蛋白质含量测定方法

　　蛋白质含量测定方法,810015:、,。、、、、、。,。:;;;;;,、[1]。,、(Biuret)。,,(Bradford)[4]。,Bradford,10～20,Biuret100。,,。3,4,4。,[3]。:(1);(2);(3);(4)。4、、,。,,。1　1.1　仪器材料(1):、、、、、。(2):、、、0.12molLpH=4.7-、-、H2SO4、40%、30%、2%、0.050molL、-、、、、G-250。1.2　实验方法(1),(),,。,CuSO4K2SO4,30%。,,,,。,27220076　　　　　　TheScienceandTechnologyofGelatinVol.27.No.2Jun.2007.。(2),、,,280nm,()。,238nm。,,。、、,,。,,(NH4)2SO4,,,。,,,,。、,。,。,,。,,pH,pH,pHpH。0.1～1.0mgmL,,。3,。(3)(NH3CONHCONH3)180℃,。,CuSO4,。,,。,,。　　,,;。,。1～10mgmL,30min,,。3·99·272:,。(4)(Biuret),1976Bradford(Bradford),。,。。Bradford:a.。,Lowry4,1mg。,-,Lowry。b.、,。,5min。,2min,1h,5～20min,,Lowry。c.。LowryK+、Na+、Mg2+、Tris、、、、EDTA。:a.,Bradford,γ-,。b.,:、TritonX-100、(SDS)0.1NNaOH。(0.1NLowry)。c.,Beer,。G-2505min,,。3,。2　2.1　实验结果1　3.092.130.81--2.883.162.160.913.112.180.862.2实验结果分析(1)3,,,,,。(2)、,,。,,,。(3)3,,,1～20mgmL。,1～20mgmL。(4)3,、,,0.1～1mgmL,1h,。3　4。·100·　　　　　　20076　　　　(Kjedahl),0.2～1.0mg,±2%。,8～10h。,。()。;;。(Biuret),1～20mg,20～30min。+Cu2+※。;Tris;,;。,50～100μg,5～10min。280nm。;。;。(Bradford),1～5μg,5～15min。,λmax465nm595nm。;Tri-tonX-100;SDS。;;;。　　　1　.[J].陕西农业大学学报2006:132～1342　、.生物物质常用化学分析法[M].:,1982:93～993　、、.生化实验方法和技术[M].:,1981:164～1694　BradfordM.Anal.Biochem.1976,72:248TheVariousMethodsforDetermingDifferentProteinsYangYufangQinghaiBrightApricotBio-engineeringCo.Ltd.,Xining,Qinghai,China,810015Abstract:Theproteinsareconnectedwiththelifeorigin,theexistenceandevolutionclosely,andthedeterminationofpro-teincouldservetotheproductionandthescientificresearch.Theconcentrationsofproteinofmilk,yogurt,andsoybeanmilkaredeterminedbythemethodsofKjeldahl,UVspectrophotometry,BiuretreactionandCoomassiebrilliantblue,andthevariousmethodsarecomparedandsummarizedfromtheresultsinthispaper.Keywords:Kjeldahl;UVspectrophotometry;Biuret;Coomassiebrilliantblue;Protein;Determination.·101·272: