姬姆萨染色液(9-1)

姬姆萨染色液(GiemsaStain,1:9)简介：姬姆萨色素(又称吉姆萨色素)是由天青Ⅱ与伊红混合而成。Giemsa染色原理和结果与瑞氏染色基本相同，姬姆萨染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒，着色清晰，但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳，故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。LeageneGiemsaStain以进口的姬姆萨色素、甲醇为主要原料，含Leagene特有衬染剂，经研磨配制而成，能呈现出清晰的细胞染色效果，经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。LeageneGiemsaStain)由10×储存液和磷酸盐缓冲液组成’混合成工作液后使用；亦可以分开使用，即先用GiemsaStain染色，再经磷酸盐缓冲液处理，亦可以得到满意的染色效果。产品组成：自备材料：1、载玻片、显微镜2、蒸馏水3、甲醇4、0.1～0.5%乙酸操作步骤(仅供参考)：(一)一步法涂片染色1、Giemsa工作液的配制：按试剂(A):试剂(B混合，即取GiemsaStain储存液(10×)加入的磷酸盐缓冲液中充分混匀，即为Giemsa工作液，为即用型试剂，不易保存，即用即配。2、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定。编号名称DM0002100mlDM0002500mlStorage试剂(A):GiemsaStain储存液(10×)10ml50mlRT避光试剂(B):磷酸盐缓冲液100ml500mlRT使用说明书1份3、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上，滴加Giemsa工作液覆盖涂片，室温滴染用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。4、干燥、镜检。染色结果：嗜酸性颗粒粉红色嗜碱性颗粒紫蓝色中性颗粒淡紫色(二)两步法涂片染色1、Giemsa工作液的配制：按试剂(A):蒸馏水=1:4混合，即取1份的GiemsaStain储存液(10×)加入到4份的蒸馏水中充分混匀，即为Giemsa工作液。Giemsa工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。2、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定。3、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上，滴加适量Giemsa工作液覆盖涂片，室温滴染。4、加入等量磷酸盐缓冲液，轻轻晃动载玻片，室温静置。5、用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。6、干燥、镜检。染色结果：嗜酸性颗粒粉红色嗜碱性颗粒紫蓝色中性颗粒淡紫色(三)组织切片染色1、Giemsa工作液的配制：按试剂(A):试剂(B)=1:9混合，即取1份GiemsaStain储存液(10×)加入到9份磷酸盐缓冲液中充分混匀，即为Giemsa工作液。Giemsa工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。2、新鲜组织立即置于Regaud固定液固定，期间应更换固定液。3、重铬酸钾固定1天。4、流水冲洗过夜。5、照常规脱水、包埋。6、切片厚度约为，常规脱蜡至水。7、蒸馏水清洗。8、入含Giemsa工作液染缸，浸染。9、蒸馏水稍微清洗。10、乙酸洗。11、自来水稍微冲洗。12、用无水乙醇迅速脱水。13、二甲苯透明，中性树脂封固。染色结果：细胞核蓝色至紫色细胞质淡蓝色嗜铬细胞胞质黄绿色结缔组织淡红色注意事项：1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，以免影响染色效果。2、涂片染色中Giemsa染色后，请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。3、如果染色过深或过浅，应调整染色时间或工作液浓度。4、涂片染色和组织切片染色中，pH值对染色有一定影响，载玻片应清洁、无酸碱污染，以免影响染色效果。5、染色液经稀释后液面应金属光泽则表示染液有染色作用，否则染色液可能失效。6、组织切片染色中，染色后需用大量0.1～0.5%乙酸急速冲洗，避免浮面沉淀物污染切片后难以洗脱。7、0.5%乙酸分化常用于Giemsa组织切片染色，如有必要亦可用于细胞涂片，但其浓度应适量下调。0.5%乙酸分化切片时，切片呈粉红色即可终止。8、Giemsa组织切片染色中，无水乙醇脱水要迅速，否则切片易褪色。9、涂片染色和组织切片染色中，如需急速获得结果，可按GiemsaStain储存液(10×):磷酸盐缓冲液=1:1配制Giemsa工作液，充分混匀，即为快速Giemsa染色工作液，将染色液滴加于细胞涂片或组织切片上，加热染色，20～30s后重新加染色液，反复5～10次，其余步骤同上。10、染色液可重复使用，但不能多次重复，若有沉淀物应过滤后使用。11、Regaud固定液:按3%重铬酸钾:甲醛=4:1配制，临用前混匀，1～2天后失效。有效期：24个月有效。