db3301 t 117-2007 稻米中有机硒和无机硒含量的测定 原子荧光光谱法

杭州市农业标准规范DB3301DB3301/T117—2007稻米中有机硒和无机硒含量的测定原子荧光光谱法2007-12-21发布2007-12-28实施杭州市质量技术监督局发布DB3301/T117—2007I前言本标准由农业部稻米及制品质量监督检验测试中心提出，由杭州市质量技术监督局归口。本标准起草单位：农业部稻米及制品质量监督检验测试中心、中国水稻研究所、浙江大地农作物产品质量安全检测中心。本标准主要起草人：曹赵云、许萍、闵捷、牟仁祥、陈铭学、吴俐、应兴华DB3301/T117—20072稻米中有机硒和无机硒含量的测定原子荧光光谱法1范围本标准规定了用原子荧光光谱法测定稻米中总硒和无机硒含量的方法，有机硒由总硒减去无机硒得到。本标准适用于稻米中有机硒和无机硒含量的测定。本标准检出限和定量测定范围：本方法有机硒和无机硒的最低检出浓度均为0.003mg／kg，定量测定范围为0.01mg/kg～4.00mg/kg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T5009.93食品中硒的测定（第一法氢化物原子荧光光谱法）3原理稻米中的硒可能以不同的化学形式存在，包括无机硒和有机硒。试样中无机硒经6mol/L盐酸水浴条件下提取，与有机硒分离，用原子荧光光谱法测定无机硒的含量。有机硒含量为总硒与无机硒的差值。4试剂除另有规定外，所有试剂为分析纯，水为去离子水。4.1盐酸（HCl）：优级纯。4.2盐酸溶液（6mol/L）：量取500mL盐酸，用水稀释并定容到1000mL。4.3氢氧化钠（5g/L）：称取5g氢氧化钠，用水溶解并定容到1000mL。4.4硼氢化钾溶液（15g/L）：称取1.5g硼氢化钾（KBH4），用氢氧化钠溶液（5g/L）溶解并定容至100mL。4.5铁氰化钾溶液（100g/L）：称取10.0g铁氰化钾[K3Fe(CN)6],用水溶解并定容至100mL。4.6硒标准储备液：取100mg/L硒标准储备液1.0mL，用水定容至100mL，此储备液浓度为1mg/L。4.7硒标准使用液：取硒储备液5.0mL，用水定容至100mL，此使用液浓度为50μg/L。5仪器所用玻璃仪器均需以硝酸（1＋4）浸泡过夜，用水反复冲洗，最后用去离子水冲冼干净。5.1原子荧光光度计。DB3301/T117—200735.2恒温水浴震荡器。5.3电炉。6分析步骤6.1试样制备样品经混匀后，缩分至约50g，经研磨至全部通过孔径0.25mm（60目）尼龙筛，混匀后贮于聚乙烯瓶中备用。6.2总硒的测定总硒的试样制备按6.1执行，测定按GB/T5009.93食品中硒的测定（第一法氢化物原子荧光光谱法）进行。6.3无机硒的测定6.3.1试样处理称取2.5g试样（精确到0.01g）于50mL具塞刻度试管中，加6mol/L盐酸溶液20mL，混匀后置于70℃恒温水浴，振荡浸提2h，冷却至室温，用6mol/L盐酸溶液定容至25mL，再经脱脂棉过滤。取滤液12.5mL于25mL具塞刻度试管中，并置于沸水浴中20min，冷却至室温，分别加入2.5mL铁氰化钾溶液、正辛醇3滴，加水定容，混匀待测。同时做试剂空白试验。6.3.2标准曲线取50mL具塞刻度试管6支，依次准确加入50μg/L硒使用标准液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL（各相当于硒浓度0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0μg/L），分别加入25mL6mol/L盐酸溶液，混匀，置于沸水浴中保持20min。待冷却至室温后，分别加入5.0mL铁氰化钾溶液，正辛醇3滴，用水定容至50mL，混匀备测。6.3.3测定6.3.3.1仪器条件仪器参考测定条件为光电倍增管（PMT）负高压：300V；灯电流：80mA；原子化温度：200℃；炉高：8㎜；载气流速：500mL/min；屏蔽气流速：1000mL/min；延迟时间：1s；读数时间：12s；加液时间：10s；进样体积：1mL。6.3.3.2无机硒含量测定在测定标准系列溶液后，分别吸取空白试验溶液和试样溶液进行测定。7结果计算7.1无机硒样品中无机硒含量以质量分数W1计，数值以毫克每千克（mg/kg）表示，按下列公式计算：()10001000100001××××−=mFccWDB3301/T117—20074式中：W1——试样中无机硒含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；c——试样提取液测定浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；c0——试样空白测定浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；F——F=25mL×25mL/12.5mL；计算结果保留二位有效数字。样品含量超1mg/kg时保留三位有效数字。7.2有机硒样品中无机硒含量以质量分数W2计，数值以毫克每千克（mg/kg）表示，按下列公式计算：12−=式中：W2——试样中有机硒含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；W——试样中总硒含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；W1——试样中无机硒含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；计算结果保留二位有效数字。样品含量超1mg/kg时保留三位有效数字。8精密度对于无机硒、有机硒含量在大于1.0mg/kg、0.1mg/kg～1.0mg/kg、0.01mg/kg～0.1mg/kg范围，在重复性条件获得的两次独立测试结果的绝对差值分别不得超过算术平均值的10%，20%和40%。