9-标本采集包装运输与实验室检测

CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION埃博拉出血热（EVD）标本采集、包装、运输与检测中国疾病预防控制中心2014年12月CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION埃博拉出血热(Ebolahemorrhagicfever)是由埃博拉病毒(Ebolavirus)引起的一种急性传染病人主要通过接触病人或感染动物的体液、分泌物和排泄物等而感染。临床表现主要为突起发热、出血和多脏器损害，病死率可高达50%-90%本病潜伏期为2～21天，通常为8～10天2014年，在几内亚、利比里亚和塞拉利昂等西非国家发生历史上最严重的埃博拉出血热暴发疫情埃博拉病毒简介CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION为指导医疗机构和疾病预防控制机构工作人员对埃博拉出血热相关标本的采集、包装、运输和检测工作，保证生物安全培训目的CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION埃博拉出血热留观、疑似或确诊病例：标本采集的个人防护生物安全要求包装的要求运输的方式实验室检测方法培训内容CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION《中华人民共和国传染病防治法》《病原微生物实验室生物安全管理条例》《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》卫生部《人间传染的病原微生物名录》国际民航组织《危险物品航空安全运输技术细则》《中国疾病预防控制中心关于规范埃博拉出血热病例标本接收和检测结果反馈等工作的通知》中疾控应急发〔2014〕322号知识要点-国内的法律法规及管理办法CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION应遵守《医院感染管理规范》和《病原微生物实验室生物安全管理条例》等相关生物安全规定在标准预防的基础上，应采取避免飞沫和接触感染的预防措施标本的采集CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION采样人员应该接受埃博拉病人采血规程的培训培训内容PPE的规范使用采血要求及注意事项采血时，需2名采血人员同时在场标本的采集-人员要求CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION工作服一次性工作帽双层医用手套防渗透防护服(连帽，猴服)医用防护口罩(N95及以上)+护目镜或防护面屏或普通外科口罩+正压头盔工作鞋+一次性防水靴套或长筒胶靴防渗漏防护服(反穿式)标本的采集-个人防护CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION应提前将所有采血物品准备齐全，并配备：洗手的设施备用手套消毒液锐器盒标本的采集-物品准备CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION一般发病后2周内，可在患者血标本中检测到病毒核酸和抗原，发病后3～10天的标本核酸和抗原的检出率高留观病例、疑似病例诊断埃博拉病毒感染应采集发病3天以后的血标本标本的采集-采集时间CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION用分离胶无菌真空促凝管采集静脉血，每管3ml留观病例、疑似病例采集4管2管送指定的具有埃博拉出血热检测资质的实验室进行检测2管保存于样本采集单位或所在省级疾控中心标本的采集-采血管种类及采血量CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION采集后的处理方式应用封口膜封闭管口，消毒后由协助者将病人信息填写在采血管上，放入试管架中退入潜在污染区，将采血管放入50ml离心管内离心管消毒后，放入第二层包装尽快送检如不能立即送检，则置于4℃下保存，填写标本采集登记表保存方式全血采用冷藏运输，血清采用冷冻运输标本的采集CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION恢复期标本采集确诊病例采集恢复期血标本2份，每份2管采集时间应间隔不少于48小时，送国家疾控中心病毒病所进行埃博拉病毒相关检测，用于指导病例管理恢复期血标本，并不限定必须于出院前采集可采集发病2周后或出院(死亡)前标本标本的采集CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION采取A类包装，符合UN2814要求容器或包装材料应达到国际民航组织《危险物品航空安全运输技术细则》（Doc9284包装说明PI602）规定的A类包装标准标本的包装CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION三层包装第一层为自封袋或50ml离心管第二层为防水、防漏的安全壳容器第三层为运输包装包装要求样本应用吸水纸等包裹，固定在自封袋或离心管内在坚固、防水、防漏的第二层安全壳容器中，用吸水纸等填充物将内有标本的自封袋或离心管固定好，装入第三层包装第二层和第三次包装之间应放置冰排等制冷材料安全壳容器和外包装须与IATA危险物品条例包装制度650相符合标本的包装CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION包装中的注意事项用0.5%有效氯消毒50ml离心管表面，并在潜在污染区放入第二层包装第二层包装用0.5%有效氯浸泡消毒15min后，擦拭干净带入清洁区，放入外层包装标本的包装CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION样品清单填写标本说明两份，写明标本的基本信息、运送者及接收者地址等将标本说明密封在塑料袋里，用胶布分别粘贴于最外层包装的内侧和外侧标本相关信息需留档以便查验，方便实验室操作人员查对标本数量标本的包装CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION收取标本由医院所在地的疾病预防控制机构到医院收取标本。