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脑脊液总蛋白检测试剂盒(比浊微板法)简介:脑脊液(Cerebro-SpinalFluid,CSF)是存在于脑室、蛛网膜下腔和脊髓中央管内的无色透明液体,由脑室中的脉络丛产生,与血浆和淋巴液的性质相似。正常成年人的脑脊液约100~150ml,弱碱性,不含红细胞。正常脑脊液具有一定的化学成分和压力,对维持颅压的相对稳定有重要作用,当中枢神经系统受损时,脑脊液的检测成为重要的辅助诊断手段。总蛋白(TotalProtein,TP)由白蛋白和球蛋白组成。对于生物体液(血清、尿液、脑脊液)中总蛋白质含量的测定,一般要基于如下两个假设:1、所有蛋白质分子由纯多肽组成,含氮量的质量百分比为16%;2、体液中含有数百个蛋白质分子,每个分子对测定反应都具有非常相似的特性。目前常用的方法有:双缩脲法、紫外分光光度法、染料结合法、凯氏定氮法、沉淀法等。Leagene脑脊液总蛋白检测试剂盒(比浊微板法)其检测原理是脑脊液中蛋白质与磺基水杨酸等作用,形成沉淀,用比浊法测定其浊度,与相同处理的标准液比较,求出样本中蛋白质的含量。本试剂盒专门用于人或动物脑脊液样本中的总蛋白含量测定,但易受表面活性剂影响。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。组成:自备材料:1、离心管、小试管2、96孔板3、酶标仪操作步骤(仅供参考):1、取蛋白标准配制液或稀释液加入到蛋白标准中,充分溶解后配制成l的蛋白标准溶液,配制后可立即使用,溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。取适量的蛋白标准溶液用蛋白标准配制液或稀释液继续进行稀释。特别提示:待测蛋白溶解于什么样的稀释液中,蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。例如待测蛋白溶解于蔗糖中,亦取蛋白标准溶解于蔗糖中。一般也可以用NaCl或PBS作为稀释液。2、TP加样操作,按下表依次加入试剂:编号名称TC0595100TStorage试剂(A):蛋白标准20mgRT试剂(B):蛋白标准配制液5mlRT试剂(C):比浊显色液20ml4℃避光使用说明书1份3、混匀,室温孵育。4、酶标仪测定波长处的吸光度。以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。一般1h内测完。计算:脑脊液总蛋白(mg/L)=(待测孔吸光度/标准孔吸光度)×500注意事项:1、蛋白标准粉末溶解于蛋白标准配制液后,即获得蛋白标准原液,该原液中含有防腐剂,不影响后续检测,该蛋白标准原液-20℃长期保存。2、如果酶标仪没,也可以使用分光光度计测定。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。3、加入显色液10min内浊度进行性增加,如遇絮状物产生,应颠倒混匀后再测量。4、如果脑脊液中所含蛋白浓度过高,应稀释后再进行检测,否则影响结果。有效期:12个月有效。蛋白标准配制成溶液后应-20℃冻存。相关:加入物(μl)空白孔标准孔待测孔蛋白标准配制液25蛋白标准溶液(0.5mg/ml)25待检样品(脑脊液)25比浊显色液200200200编号名称CA0005氨苄青霉素溶液(Ampicillin,50mg/ml)DH0006苏木素伊红(HE)染色液NR0003Lezol(总RNA提取试剂)PE0018SDS-PAGE凝胶配制试剂盒TC0713葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)
本文标题:脑脊液总蛋白检测试剂盒(比浊微板法)
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