小鼠繁殖技术培训

小鼠繁殖技术培训繁殖技术培训必要性•科学的对实验动物进行繁殖活动。•提高繁殖效率。•合理利用资源。•成功的保存动物品系，保证实验的顺利进行。•确保动物福利的顺利实施。小鼠的生物学特性•Themostwidelyusedspeciesofmouseinresearchisthecommonhousemouse,Musmusculus.•远交系和近交系小鼠的生物学特性SwissWebster,CD-1,ICR.•BALB/c,analbinomouse(Figure18.1)•C3H,anagoutimouse(agoutireferstoabrowncolortickedwithblack)(Figure18.2)•C57BL/6,ablackmouse(Figure18.3)•DBA,theoldestinbredmousestrain,whichisbrownincolor(Figure18.4)•FVB,analbinomouse•129,alight-belliedagoutimouseOutbreedInbreed•BALB/c,analbinomouse(Figure18.1)•C3H,anagoutimouse(agoutireferstoabrowncolortickedwithblack)(Figure18.2)•C57BL/6,ablackmouse(Figure18.3)•DBA,theoldestinbredmousestrain,whichisbrownincolor(Figure18.4)•FVB,analbinomouse•129,alight-belliedagoutimouseInbreed129小鼠的生物学特性•咬合不正malocclusion小鼠的生物学特性小鼠的生物学特性体重（克）成年雄性：20-40成年雌性：18-35新生小鼠：1-1.5体温37-37.2℃心率（次/分钟）310-840呼吸次数（次/分钟）84-230生命周期（年）1-3日消耗量（每10克体重）饲料：1.2-1.8克饮水：1.5毫升生理周期（天）4-5繁殖形式多求偶（Polyestrous）妊娠周期（天）19-21产仔数4-12首次吃固体饲料时间（天）11-12断奶时间（天）21-28•性别判定小鼠的繁殖学特性发情与交配•雌性小鼠的生理周期为4-5天。在出生后4-5周将出现首次发情，但是一般第一次交配活动应发生在出生后50天。雌性小鼠在交配后24小时内在外阴部或者笼内可以见到阴栓，阴栓可以作为判定小鼠是否怀孕的依据之一。如果未见到阴栓，可通过每日称量小鼠体重来判定怀孕。通常交配13天后即可观察到每天体重的增加。小鼠的繁殖学特性发情与交配•雌性小鼠在分娩后14-48小时可出现再次发情，既产后发情。如果这个时期雄性小鼠仍然留在饲养笼盒内，雌性小鼠可能再次受孕（血配）。错过产后发情期，雌性小鼠再次受孕出现在仔鼠断奶后。小鼠妊娠周期为19-21天，产后发情受孕的雌性小鼠会继续哺乳仔鼠，其分娩日期根据仔鼠的断奶时间会推迟几天。产后发情雌性小鼠再次分娩时，上一批次仔鼠应分笼饲养，以免拥挤和伤害新生仔鼠。小鼠的繁殖学特性•交配鉴定1.阴道栓2.阴道涂片3.称重4.B超小鼠的繁殖学特性•新生小鼠为粉红色，无毛发，双眼紧闭。出生后不久可以在仔鼠左侧腹部观察到一小块白色区域，通常称为乳斑（milkspot）。乳斑是新生小鼠饲喂状态的标志，出现乳斑的小鼠，说明母鼠饲喂正常。仔鼠一般在10-14天开始睁眼和出现毛发。仔鼠出生后数日（3-5天）应避免笼盒更换等饲养活动的干扰，避免母鼠会出现食仔的现象（cannibalize）。小鼠的繁殖学特性小鼠的繁殖学特性•MonogamousMating（一夫一妻）繁殖策略MatingSystemInthemonogamousmatingsystem,onemale(thesire)andonefemale(thedam)areselectedbythebreederandputtogetherinacage.Theymaybelefttogetherlongterm,oftenforthedurationoftheirbreedinglife.Thissystemsimplifiesrecordkeepingand,oncetheproperpairinghasbeenestablished,lendsitselfwelltomaintainingbothoutbredandinbredrodentcolonies.•PolygamousandHaremMating（一夫多妻）繁殖策略MatingSystem•Inpolygamousmating,thefemalesareremovedastheybecomepregnant;inharemmating,thegroupiskepttogether.•Therefore,theharemsystemcanbeusedformaintainingcoloniesonlywhenitisnotcriticaltoknowwhichfemaleisthemother.•Thecagemustbelargeenoughtopermitproperhousingofadultsandyounguntiltheoffspringareoldenoughtobeweaned(separatedfromtheirmother).•SeparateHousing（周末夫妻）繁殖策略MatingSystemSeparatehousingisthesystemofchoiceifmalesareknowntokilltheyoung,orifmalesandfemalesareaggressivetowardeachother.Rabbitsandhamstersaretypicallyhousedseparatelyforthesereasons,andbroughttogetheronlyformating.