染色质免疫沉淀分析——植物ChIP解决方案

染色质免疫沉淀分析——植物ChIP解决方案染色质免疫沉淀分析(ChIP)是目前确定与特定蛋白结合的基因组区域或确定与特定基因组区域结合的蛋白质的比较好的一种方法。so，我们今天来聊聊染色质免疫沉淀分析方法。染色质免疫沉淀法（Chromatinimmunoprecipitation，ChIP）是研究体内DNA与蛋白质相互作用的重要工具。它可以灵敏地检测目标蛋白与特异DNA片段的结合情况，还可以用来研究组蛋白与基因表达的关系。CHIP技术通过三大步骤实现：第一，甲醛固定后染色质分离和断片；第二，运用特异蛋白质抗体（CHIP级别），免疫共沉淀结合蛋白的染色质片段；第三，分析目标DNA。这里我们就要说到CHIP技术工具之——植物染色质免疫沉淀试剂盒了。它的原理是什么呢？不妨以P-2014植物染色质免疫沉淀试剂盒来举个栗子~~P-2014植物染色质免疫沉淀试剂盒旨在通过甲醛交联、物理或化学处理细胞核以及染色质，从而运用特异抗体结合蛋白进行免疫沉淀，然后萃取DNA，扩增分析，用以确定结合蛋白的目标DNA。接下来再说说它的特征，P-2014植物染色质免疫沉淀试剂盒涵盖全套试剂，允许试验者有效地在体内研究蛋白-DNA相互关系。整个过程可以在6小时内完成（哇哦，厉害了~）当然了，还有相当重要的一点：P-2014植物染色质免疫沉淀试剂盒适用于将特异性免疫沉淀与定性和定量PCR、MS-PCR、ChIP-Seq、ChIP-on-chip结合使用。欧迈噶！P-2014植物染色质免疫沉淀试剂盒包括一个ChIP级二甲基组蛋白H3-K9抗体--阳性对照，以及一个正常小鼠IgG——阴性对照。从染色质从样本中释放出来后，经剪切、断片，添加到包被了抗体的微孔中，蛋白质-DNA复合物经特异性抗体捕获，解交联后DNA被释放，通过离心柱，纯化并洗脱目的DNA。洗脱下来的DNA可用于各种下游应用。接着看看样本，起始材料可包括各种植物组织（花、叶、幼苗）。在一般情况下，每个反应的样本量应该是20~50毫克的植物组织。最后总结一下，植物染色质免疫沉淀分析，首先一定要选对方法，然后就是工具，比如说刚刚分析的植物染色质免疫沉淀试剂盒，它需要满足哪些条件？1.快速简单：实验能在6小时内完成；2.实验灵活：可手动或高通量；3.包括DNA纯化柱：省时省力；4.与所有的DNA扩增方法兼容；5.能达到简单、可靠和一致的检测条件好，今天就先简单的介绍到这里，有想法的小伙伴可一起参与讨论，期待下期更精彩哦~