水生生物研究方法

第四篇水生生物的采集和调查方法学习重点各类水生生物的采集方法固定、计数，生物量换算一、采样点的选择采样点在平面分布上必须要有代表性，除湖心、库心、河心以外，湖湾、库湾、上中下游、进出水口等必须设点。垂直分层设点二、记录：天气、日期、时间、风向、表底层水温、气温、理化因子、标本号等三、采集工具、药品、必备器材：浮游生物网、采水器、浓缩沉淀器、采泥器等采水器浮游生物网1－网口部；2－头锥部；3－过滤部；4－网底部；5－网底管浮游植物、动物定量工具1－内侧拉钩；2－卡盖；3－金属环；4－金属活页；5－把手；6－弹簧；7－固定夹螺丝；8－气门；9－触杆；10－上挂钩；11－弹簧片；12－下挂钩；13－钢丝绳；14－橡皮筋；15－采水筒；16－出水嘴；17－钢丝绳槽；18－使锤采泥器网底管四、浮游植物的采集、保存、计数1.定性标本采集(1)采集工具A.浮游生物网网布：丝质或尼龙筛绢25号——网孔0.064mmB.制网：网口直径20cm，网衣长60cm，圆锥形的网头，其内孔的体积为25-30cm3。(2)其它用品：固定液、显微镜，各种瓶，水温计，萨氏盘等(3)采集：作“∞”的捞取，着生藻类可以用镊子夹取或用小刀刮，漂浮于水中的藻块可以取其不同颜色的藻块。(4)固定：标本液放入指形管中固定。A-甲醛：100ml水样加4ml甲醛，标本液浓度约为4%B-鲁哥液：1000ml水样加15ml鲁哥液，并加几滴甲醛。配制：KI——6g；I——4g；H2O——100ml，（20mlH2O+KI先溶解，再加I并加水至100ml）C-波恩氏液（苦味酸溶液）苦味酸饱和溶液75ml，甲醛液25ml，冰醋酸3ml，带水标本加入等量的波恩液，此溶液对标本组织保存比较好（5）标签：写标本号，日期，采集地，采集人等（临时性、永久性）。（6）镜检：识别种类（活体、固定标本观察，临时性可以用甘油封片）定性标本分析：以一个视野中出现的数量的多少来表示。+稀少1%以下；++很少1-5%，+++较多5-30%，++++很多30-60%，+++++大量60-100%2.定量标本的采集、处理和计数(1)采样工具：采水器、浓缩沉淀器、固定液，1000ml广口瓶，30ml广口瓶，盖玻片22*22mm，0.1ml计数框，计数器等。(2)采样固定：用采水器在一定深度（或表底层混合）采水样1000ml，倒入广口瓶中，加15ml鲁哥液固定。(3)把水样带回实验室，在沉淀浓缩器中沉淀48小时，浓缩为30ml，过多时则取出清液。(4)计数：A．将浓缩液摇动200-300次，摇匀后用0.1ml吸管取0.1ml样品放入0.ml计数框内，盖上盖玻片进行计数；如果盖上后水溢出或有气泡就必须重做。B．计数100视野或行格法，数两片，取其平均值，误差不超过15%。C．计算公式1）视野法：N=N——每升原水样中浮游植物数量。A——记数框的面积20×20=400mm2，400/0.093=4301个视野。Ac——计数面积（mm2）Vs——1L水样浓缩后的体积——30ml。Va——计数框的体积——0.1ml。K值=（400÷0.093÷100视野）×30÷0.1=12900其中视野面积为0.093mm2计数框视野数为400÷0.093=4301（A）n——计数所得的浮游植物的数目nVaVsAcA)(2）行格法：①计数：用上述方法摇匀30ml的浓缩水样，用0.1ml定量吸管吸取0.1ml标本液置于0.1ml计数框中，盖上盖玻片（22×22mm），在高倍镜下对计数框上第二、五、八行共30小格（全片为10行，共100格）进行分门别类计数。②1升水中浮游植物个数的计算公式计数的浮游植物个数毫升计数的标本水量毫升由一升水浓缩标本水样升水样中浮游植物个数)1.0()30(11033）水滴法：制作1ml的定量吸管，全片计数。如1ml=20滴水。