GB 25544-2010 食品添加剂 DL-苹果酸

GB25544－2010食品安全国家标准食品添加剂DL-苹果酸2010-12-21发布2011-02-21实施中华人民共和国国家标准中华人民共和国卫生部发布GB25544－2010I前言本标准的附录A、附录B和附录C为规范性附录。GB25544－20101食品安全国家标准食品添加剂DL-苹果酸1范围本标准适用于以顺丁烯二酸酐、顺/反丁烯二酸为原料经水合反应、浓缩结晶、脱水、干燥而制得的食品添加剂DL-苹果酸。2规范性引用文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。3化学名称、分子式、结构式和相对分子质量3.1化学名称DL-羟基丁二酸3.2分子式C4H6O53.3结构式HO—CH—COOHCH2—COOH3.4相对分子质量134.09(按2007年国际相对原子质量)4技术要求4.1感官要求：应符合表1的规定。表1感官要求4.2理化指标：应符合表2的规定。项目指标检验方法色泽白色或类白色取适量实验室样品，置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下，目视观察，嗅其气味。气味有特殊的酸味组织状态结晶粉末或颗粒GB25544－20102表2理化指标项目指标检验方法DL-苹果酸（以C4H6O5计），w/%99.0～100.5附录A中A.4比旋光度αm(25℃,D)/〔(º)·dm2·kg-1〕-0.10～+0.10附录A中A.5砷（As）/(mg/kg)≤2附录A中A.6铅（Pb）/(mg/kg)≤2附录A中A.7灼烧残渣，w/%≤0.1附录A中A.8富马酸，w/%≤1.0附录A中A.9马来酸，w/%≤0.05附录A中A.9水不溶物，w/%≤0.1附录A中A.10GB25544－20103附录A（规范性附录）检验方法A.1警示试验方法规定的一些试验过程可能导致危险情况。操作者应采取适当的安全和防护措施。A.2一般规定除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682－2008中规定的三级水。试验方法中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T602和GB/T603之规定制备。A.3鉴别试验A.3.1苹果酸氨盐呈色试验A.3.1.1试剂和材料A.3.1.1.1氨水溶液：2+3。A.3.1.1.2对氨基苯磺酸：10g/L。A.3.1.1.3亚硝酸钠溶液：200g/L。A.3.1.1.4氢氧化钠溶液：40g/L。A.3.1.2分析步骤称取0.5g实验室样品，精确至0.01g，置于50mL试管中，加入10mL水溶解。用氨水溶液中和至中性,加入1mL对氨基苯磺酸溶液,在沸水浴中加热5min。加入5mL亚硝酸钠溶液，再置于水浴加热3min后，加入5mL氢氧化钠溶液，试验溶液应立即呈红色。A.3.2红外谱图对照称取约1mg实验室样品及100mg溴化钾，研成均匀粉末，放入成形器中，压成薄片后用红外光谱仪测定其吸收光谱，其谱图与附录B图B.1给出的DL-苹果酸红外标准谱图一致。A.4DL-苹果酸含量的测定A.4.1方法提要以酚酞为指示剂，用氢氧化钠标准溶液滴定样品水溶液，根据氢氧化钠标准滴定溶液的用量,计算以C4H6O5计的总酸含量为DL-苹果酸含量。A.4.2试剂和材料A.4.2.1氢氧化钠标淮滴定溶液：c(NaOH)＝1.0mol/L。A.4.2.2酚酞指示液：10g/L。GB25544－20104A.4.3分析步骤A.4.3.1称取2.0g实验室样品，精确至0.0002g，加40mL无二氧化碳的水溶解，加2滴酚酞指示液，用氢氧化钠标准溶液滴定至微红色，保持30s不褪色为终点。