人巨细胞病毒潜伏—激活感染诊断的进展

临床免疫学疾病的实验室检测-2(clinicalimmunologicaltest)--part2肿瘤标志物的检测肿瘤标志物(tumormarker;TM)：Asubstancethatmaybefoundintumortissueorreleasedfromatumorintothebloodorotherbodyfluids.Ahighlevelofatumormarkermaymeanthatacertaintypeofcancerisinthebody.(肿瘤细胞所产生或分泌的某种蛋白质,它们的出现与肿瘤的存在和发展有密切关系。)肿瘤标志物的分类(classify)：1、肿瘤特异性抗原(TSA）2、肿瘤相关性抗原(TAA）3、肿瘤细胞增生(proliferation～)4、癌基因、生长因子与受体5、肿瘤抑制基因和基因产物1、肿瘤特异性抗原（TSA）：指仅表达与肿瘤细胞表面，而不存在于正常组织细胞的新抗原。2、肿瘤相关性(associable)抗原:TAA:是指非肿瘤细胞所特有，正常组织细胞也可表达的抗原物质，作为肿瘤标志物监测，是因为此类抗原在癌变细胞的表达水平远超过于正常细胞，但又无严格的肿瘤特异性。3、肿瘤细胞增生标志物：是指与肿瘤细胞增(proliferation)：的标志性物质，目前被广泛接受的有Ki-67和PCNA（增生细胞核抗原）。因为Ki-67和PCNA的免疫反应性与细胞增生的形态特征关系密切。4、癌基因、生长因子与受体：正常细胞有原癌基因，当原癌基因激活后变成癌基因，可引起细胞恶性转化癌基因的作用中又需要生长因子及其受体的协同参与～。例：HER-2/neu基因Ras基因表皮生长因子受体5、肿瘤抑制基因和基因产物：是指抑制肿瘤发生、发展的基因（抑癌基因）和其基因产物。例：Rb基因p53基因等主要肿瘤标志物检测:1、CEA2、AFP3、CA12-54、PSA5、CA19-96、NSE7、SCC8、HCG注：标志物的本质(nature)、检测方法(mathod)、参考值范围(referencevalue)、临床意义(significance)及注意事项(attention）。1、CEA（carcinoembryonicantigen）癌胚抗原-于1965年被发现，通过由人直肠组织提取物免疫动物获得抗血清并经吸收。再将此抗血清与肿瘤/正常组织分别反应，只与肿瘤组织有反应。由于此抗原也能在胚胎组织中发现，故称“癌胚抗原”。检测方法有ELISA、RIA、自动免疫～CEA在正常情况下由胎儿胃肠道上皮、胰腺和肝细胞合成，经胃肠道代谢。肿瘤状态时CEA大量分泌并经入血和淋巴液循环导致血清中CEA上升。正常群体CEA值：＜3ug/L;吸烟者＜5ug/L;孕妇的前6个月升高,产后恢复测得值＞60ug/L时,肿瘤?(恶性/良性)意义及注意事项:(significanceandattentions)1、值升高—胃、结/直肠、肺癌，胰胆道与膀胱癌（待检物来源）2、注意—良性肿瘤（病症）也可升高转移时升高，术后恢复持续升高，示预后不良不宜选为筛选（假阳/阴性）(falseposiyive/negative)2、AFP（alpha-fetoprotein）：甲胎蛋白-是胚胎期肝脏和卵黄囊合成为胎儿循环中主要蛋白，出生后水平下将，18个月后至正常人水平。肝细胞恶变又可获其功能导致血清含量增高(rejuvenated,返祖)，目前成为肝细胞和生殖（非精原）细胞恶性肿瘤的标志物。AFP的检测方法同前外，用金标记测定正常成人：血清＜10ug/L；妊娠14周起上升至2～3g/L后逐降，足孕70mg/L分娩后迅速下降。意义：＞500ug/L多见于原发肝癌。良性肝病也可升高，但多＜200ug/L。多用于筛选、判断预后及调整治疗等。3、CA12-5/5、CA19-9：属糖类抗原标志物，使由肿瘤细胞分泌释放或存于该细胞表面的抗原，又归属肿瘤相关抗原。