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生物选修一一、果酒和果醋的制作(一)果酒制作的原理酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌·酵母菌的生殖方式:出芽生殖(主要)1、在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大量繁殖。C6H12O6+6O2→6CO2+6H2O2、在无氧条件下,酵母菌能进行酒精发酵。C6H12O6→2C2H5OH+2CO23、酵母菌发酵的条件20℃左右的酸性环境最适宜酵母菌繁殖,酒精发酵时一般将温度控制在18℃-25℃。(二)果醋制作的原理1、醋酸菌是单细胞细菌(原核生物),代谢类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂。醋酸菌最适生长温度为30~35℃。2、酒变醋的原理在醋酸菌的作用下,酒首先被氧化成乙醛,进而被氧化成醋酸(乙酸)。C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O二、腐乳的制作3、豆腐长白毛是怎么一回事?是毛霉的白色菌丝。1、原理:毛霉等微生物将豆腐中的蛋白质分解成多肽和氨基酸,将脂肪分解成甘油和脂肪酸。毛霉是一种丝状真菌。代谢类型是异养需氧型。生殖方式是孢子生殖。营腐生生活。2、实验流程:让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制5、为什么要用盐将长毛的豆腐腌起来?盐能防止杂菌污染,避免豆腐腐败。4、吃腐乳时,你会发现腐乳外部有一层致密的“皮”。这层“皮”是怎样形成的呢?它对人体有害吗?“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝(匍匐菌丝),它能形成腐乳的“体”,使腐乳成形。“皮”对人体无害。1、乳酸菌的代谢类型是异养厌氧型。在无氧条件下,将糖分解为乳酸。分裂方式是二分裂。三、制作泡菜并检测亚硝酸盐含量酶C6H12O6→2C3H6O3(乳酸)+能量2、亚硝酸盐为白色粉末,易溶于水,在食品生产中用作食品添加剂。亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应后,与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色,再与已知浓度的标准显色液目测比较,估算泡菜中亚硝酸盐含量。亚硝酸盐含量发酵时间(d)3、一般在腌制10天后亚硝酸盐含量开始降低,一般腌制半个月以后再食用。菌种项目酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物学分类真核生物原核生物真核生物原核生物代谢类型异养兼性厌氧异养需氧异养需氧异养厌氧繁殖方式适宜条件下出芽生殖二分裂生殖孢子生殖二分裂生殖生产应用酿酒酿醋制作腐乳制作泡菜发酵条件前期需氧,后期不需氧一直需氧一直需氧不需氧习题1、(2010·广东理综)小李尝试制作果酒,他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验(见图),恰当的做法是(双选)()A.加入适量的酵母菌B.一直打开阀b通气C.一直关紧阀a,偶尔打开阀b几秒钟D.把发酵装置放到4℃冰箱中进行实验习题2、下列关于腐乳制作过程的说法,正确的是()A.制作腐乳时只有毛霉发挥作用B.豆腐的表面长出青色物质则标志着腐乳制作完成C.在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与D.制作腐乳时加盐是为了促进毛霉的生长四、微生物的培养与应用1、培养基:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配置出供其生长繁殖的营养基质。2、培养基营养构成:水、碳源、氮源、生长因子和无机盐,此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。液体培养基(一般用锥形瓶盛装)固体培养基(一般用试管或培养皿盛装)3、培养基的分类和应用划分标准培养基种类特点用途物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂,如琼脂观察微生物的运动、分类、鉴定固体培养基加凝固剂,如琼脂微生物分离、鉴定、活菌计数化学组成天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成)分类、鉴定目的用途选择培养基培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物鉴别培养基根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物4、无菌技术1、消毒:使用较为温和的方法(酒精、紫外线)来杀死部分对人体有害的微生物。2、灭菌:使用较为强烈的理化因素杀死物体内外的所有微生物(包括芽孢和孢子)。15~30min100kPa,121OC培养基、实验器具等高压蒸汽灭菌1~2h干热灭菌箱内,160~170OC中能耐高温并需要保持干燥的玻璃器皿、金属用具等干热灭菌直至烧红在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧接种金属用具、试管口、瓶口灼烧灭菌灭菌时间所需条件适用对象灭菌方法3、三种常用灭菌方法的比较5、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)基本过程:称量→溶化→灭菌→倒平板高压锅灭菌冷却到50OC左右时倒②平板冷凝后,为什么要将平板倒置?平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,倒置可防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。①为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。6、微生物接种方法:平板划线法和稀释涂布平板法。(1)平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体称菌落。优点:可以观察菌落特征,对混合菌进行分离缺点:不能计数一般用于分离微生物的纯种(2)稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落。优点:可以计数,可以观察菌落特征。缺点:吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延。计算公式:每克样品中的菌落数=(C/V)×M【C:平板上的平均菌落数,V:涂布平板时所用的稀释液体积,M:稀释倍数】7、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)选择培养基:允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。(2)在培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是是什么物质?碳源是葡萄糖,氮源是尿素。(3)鉴定的原理:细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,会使培养基的pH升高。