A.4.3.2在测定的同时，按与测定相同的步骤，对不加试料而使用相同数量的试剂溶液做空白试验。A.4.4结果计算DL-苹果酸（以C4H6O5计）的质量分数w1，数值以%表示，按式(A.1)计算：()%100]1000/[01×−=mcMVVw…………………………（A.1）式中：V——试料消耗氢氧化钠标准滴定溶液(A.4.2.1)体积的数值,单位为毫升(mL)；V0——空白试验消耗氢氧化钠标准滴定溶液(A.4.2.1)体积的数值,单位为毫升(mL)；c——氢氧化钠标准滴定溶液浓度的准确数值,单位为摩尔每升(mol/L)；m——试料质量的数值,单位为克(g)；M——苹果酸（1/2C4H6O5）的摩尔质量的数值,单位为克每摩尔(g/mol)(M=67.04)。取两次平行测定结果的算术平均值为报告结果。两次平行测定结果的绝对差值不大于0.2%。A.5比旋光度的测定A.5.1称取4.25g实验室样品，精确至0.001g，加入20mL水溶解，移至50mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。测定温度为（25±0.5）℃。比旋光度αm(25,D)℃数值以“(º)·dm2·kg-1”表示，按式(A.2)计算：αm（25℃，D）lααρ=…………………………（A.2）式中：α——测得的旋光角,单位为度(°)；l——旋光管的长度,单位为分米(dm)；ρα——溶液中有效组分的质量浓度,单位为克每毫升(g/mL)。A.5.2其他按GB/T613进行。A.6砷的测定A.6.1称取1.0g实验室样品，精确至0.01g，放入测砷装置锥形瓶中，加入5mL水溶解，加入1滴溴酚蓝指示液（0.4g/L），滴加氨水溶液（1+4）中和至溶液呈紫色，补水至约35mL，再加入20mL硫酸溶液（1+5），摇匀，作为试样溶液。使用吸收液B。进行限量试验，量取（2±0.02）mL砷（As）标准溶液（相当于2.0μgAs）制备限量标准溶液。A.6.2其他按GB/T5009.76二乙氨基二硫代甲酸银比色法进行。GB25544－20105A.7铅的测定A.7.1比色法（仲裁法）按GB/T5009.75进行。试样处理按干法消解法进行。临用前，将1mg/mL的铅（Pb）标准溶液稀释成5μg/mL的铅（Pb）标准溶液。测定时量取（25±0.02）mL试样溶液（相当于2.5g实验室样品）和（1±0.02）mL铅（Pb）标准溶液（相当于5μgPb），分别置于125mL分液漏斗中，铅标准溶液中加1%硝酸溶液至25mL。A.7.2原子吸收光谱法试样处理按GB/T5009.75干法消解法进行。其他按GB5009.12进行。A.8灼烧残渣的测定称取约2g实验室样品，精确至0.0001g。灼烧温度为(800±25)℃。其他按GB/T9741进行。取两次平行测定结果的算术平均值为报告结果。两次平行测定结果的绝对差值不大于0.01%。A.9富马酸和马来酸的测定A.9.1方法提要用高效液相色谱法，在选定的工作条件下，通过色谱柱使样品溶液中各组分分离，用紫外吸收检测器检测，用外标法定量，计算样品中富马酸及马来酸的含量。A.9.2试剂和材料A.9.2.1富马酸：质量分数≥99.0%。A.9.2.2马来酸：质量分数≥99.0%。A.9.2.3氢氧化钠溶液：20g/L。A.9.2.4磷酸溶液：量取磷酸（优级纯）(1±0.02)mL于1000mL容量瓶中，加入100mL甲醇（HPLC级，可根据柱效调整加入量），加水稀释至刻度，再经0.45μm滤膜过滤。A.9.3仪器和设备A.9.3.1高效液相色谱系统(HPLC)A.9.3.1.1高压泵：无脉冲，能将流速保持在0.1mL/min～10.0mL/min。A.9.3.1.2定量环：5μL。A.9.3.1.3紫外光检测器：可变波长。