有CA12-5（卵巢癌相关）；CA19-9（胰腺、肠癌～）；乳腺癌（CA15-3）消化系统（CA242）及CA50等。CA12-5：在卵巢肿瘤上皮和Mullerian副肾管来源的组织中表达（病理/正常）正常人血清≤35U/ml。CA12-5血中代谢快，测得值反映近期CA12-5值升高—恶性肿瘤（晚）少数异位症、良性等CA12-5监测（动态），反映病情、预后（手术指征）CA19-9：一种与胰腺、胆囊、结肠和胃癌等相关的肿瘤标志物，本质为细胞膜上的糖脂质，因制备的单克隆抗体而命名。正常参考值≤37U/ml。胰腺癌的阳性率70～92%，胆管癌66%胃癌25～60%，肝癌56～60%，结直肠癌18～58%。伴黄疸的良性疾患也可升高，但一般不＞120U/ml，随处置而下降。4、PSA（prostatespecificantigen）：前列腺特异抗原—由前列腺分泌的单链糖蛋白，存在于前列腺管道上皮细胞中发生前列腺癌时血清中含量升高。正常男性：＜4ug/L（f-＜1ug/L）升高：前列腺癌、增生、炎症等应用：普查、疗程跟踪、复发监测6、NSE(neuronspecificenolase)神经元特异性烯醇化酶—是烯醇化酶的同功酶，正常存在于神经组织和RBC中，正常人血清值＜13ug/ml。升高：小细胞肺癌、神经母细胞瘤和其内分泌肿瘤及脑损伤。注意：标本禁止溶血动态监测可用于疗效、评估预后等。7、SCC（鳞状细胞癌抗原）：属糖蛋白是一种鳞状细胞癌标志物（宫颈癌、肺癌、头颈部癌等）,血清＜1.5ug/L。8、HCG（人绒毛膜促性腺激素）：作为绒毛膜上皮细胞癌标志，异位妊娠？检测HCG包括总HCG和f-HCG。～肿瘤标志物的应用原则（～appliedprinciple）相关的标志物联合检测—提高灵敏度阳性标志物的动态监测—提高准确性（union/dynamics）不宜凭单项、单次的检测结果下诊断结论肿瘤标志物的联合应用（～jointapply）例：肺癌：NES、CEA、CYFRA21-1乳腺癌：CA15-3、CEA肝癌：AFP、CEA、AKP同功酶胰腺癌：CA19-2、CA242、CA50卵巢癌：CA12-5、CEA、CA19-9HCG自身免疫性疾病的免疫学检验（diagnosticofautoimmunedisease）Systemiclupuserythematosus；SLERheumatoidarthritis；RAHashimoto’sthyroiditisAnkylosingspondylitisAutoimmunediseases:Aconditioninwhichthebodyrecognizesitsowntissuesasforeignanddirectsanimmuneresponseagainstthem.自身免疫病：指因自身免疫应答反应而导致破坏自身正常组织结构并引起临床症状。（由：自身抗体/自身反应性T淋巴细胞）临床各科自身免疫性疾病举例(附表)累及系统自身免疫性疾病举例(example)血液系统自身免疫性溶血性贫血、特发性血小板(blood～)减少性紫癜、特发性白细胞减少症等神经肌肉多发性硬化症、重症肌无力、脱髓鞘疾(nerve/muscle)病等内分泌系统原发性肾上腺皮质萎缩、慢性甲状腺(endocrine～)炎、胰岛素依赖性糖尿病等消化系统非特异性溃疡性结肠炎、慢性活动性肝(digestive～)炎、恶性贫血与萎缩性胃炎等泌尿系统自身免疫性肾小球肾炎、肺—肾出血性(uropoietic～)综合症等结缔组织类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、皮(connectivetissue)肌炎、硬皮病等检测——自身抗体(Autoantibodies)免疫复合物(immunecomplex)其他相关因素（Ig、complementlymphocyte、cytokine,etc）Autoantibodies:Autoantibodyhavebeendefinedasanaberrationofanessentiallyphysiologicalandprotectiveprocess,representingimmunoglobulinsreactingagainstself-molecules.