标本运输之前，应按相关生物安全规定，与样本接收单位生物安全管理部门联系，办理相关手续运送日期确定后，立即将运送时间和运输方式通知接收单位，做好接收准备标本的包装中国疾控中心检测的标本运输流程3.下达检测任务1.提供标本信息5.告知送样信息8.正式反馈结果3.出具标本同意接收证明4.办理准运证中心卫生应急中心联系电话：[phone]邮箱：[e-mail]省级CDC病毒病所实验室管理办公室联系电话：136831319495.送样中心实验室管理处联系电话：138116982507.向中心正式报告结果2.下达任务单2.下达任务单2.告知任务情况病毒病所病毒性出血热办公室曲靖：15810281209病毒病所疾控办王世文：13466309067传真：[phone].检测结果报告CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION省市内运送埃博拉出血热标本的运输流程CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION生物安全要求由专人专车运送，运送人员须有相关资质，且不得少于两人申请单位对与运送人员进行埃博拉病毒相关的生物安全培训在运送过程中采取相应的防护措施运输前仔细检查容器，要符合安全要求按照规定进行标本运输前的包装和送达后的开启标本运输的生物安全要求CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION省市间标本运输跨省、自治区、直辖市运输疑似病例或留观病例样本时，应当将申请材料提交至运输出发地省级卫生计生行政部门进行初审对符合要求的，省级卫生计生行政部门应当在3个工作日内出具初审意见，并将初审意见和申报材料上报卫计委审批卫计委应当自收到申报材料后3个工作日内做出是否批准的决定符合法定条件的，颁发准运证书省市间BSL-3实验室标本运输流程CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTIONWHO、美国CDC等其他国家及地区关于标本的采集、包装和运输的文件WHO的《LaboratoryGuidancefortheDiagnosisofEbolaVirusDiseaseInterimRecommendations》2014.9.19英国卫生署的《PHEMicrobiologyServicesVHFSampleTestingQueries》2014.9美国CDC的《InterimGuidanceforSpecimenCollection,Transport,Testing,andSubmissionforPersonsUnderInvestigationforEbolaVirusDiseaseintheUnitedStates》2014.10.20知识要点-国外的情况CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION推荐用EDTA塑料采血管采集全血，最低量4ml保存聚茴香脑硫酸钠(SPS)或柠檬酸采血管中,或促凝采血管也可以尿液标本也是可以的，但需要尽快检测死亡者或无法采血的儿童采集咽拭子知识要点-国外的情况-标本的采集CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTIONWHO和美国CDC包装形式均与我国一致，运输高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的容器或包装材料应当达到国际民航组织《危险物品航空安全运输技术细则》（Doc9284包装说明PI602）规定的A类包装标准知识要点-国外的情况-标本的包装CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTIONWHO关于运输主要依据《GuidanceonregulationsfortheTransportofInfectiousSubstances》2013.1.1，如果本国没有实验室可以做检测可将标本寄到《LaboratoryGuidancefortheDiagnosisofEbolaVirusDiseaseInterimRecommendations》2014.9.19所写的实验室美国则按照各州的规定运输标本知识要点-国外的情况-标本的运输CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTIONWHO发布的安全采集埃博拉出血热疑似患者血液标本WHO发布的如何安全运输埃博拉出血热疑似患者血液标本的流程（国内运输）CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION检测方法1.病毒核酸检测方法（1）实时荧光定量RT-PCR法（2）一步法常规RT-PCR方法2.埃博拉病毒抗原抗体检测方法（1）埃博拉病毒抗原检测方法（双抗体夹心法ELISA、胶体金快诊）（2）埃博拉病毒IgM抗体检测（抗体捕捉法ELISA）（3）埃博拉病毒IgG抗体检测方法（间接法ELISA）标本的检测CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION埃博拉病毒的实验室检测相关活动严格按照《人间传染的病原微生物名录》的要求，在相应的生物安全级别实验室开展病毒培养在BSL-4实验室动物感染实验在ABSL-4实验室未经培养的感染材料的操作在BSL-3实验室灭活材料的操作在BSL-2实验室按照《病原微生物实验室生物安全管理条例》等相关规定要求，做好生物安全工作实验室生物安全要求CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION埃博拉病毒检测机构应将所有阳性和部分阴性血清标本送中国疾病预防控制中心病毒病所进行复核检测实验室检测结果应及时反馈标本送检单位，并尽快上报上级主管部门CHINESECENTERFORDISEASECONTROLANDPREVENTION埃博拉病毒相关感染