•记录Record种鼠的ID种鼠的出生日期配种的日期生第一胎时的年龄雌性生仔时的日期每胎出生的仔鼠数量每胎的性别比例离乳时仔鼠的数量也可能标明预计的种鼠退役年龄/日期将笼盒的卡片信息转移到电子数据库中繁殖策略MatingSystem持续性监测种鼠更新数据库–井然有序不断的沟通(种群管理者,设施管理者,动物使用者,兽医)灾难应急预案种群分离冷冻保存繁殖策略MatingSystem繁殖策略MatingSystem繁殖策略MatingSystem07/533thdaysafterpaired1C57getpups21stdaysafterpaired22nddaysafterpaired23rddaysafterpaired24thdaysafterpaired20thdaysafterpaired1C57and2CD1sgetpups1C57and1CD1getpups2C57sand4CD1sgetpups1CD1getpups1CD1getpups06/1706/1806/1906/2006/2107/1038thdaysafterpaired1C57getpups06/2326thdaysafterpaired1C57getpups06/2225thdaysafterpaired1CD1getpups•光照周期的不稳定可以导致雌鼠情期出现紊乱，正常饲养光照周期为12小时明：12小时暗，对繁殖种群可采取10小时明：14小时暗。•噪音和振动•动物丰富物：做窝材料•饲料•繁殖策略影响小鼠繁殖活动的因素•动物丰富物影响小鼠繁殖活动的因素•动物饲料影响小鼠繁殖活动的因素•李-波特氏（Lee-Boot）效应：当4只雌性小鼠或更多的雌性小鼠养在一起，这种群养雌鼠在缺乏雄鼠的刺激下，使得雌性小鼠发情受抑制。小群饲养的雌性小鼠常在没有交配情况下发生假怀孕现象。假如以30只或更多只关在一起，则会发生不发情现象。〔在小群饲养的雌鼠，FSH下降，倾向假怀孕；在较大的群聚雌鼠，FSH剧烈下降导致不发情〕影响小鼠繁殖活动的因素•布鲁斯效应(Bruce)：雌鼠在交配后不久与陌生雄鼠直接接触或暴露于含有陌生雄鼠化学气味的环境中，会导致雌鼠妊娠终止(流产)的可能性增加，4-5天后重新发情，•而与配偶雄鼠及其气味的接触则不会产生这种现象。雌性小鼠在原配种后24小时内与陌生雄性小鼠接近，约有30%母小鼠会有妊娠阻碍及胚胎着床受抑制现象。在第二只雄性小鼠与原配种雄性小鼠为不同品系时，会发生最大效应。影响小鼠繁殖活动的因素•魏顿氏（Whitten）效应：群体笼饲的雌性小鼠可能会进入一个连续的不发情期，一旦有雄性小鼠气味或其尿液出现，则此种不发情会被雄性信息素所中断。大多数的雌性小鼠会在第三个夜晚（72小时）进入发情期，出现发情的高峰，即所谓的Whitten效应。群聚之雌性小鼠与雄性小鼠交配，在受到雄性小鼠信息素刺激的第三天会进入配种的高潮。在大鼠同样也有此种现象，但较不显著影响小鼠繁殖活动的因素小鼠繁殖方法及举例说明严国锋，实验动物科学部近交系繁殖交配•全同胞交配—晋级•半同胞交配—晋级•回交交配—不晋级•旁系血亲交配方式—回退到共同祖先的代数注意：二十代以后，不但有少量杂型基因（绝对的纯合是不存在的），而且存在着抽样误差以及自然突变。——不管是多少代必须保持品系的近交繁殖近交衰退近交——保持正常生物适合度的基因组合受到不同层度的破坏，其表现形式：体型大小生长率寿命对疾病的感受性生活力体力生殖力种鼠的选择•亲本的繁殖数据–亲本的哺育技能–每窝产仔数–动物背景病变史•遗传标准和繁殖体系–遗传修饰的特性–遗传方式•生产目标留种的选择方法个体的选择——表型满意亲本的生育力——Q=窝前日数/新生活仔数家系的选择——多雌性判断雄性的生育能力家系内选择——多使用于封闭群，不必计较家系内平均值种鼠替代标准首次交配后周数69121821预期产仔窝数1或者更多2或者更多3或者更多4或者更多替代（必须替代）种鼠退役标准（连续性生产）有效的繁殖期限每月种群退役百分数（%）5个月206个月16.77个月14.38个月12.59个月11.110个月10注：每个月淘汰比率以上个月为基数计算繁殖对雌雄比例一雄一雌优点—管理简单、减少错误几率、可提高产量、缩短生产周期缺点—如雌性营养及体质不强导致仔鼠质量差，恶性循环、遗传学角度出发一雌一雄纯合度差。一雄多雌优点—分居生产带奶质量好、雌性容易保持健康、群体纯度好缺点—周期较长、繁殖对利用率不高、管理较繁琐繁殖系统平行线系统12345基代代繁殖系统单线系统繁殖系统1234代56修饰单线繁殖系统解决繁殖性能问题识别问题••小鼠不繁殖••小鼠不怀孕••小鼠怀孕了，但没看到仔鼠••小鼠生仔了，但不带仔••小鼠怀孕生仔，并抚育仔鼠，但是仔鼠发生死亡••小鼠产仔量不多••小鼠看起来不对影响繁殖性能的因素动物本身–年龄–身体状况–疾病–品系类型–遗传突变环境•–光照•–饮食•–噪音•–振动•–温度•–湿度•–气味•–操作•–季节变化年龄–适配年龄在6-8周–6-8月后繁殖性能下降–雄性服役时间可能比雌性时间长•早点交配?–阴道口张开~4-5周龄时•饮食中的天然植物激素可能加快阴道口张开的时间–第一次发情可能不排卵–窝产仔数较少•晚点交配?–第一次交配3月龄，可能不繁殖身体状况和疾病•肥胖/行动迟缓的雄性交配行为减弱•肥胖雌性–怀孕的可能性减少–产仔/窝数少–易难产•急性的/慢性疾病可能影响繁殖性能±造成胚胎期/围产期的死亡解剖学相关的问题•解剖结构上或者先天性缺陷–阴道口闭锁–阴道斜隔–雄性隐睾–雌雄同体Gearhart,S.etal.CM54(4).2004品系影响•近交系小鼠繁殖性能不一.•品系特征–攻击性(SJL)–第一胎食仔(C57BL/6)•近交系繁殖退化–窝产仔数下降•杂交繁殖性能强–不慎遗传污染•突变(转基因,基因