N=30÷（1÷20）×计算所得个数D．个数与生物量的换算浮游植物比重为1，用几何公式算出体积。圆柱体：V=πr2h；球体：V=4/3πr3；三角形：V=1/2bh所以细胞体积就相当于细胞重量以μm3计算109μm3=1mg鲜重=1mm3*用个体表示：个体大小不一致，就不易表现出饵料的丰欠。*体积计算是用20个以上个体的平均值来确定五、浮游动物的采集、保存、计数1．定性标本的采集、保存：同浮游植物用16号或13号网，Nx45=13号，16号网孔为0.86mm。定性标本的处理：当时不观察可放在阴处，观察活体可加麻醉剂如：水和氯醛、可卡因、氯仿、乌拉坦；处理同藻类2．定量标本采集处理、计数、生物量换算（1）采集A.原生动物、轮虫：采水样、浓缩同浮游植物，可共用一个标本B.枝角类、桡足类：采不同水层水样15-50L用25号浮游生物网过滤（2）计数A.原生动物用0.1ml计数框，全部计数B.轮虫用1ml计数框，全部计数C.枝角类和桡足类的过滤样品全部计数D.计算公式：单位ind.L原生动物：N=V/v×n/c=30/1×0.5/0.1=150个轮虫：N=V/v×n/c=30/1×30/1=900个V——沉淀体积（ml）；v——采水体积（L）；c——计算体积（ml）；n——计算个数枝角类、桡足类：N=n/v=100÷10=2个（3）生物量计算A．体积计算轮虫体重：最小0.06μg，最大为0.702-16.74μg1μg=10-6mm3例如：萼花臂尾轮虫：一般椭圆形，V=0.25abc或V=0.13a3当b=0.65a；c=0.37a，体长a=233.19μm时，体重2.5μgB．生物量估算一般取0.003mg作为无节幼体的湿重粗略估算时可以取前人已经计算的一些浮游生物重量，但是生物在不同环境的变异较大，应重新计算1、选点选江河流入库湾弯部分水库近坝区、洪水区、库中心、淹没的水草区六、底栖动物的采集和测定方法2.采集工具：带网夹泥器：面积为1/16m2，采集软体动物改良彼得生采泥器：（开口面积为1/16或1/20m2），昆虫、寡毛类、软体动物埃克曼采泥器：面积1/40m2，昆虫、寡毛类分样铜筛（40目/寸）、塑料水桶、白色解剖盘、小镊子、解剖针、脸盆、毛笔。广口瓶（30-50ml，250ml），塑料袋。药品：甲醛液、乙醇75-80%2．标本采集、整理、称重、固定放在白磁盘中，捡出各类标本，固定后，吸干水，称重，计算；每点采集两次，取其平均值。固定液：水蚯蚓——甲醛；昆虫、软体动物——75-80%酒精。3．生物量换算如用1/40面积采泥器，则个数（重量）×40用全湖平均密度和生物量个/亩，克/亩底栖动物采集记录表河、湖、水库采集日期：年月日七、水生高等植物的采集、固定、保存、称重1．定性采集：用拖草器2．定量采集：定点：从岸边到湖心，断面间距500-1000m，单数断面点上的点距：100-200m工具：水草铗，面积0.25m2，每点采集两次冲洗：洗泥，除去框外的植物体，除去枯死的枝叶根后，进行分类称重：装袋生物量计算：鲜重干重：选100g鲜重样品，放在盘内，置于干燥通风处，晾干、揉细，再称重，为鲜重风干重；再置于105℃烘箱中烘干，其称重重量为100g鲜重的烘干重总生物量：单位面积的生物量×分布的面积3．各种植物的百分比4．各种植物符号：菹草——；莲——；荇菜——；轮叶黑藻——；满江红——；菱——5．标本保存浸于4%福尔马林中浸于CuSO4溶液中制成腊叶标本6．植物体在水体中的分布植被：在一定范围内覆盖地面植物及其群落的泛称群丛：以群丛的结构特征和外貌为依据；植被的基本单位根据建群种类而拟定，按建群种类的植物高低层次排列；高挺水——低挺水——浮水——高沉水——低沉水层次不同的建群种类用“—”连接；层次相同的建群种类用“+”连接；如：苦草+黑藻群丛芦苇—满江红—马来眼子菜+聚草+苦草