水稻幼苗的水培方法

水稻幼苗的水培方法一.水稻种子：93-11（籼稻，已测序）二.种子发芽：先用5%的次氯酸钠消毒1小时，在370C条件下浸泡24小时，随后将浸泡的种子平铺（密度稀）在玻璃培养皿上，黑暗下发芽48小时，特别注意发芽时玻璃培养皿中不要留水，只让种子一直保持湿润即可；播种前，选取出芽比较一致的下种。三.培养液：Hoglandsolution，配方如下。每两天换取一次培养液，特别注意培养液的PH值得调到5.5左右。Hoglandsolution的配方A:20ml/LB:20ml/LC:5ml/LD:4ml/LNH4H2PO41.15gCa(NO3)2•4H2O13.594gEDTA-Na1.847gH3BO31.44gMgSO4•7H2O2.42g200mlCaCl2•2H2O1.805g200mlFeSO4•7H2O1.665g300mlCuCl2•2H2O40mg1LKNO36.05gOrCaCl21.45gMnCl2•4H2O900mgZnCl2120mg(NH4)2Mo4•H2O19.615mg四.培养用具，建议使用已改良过的保鲜盒和配套网筐，优点：1）在网筐上植苗，可以很方便的收集水稻幼根；2）两天一换培养液，能防止水稻生长过程中次生代谢产物的负面影响；3）易于各种处理，如：H2O2，激素，金属离子等；4）易于多种重复和梯度处理；5）易于获取比较均一的水稻幼苗，扣除发育不同带来的差异。对保鲜盒所做的改良是，将盒高截低，让配套网筐与保鲜盒底相距1.5cm，既节省培养液，又能降低水稻苗与光照灯管间的距离。五.培养时间，对于93-11，按照上述方法培养12天，水稻幼苗能达到15cm的高，足以用来进行生理生化指标的鉴定，各种胁迫处理和蛋白质提取等试验。