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1.最基本的前提条件:用于培养的外植体细胞必须具有全能性2.离体隔离3.适宜的培养条件环境条件:光照,温度,湿度,气体,渗透压等营养条件:培养基+植物组织培养在最适宜的温度下生长分化才能表现良好,大多数植物组织培养都是在22~28℃,之间进行,低于15℃时培养,植物组织会表现生长停止,高于35℃时,会抑制细胞,组织的增殖和分化,对植物生长不利.例如,烟草愈伤组织在26℃时可在不加外源细胞分裂素的培养基上生长,而16℃时,需要加入外源细胞分裂素。+愈伤组织诱导,增殖与分化对温度的需求也有差异。+例:甜菜叶片的愈伤组织诱导率在31℃时比在25℃时高,而其形态建成则是在25℃时表达较好(形成较多的不定芽)+组织培养中光照也是重要的条件之一+主要表现在:+光强+光质+光照时间+光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响,从目前的研究情况看,光照强度对外植体,细胞的最初分裂有明显的影响.一般来说,光照强度较强,幼苗生长的粗壮,而光照强度较弱幼苗容易徒长.+光质对愈伤组织诱导,培养组织的增殖以及器官的分化都有明显的影响.+例:杨树愈伤组织的生长中,红光有促进作用蓝光有阻碍作用。+试管苗培养时要选用一定的光周期来进行组织培养,最常用的周期是16h的光照,8h的黑暗.研究表明,对短日照敏感的品种的器官组织,在短日照下易分化,而在长日照下产生愈伤组织,有时需要暗培养,尤其是一些植物的愈伤组织在暗下比在光下更好.如红花的愈伤组织.+湿度的影响包括培养容器保持和环境的湿度条件。+容器内的湿度主要受培养基水分含量和封口材料的影响。应主要保持在99%左右。+环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发,一般要求70%-80%的相对湿度。湿度过低会使培养基丧失大量水分,导致培养基各种成分浓度的改变和渗透压的升高,进而影响组织培养的正常进行.湿度过高时,易引起杂菌的生长,造成污染.+培养基中由于有添加的盐类,蔗糖等化合物,因此,而影响到渗透压的变化.通常1~2个大气压对植物生长有促进作用,2个大气压以上就对植物生长有阻碍作用,而5~6个大气压植物生长就会完全停止,6个大气压植物细胞就不能生存.+氧气在调节器官的发生中起重要因素。是组织培养中必需的因素,瓶盖封闭时要考虑通气问题,可用附有滤气膜的封口材料.通气最好的是棉塞封闭瓶口,但棉塞易使培养基干燥,夏季易引起污染.+培养基中生长素浓度过高可诱导乙烯合成。高浓度的乙烯抑制生长和分化,趋向于使培养的细胞无组织结构的生长,对正常形态的发生是不利因素。+培养物本身也产生二氧化碳,乙醇,乙醛等气体,过高会影响生长发育。
本文标题:植物组织培养环境条件
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