DB34T 1107-2009 豆制品中碱性橙的测定 高效液相色谱法

DB34安徽省地方标准DB34/T1107—2009豆制品中碱性橙的测定高效液相色谱法2009-12-29发布2009-12-29实施安徽省质量技术监督局发布食品伙伴网—2009前言碱性橙（BasicOrangeⅡ）是一种偶氮类碱性工业染料，俗名“王金黄”、“块黄”等，主要用于纺织品、皮革制品及木制品的染色，并未列入食品添加剂范围。由于碱性橙比其他水溶性染料如柠檬黄、日落黄等更易于在腐竹等豆制品上染色且不易褪色，因此一些不法商贩用碱性橙对豆制品进行染色，以次充好，以假冒真，欺骗消费者。本标准在参照相关参考文献的基础上,制定了豆制品中碱性橙的测定方法。本标准的附录A为资料性附录。本标准由国家农副加工食品质量监督检验中心、国家农业标准化与监测中心（安徽）提出。本标准起草单位：国家农副加工食品质量监督检验中心、国家农业标准化与监测中心（安徽）。本标准主要起草人：聂磊、姚彦如、刘琴芳、董思恩、王彩霞、张波。本标准首次发布。食品伙伴网—2009豆制品中碱性橙的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了豆制品中碱性橙的测定方法。本标准适用于所有类别豆制品中碱性橙的测定。最低检出量2ng，检出限0.02mg/kg。2原理样品用无水乙醇提取、过滤，进高效液相色谱仪，经C18柱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。3试剂方法中所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂，水为蒸馏水或同等纯度水，溶液为水溶液。3.1无水乙醇。3.2无水硫酸钠。3.3甲醇色谱纯。3.40.02mol/L乙酸铵溶液称取1.54g乙酸铵，加水至1000mL，溶解，经0.45μm滤膜过滤。3.5碱性橙标准溶液：准确称取碱性橙标样0.1g(精确到0.1mg)，用无水乙醇溶解并定容到100mL，此碱性橙标准溶液浓度为1.0mg/mL。4仪器4.1均质机。4.2高效液相色谱仪，附紫外检测器。5分析步骤5.1试样的处理样品用均质机均质，准确称取均质后样品10.00g，于250mL具塞三角瓶中，加入20g无水硫酸钠，搅拌均匀，加入50mL无水乙醇超声波提取15min，用50mL无水乙醇再超声波提取15min，合并2次提取液，浓缩至近干，用无水乙醇定容至2.0ml，经0.45μm滤膜过滤后，待测。5.2标准曲线取碱性橙标准溶液适量，用无水乙醇稀释成浓度分别为0.00，0.50，1.00，2.00，5.00、10.00，50.00μg/mL的溶液，分别进样10μL。5.3色谱参考条件色谱柱：C18柱（250mm×4.6mmi.d.，5μm）流动相：甲醇（3.3）：乙酸铵溶液（3.4）（60：40）流速：1.0mL/min检测波长：449nmDB34/T1107—2009柱温：25℃进样量：20μL根据保留时间定性，外标峰面积定量。5.4结果计算试样中碱性橙含量按下式进行计算：X=10001000×××VmA…………………………………………………………………………（1）式中：X——试样中碱性橙的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；A——测定用试样处理液中碱性橙的量，单位为毫克（μg/mL）；M——试样的质量，单位为克（g）；V——试样定容体积，单位为毫升（mL）。计算结果保留两位有效数字。6精密度在重复性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。DB34/T1107—2009附录A（资料性附录）豆制品中碱性橙色谱图图A.1豆制品中碱性橙色谱图