(4)鉴定方法:在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,指示剂变红,证明该细菌能分解尿素。8、纤维素分解菌的筛选刚果红染色法:刚果红能与纤维素形成红色复合物,而不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。用加入刚果红的纤维素培养基去培养微生物时,如果培养基中出现以菌落为中心的透明圈时,可说明该菌落是纤维素分解菌,因为它已将被刚果红染成红色的纤维素分解了。习题3、要从多种细菌中分离某种细菌,培养基要用()A.加入青霉素的培养基B.加入高浓度食盐的培养基C.固体培养基D.液体培养基习题4、产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是()A.一个细菌,液体培养基B.许多细菌,液体培养基C.一个细菌,固体培养基D.许多细菌,固体培养基五、植物的组织培养技术(一)植物组织培养的基本过程离体器官、组织或细胞脱分化愈伤组织再分化根、芽植物体(二)影响植物组织培养的因素•不同的植物组织、同一植物的不同材料•营养、环境条件、植物激素细胞既分裂也分化先使用细胞分裂素,后使用生长素分化频率提高同时使用有利于细胞分裂,但细胞不分化先使用生长素,后使用细胞分裂素实验结果使用顺序植物激素用量生长素>细胞分裂素有利于根的分化、抑制芽的形成生长素<细胞分裂素有利于芽的分化、抑制根的形成生长素≈细胞分裂素促进愈伤组织的形成MS培养基特点:提供了大量无机营养。而微生物培养基以有机营养为主。1、制备MS固体培养基①配制母液②配制培养基③灭菌2、外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培实验操作:1、影响花药培养的因素不同植物同一植物的不同生理状况(花期早期-初花期)合适的花粉发育期(单核居中期与靠边期之间)此外,植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等培养基的组成2、产生花粉植株的两种途径花药培养产生花粉植株的两种途径(三)月季的花药培养材料的选择习题5、在菊花的组织培养操作完成了3~4天后,观察同一温室中的外植体,发现有的瓶内外植体正常生长,有的瓶内外植体死亡,你认为外植体死亡的原因不可能是()A.接种时培养基灭菌不彻底B.接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体C.愈伤组织形成初期没有给予充足的光照D.培养过程中保持温度、pH的适宜,但没有及时调整各种营养物质、激素的比例习题6、下列关于植物组织培养的叙述中,正确的是(双选)()A.培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压B.培养时先使用生长素后使用细胞分裂素,细胞既能分裂,又能分化C.离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织D.在进行花药离体培养时确定花粉发育时期可用刚果红染色法六、酶的研究与应用1、细胞壁的结构及作用:成分:纤维素和果胶作用:保护、支撑细胞2、果胶酶能够分解果胶,瓦解植物细胞的细胞壁及胞间层,使榨取果汁更容易,而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸,也使得浑浊的果汁变得澄清。3、影响酶活性的因素a.温度b.pHc.酶的抑制剂4、加酶洗衣粉:含有酶制剂的洗衣粉。酶制剂:蛋白酶,脂肪酶,淀粉酶,纤维素酶,复合酶。①普通洗衣粉:颗粒大而疏松,溶解性好,泡沫较为丰富,但去污力相对较弱,不易漂洗,一般适用于手洗。②浓缩洗衣粉:颗粒小,密度大,泡沫较少,但去污力至少是普通洗衣粉的两倍,易于清洗,节约水,一般适用于机洗。5、酵母细胞的固定化类型优点不足直接使用酶催化效率高;低能耗;低污染等。易失活;难回收,成本高;酶混合在产物中可能影响产品质量。固定化酶既能与反应物接触,又能与反应物分离;可重复利用一种酶只能催化一种或一类反应,而生产中很多产物需一系列酶促反应才能得到。固定化细胞(包埋法)成本低;操作更容易大分子物质难以自由通过细胞膜使应用受到某些限制。固定化酶和固定化细胞的原理是什么?就是将酶固定在不溶于水的载体上,或者将微生物细胞均匀地包埋于不溶于水的多孔性载体上,使酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时,固定在载体上的酶还可以被反复利用的技术。习题7、固定化酶技术是近几年新兴发展起来的一项酶应用技术,它很好的解决了酶的重新利用的能力,大大提高了酶的利用率,从而避免了酶的浪费问题。下列关于固定化酶技术的说法正确的是()A.固定化酶技术就是固定反应物,将酶依附着载体围绕反应旋转的技术B.固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应C.固定化酶中的酶无法重复利用D.固定化酶是将酶固定在一定空间内的技术习题8、(2010江苏高考)某种蛋白酶是由129个氨基酸脱水缩合形成的蛋白质,下列叙述正确的是()A.该蛋白酶分子结构中至少含有129个氨基和129个羧基B.该蛋白酶溶液与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应C.利用透析法纯化该蛋白酶时,应以蒸馏水作为透析液D.用含该蛋白酶的洗衣粉去除油渍,效果比其他类型加酶洗衣粉好七、DNA的粗提取与鉴定1、DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同。DNA不溶于酒精,可将DNA与蛋白质进一步的分离。2.DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60—80℃的高温,而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。3.DNA的鉴定沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,因此二苯胺(现配现用)可以作为鉴定DNA的试剂。4、DNA的获取:①动物细胞:以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。②植物细胞,需要先用洗涤剂溶解细胞膜。例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于DNA的释放;食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。注意:以血液为实验材料时,每100ml血液中需要加入3g柠檬酸钠防止血液凝固。八、PCR技术扩增DNA1、PCR(聚合酶链式反应)是一种体外迅速扩增特定的DNA片段的技术。2、原理:DNA双链复制3、过程:第一步(变性):加热至90~95℃,氢键断裂,形成单链DNA;第二步(退火):冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链;第三步(延伸):加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。九、血红蛋白的提取
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