A.9.3.1.4数据处理系统：色谱工作站或数据处理机。A.9.3.2抽滤系统抽滤系统使用孔径为0.45μm的纤维素酯膜滤纸（用于流动相的预处理）。A.9.3.3过滤系统过滤系统使用孔径为0.45μm的纤维素酯膜滤纸（用于样品的预处理）。A.9.3.4进样器自动进样器或微量进样器，50μL或100μL。A.9.4色谱分析条件推荐的色谱柱及典型色谱操作条件见表A.1，富马酸和马来酸测定典型高效液相色谱图见附录C图C.1，各组分的相对保留时间见附录C表C.1。其他能达到同等分离程度的色谱柱和色谱操作条件GB25544－20106均可使用。表A.1色谱柱和典型色谱操作条件色谱柱柱长250mm，柱内径4.6mm，以硅胶为基质,表面键合C8官能团的非极性填料色谱柱柱温15℃～60℃，控制精度±1℃流动相磷酸溶液流动速度/(mL/min)1.0检测器检测波长/nm214进样量/μL5A.9.5分析步骤A.9.5.1标准样品溶液的制备A.9.5.1.1富马酸标准样品溶液的制备称取50mg富马酸，精确至0.0002g,溶于适量水（必要时加入少量氢氧化钠溶液），转移至50mL容量瓶，用磷酸溶液稀释至刻度。移取上述溶液（1±0.02)mL,置于50mL容量瓶，用磷酸溶液稀释至刻度，摇匀，经0.45μm滤膜过滤，再经超声波脱气处理。A.9.5.1.2马来酸标准样品溶液的制备称取50mg马来酸，精确至0.0002g,溶于适量水（必要时加入少量氢氧化钠溶液），转移至250mL容量瓶，用磷酸溶液稀释至刻度。移取上述溶液（1±0.02)mL,置于100mL容量瓶，用磷酸溶液稀释至刻度，摇匀，经0.45μm滤膜过滤，再经超声波脱气处理。A.9.5.2样品溶液的制备称取0.2g实验室样品，精确至0.0002g,置于50mL容量瓶，以流动相稀释至刻度，摇匀，经0.45μm滤膜过滤，再经超声波脱气处理。A.9.5.3测定按高效液相色谱操作规程开机预热,调节温度及流量,达到分析条件并基线平稳后,将标准样品溶液进样。用微量进样器取标准样品溶液5μL，进样（或自动进样）,记录所得的富马酸或马来酸的峰面积A2。用微量进样器取样品溶液5μL，进样（或自动进样）,记录所得的待测物质的峰面积A1。A.9.6结果计算富马酸或马来酸的质量分数w2，数值以%表示，按式(A.3)计算：%1002212×××=mAmAw…………………………（A.3）式中：A1——样品液中待测物质的峰面积；A2——标准样品溶液中富马酸或马来酸的峰面积；m2——标准样品溶液中富马酸或马来酸的进样量，单位为微克(μg)；GB25544－20107m——样品的进样量,单位为微克(μg)。A.10水不溶物的测定A.10.1分析步骤称取25.0g实验室样品，精确到0.1g，溶于100mL水中，以干燥至质量恒定的坩埚式耐酸滤过漏斗过滤后，以热水洗涤漏斗，置于100℃烘箱中干燥至恒重，冷却称量。A.10.2结果计算水不溶物的质量分数w3，数值以%表示，按式(A.4)计算：……………………（A.4）式中：m1——滤渣质量的数值，单位为克(g)；m——试料质量的数值，单位为克(g)。%10013×=mmwGB25544－20108附录B（规范性附录）DL-苹果酸红外标准谱图图B.1给出了DL-苹果酸红外标准谱图。图B.1DL-苹果酸红外标准谱图GB25544－20109附录C（规范性附录）富马酸和马来酸测定典型高效液相色谱图和各组分的相对保留时间C.1图C.1给出了富马酸和马来酸测定典型高效液相色谱图。1——DL-苹果酸2——马来酸3——富马酸图C.1富马酸和马来酸测定典型高效液相色谱图C.2表C.1给出了各组分的相对保留时间。表C.1各组分的相对保留时间峰序组分名称相对保留时间1DL-苹果酸12马来酸1.343富马酸1.74