（由于机体自身免疫的发生，使得机体免疫系统产生了针对机体自身组织成分的抗体，称～。）自身抗体(Autoantibodies)：包括：抗核抗体(胞核内成分)(anti-nuclearantibody;ANA)抗细胞浆(cytoplasmic)成分抗体抗磷脂(anti-phospholipid)抗体类风湿因子(rheumatoidfactor,RF)抗核抗体（广义）：抗细胞核内所有抗原成分(核质\膜\仁\DNA等)的自身抗体。抗体名称检测所用抗原临床意义抗核抗体(均质型）HEp-2细胞抗原片高滴度主要见于SLE,低滴或大鼠肝细胞印片度可见于RA、慢性肝病、传单或药物诱发的狼疮者抗核抗体（斑点型）混合性结缔组织病、SLE硬皮病、SS等。抗核抗体（核膜型）高滴度几乎仅见于SLE抗核抗体（核仁型）高滴度对硬皮病特异dsDNA抗体马疫锥虫或短膜是SLE的特征性抗体RNP抗体ENA抗原硬皮病滴度高，其它自身免疫病低水平阳性，RA一般为阴性Sm抗体是SLE的标志性抗体（其它疾病很少阳性），但敏感性只有30％左右Scl-70抗体系统性硬化症的标记抗体SSA/Ro、SSB/La抗体干燥综合征J0-1抗体多发性皮肌炎和皮肌炎的标记抗体抗细胞浆成分抗体:抗线粒体抗体抗肌动蛋白抗体抗溶酶体抗体抗Jo-1抗体等方法:免疫组化意义:肝病的鉴别肌炎肺纤维化等抗组织细胞抗体:1、抗肾小球基底膜(anti-glomeularbasementmembran)抗体（肺出血肾炎综合征,Goodpasture～）2、抗甲状腺（anti-thyroid）抗体（甲状腺炎thyroiditis,甲亢Graves病）3、抗胰岛(insular)细胞抗体（胰岛素依赖性糖尿病,IDDM）(insulindependentdiabetesmellitus)类风湿因子（rheumatoidfactor）：是变性IgG刺激机体产生的一种自身抗体，主要存在于类风湿关节炎患者的血清和关节液内（分IgM/G～E型）。检测：乳胶凝集测IgM型；速率法不分型参考值：乳胶法≤1:10;速率法＜30U/L意义:类风湿病,自身免疫病的辅助～类风湿因子在病人和健康人中检出情况70%～90%的RA患者RF呈阳性。但RF并不是RA独有的特异性抗体。2健康人群20混合性结缔组织病10皮肌炎24系统性硬皮病50结节性多动脉炎95干燥综合征33～55SLE70～90RA阳性率（%）疾病循环免疫复合物（CIC）测定【原理】利用浊度增强剂或促凝剂-聚乙二醇（PEG）、葡聚糖等，在一定浓度时可选择性析出一定分子大小的抗原抗体复合物而形成浊度，其浊度的程度与抗原抗体复合物的量呈正比。由于浊度的形成可导致反射、散射以及吸收入射光线，使原入射光衰减。此时，通过测定透射光衰减（以A值表示）检测免疫复合物的量。循环免疫复合物检测流程(方法)1、测定管+血清对照管+血清（4.166%PEG2.0ml）（硼酸缓冲液2.0ml）2、混匀后4℃，60min3、室温预温30min，A450nm比浊。【参考范围】测定波长为450nm时，数值为0.015～0.05【临床意义】CIC的量增高，反映血清中存在免疫复合物量增多。已知CIC增多与许多疾病相关，包括：自身免疫性疾病、传染性疾病、肿瘤及某些超敏反应性疾病等………-------移植免疫的实验室检测移植(transplantation):是应用自体或异体的正常细胞、组织或器官置换病变的或功能缺损的细胞、组织和器官，以维持和重建机体生理功能的新型治疗方法。移植排斥反应的防与治是关键(组织配型、供体选择、免疫抑制剂用和术后的免疫学监测～)免疫排斥（immunerejection）：指器官、组织或细胞移植后，受