIV病毒等。目前的研究发现药物导致的肝损害是一个涉及多基因、多靶点的过程，肝脏的某些相关转运蛋白在其中亦发挥重要作用。研究表明，药物转运体的功能发生变化，药物在体内的血药浓度、清除过程等均会受到影响。有机阴离子转运蛋白(organic---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载-----------------------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载--------------aniontransportingpolypeptide1B1，OATP1B1)是肝脏重要转运蛋白之一，它能从血液中摄取多种物质进入肝细胞。近年来发现OATP1B1的遗传变异对药物的疗效和毒副作用影响很大，其多态性对药物蛋白转运活性影响较为显著。OATP1B1388AG、521TC位点在亚洲人群中存在比率较高，且均位于外显子上，对蛋白的转运功能影响较大。OATP1B1是利福平等药物转运入肝脏的重要转运蛋白，目前针对OATP1B1基因型和ATDIH之间的关系研究尚少[9]。因此本研究将以中国重庆地区人群为研究对象，探讨OATP1B1基因SNP与抗结核药物导致肝损害发生的相关性，为ATDIH的发生机制及早期诊断和治疗提供依据。资料与方法一、病例来源2009年至2012年从第三军医大学西南医院、重庆市结防所和渝中区结防所收集服用抗结核药之后，导致肝损害患者的血液标本(2ml)并存于-20℃，服用抗结核药后6个月内未致肝损害的作为对照组。年龄18～75岁之间，排除病毒感染所致肝损害、联合服用其他药物导致肝损害以及有任何肝脏疾病。二、ATDIH的诊断药物性肝损伤的诊断标准：(1)单纯肝细胞损害：丙氨酸转氨酶(ALT)2×正常值高限(ULN)，碱性磷酸酶(ALP)正常或---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载-----------------------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载--------------ALT/ALP≥5;(2)胆汁淤积性肝损害：ALP2×ULN，ALT正常或ALT/ALP≤2;(3)混合性肝损害：ALT、ALP均升高2×ULN，ALT/ALP比值在2～5之间。三、基因分型从全血中提取基因组DNA，使用全血DNA提取试剂盒(omega，美国)，提取的DNA存于-20℃。选取位于外显子5上的388AG位点和外显子6上的521TC位点，使用Taqman基因分型试剂盒388AG(AssayID:c_32325356)，521TC(AssayID：c_1901697)(ABI公司)，在96孔板中每孔加入μl反应体系，UniversalPCRMastermixμl、SNPkit(Probe/Primermix)μl、H2Oμl和患者的DNA1μl(20～50ng/μl)，然后在仪器上设置荧光定量PCR反应条件(RocheLightcycler®480II)，95℃10min，92℃15s，60℃90s(50个循环)。反应结束后，保存数据，每种基因型随机挑选3例标本送测序，以明确该分型方法。四、统计学分析运用Hardy-Weinberg检验确认样本的群体代表性。基因多态性与疾病的风险分析用多因素Logistic回归分析。基因频率和Hardy-Weinberg检验等使用SPSS软件对数据进行统计分析。PG，130Asn/Asp)G等位基因频率为，rs4149056(521TC，170Ala/Val)C等位基因频率为。P肝脏生化指标药物性肝损害与SNP关系380例OATP1B1基因多态性---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载-----------------------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载--------------的Hardy-Weinberg平衡检验dbSNPID样本所选取的人群该基因频率符合遗传平衡法则，具有一定的代表性。rs2306283(388AG，130Asn/Asp)在两组间分布无统计学差异;rs4149056(521TC，170Ala/Val)在两组间分布有统计学差异。3.OATP1B1rs4149056位点与抗结核药所致肝损害的回归分析：在复层分析中，校正年龄(45岁)的影响之后，521TC基因型与抗结核药所致肝损伤仍有显著相关性P=，OR=，95%CI(，)。讨论有机阴离子转运蛋白OATP1B1特异性地分布在肝细胞的血管膜面，是近年来肝脏遗传药理学和药物基因组学研究的热点之一。随着其功能的不断深入了解以及新的SNP的发现，OATP1B1基因多态性与功能的相互关系也逐步得以阐明。其中，OATP1B1388AG、521TC是最常见的两个突变位点，它们分别位于外显子5和外显子6上，与OATP1B1蛋白表达下降和转运活性功能下降相关，其转运活性功能下降主要表现为最大转运速度的下降和对底物亲和力的降低。但目前为止，有关OATP1B1SNP，尤其是上述两位点与抗结核药物所致肝损伤的---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载-----------------------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载--------------相关性研究报道尚少。本课题通过对OATP1B1进行基因分型，检测到388AG位点在抗结核药所致肝损害组的频率为，在非药物性肝损害组为，521TC位点在抗结核药所致肝损害组为，在非药物性肝损害组为。此结果显示OATP1B1521TC位点与抗结核药所致的肝损害的发生有相关性。388AG和521TC这两个位点在已发表的NCBI数据库中的频率分别为和，本研究所测得的该两位点在中国重庆地区样本人群中的分布频率符合Hardy-Weinberg平衡检验，说明所选取的中国重庆地区的人群具有代表性，同时也显示出本实验中检测方法的稳定性、准确性和可靠性。使用Logistic回归分析，排除年龄差异后，521TC位点仍显示与抗结核药所致的肝损伤显著有关，相对风险度OR=，95%CI(，)。此结果表明该位点发生抗结核药所致肝损害的概率比对照人群显著增加。本课题中，我们发现在中国重庆地区人群中OATP1B1的多态性与抗结核药所致肝损害的发生密切相关，并且从遗传流行病学的角度上直接证实了OATP1B1521TC在抗结核药所致肝损害发生中的重要意义。OATP1B1多态性的检测能够为药物性肝炎的分子流行病学提供遗传理论基础，从而可能有助---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载-----------------------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载--------------于使其获得更好的疗效以及避免不良反应的发生。本文从网络收集而来，上传到平台为了帮到更多的人，如果您需要使用本文档，请点击下载按钮下载本文档（有偿下载），另外祝您生活愉快，工作顺利，万事如意！