动物细胞培养和核移植技术一教学课件

§2.2.1动物细胞培养和核移植技术第1课时一、动物细胞培养动物细胞培养：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。动物细胞培养的过程是怎样的？培养时又需要提供哪些必要的条件呢？动物细胞培养的过程①进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境pH为7.2～8.4。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，而胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消化。②胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。③培养贴附性细胞时需注意什么？细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖，这就要求培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒，易于贴附。④什么是原代培养？⑤什么是传代培养？动物组织消化后的初次培养。原代培养一段时间后，贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程通常称为传代培养。传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去了。动物细胞培养的过程用胰蛋白酶处理分散成单个细胞剪碎组织制成细胞悬液转入培养液中进行原代培养贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬液转入培养液中进行传代培养放入二氧化碳培养箱中培养取动物组织块多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的内环境的知识，思考并讨论以下问题：2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？充足的营养供给、适宜的温度、适宜的pH和气体环境。无菌、无毒的环境。1.体外培养细胞时需要提供哪些物质？无菌、无毒的环境2.营养①对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还会在培养液中加抗生素。②定期更换培养液糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。使用合成培养时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分。为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？必需氨基酸、胰岛素、生长激素、多种生长因子±0.5℃7.2~7.44.气体环境O2CO2（95%空气加5%O2的混合气体）基因工程基因工程技术中常用的受体细胞。培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面研究，如用于筛选抗癌药物。①动物细胞培养的过程②动物细胞培养的条件③动物细胞培养技术的应用总结