TCAAA 018-2019 驼血多肽

ICS67.120.99X22团体标准T/CAAA018—2019驼血多肽Camebloodpolypeptide2019-01-07发布2019-01-07实施中国畜牧业协会发布T/CAAA018—2019前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由中国畜牧业协会提出并制定。本标准负责起草单位：内蒙古东汇生物科技有限公司、中国科学院兰州化学物理研究所、内蒙古骆驼研究院。本标准主要起草人：邸多隆、裴栋、董学舟、那木尔、斯仁达来、郭富城、吉日木图。T/CAAA018—2019驼血多肽1范围本标准规定了驼血多肽的技术要求和检验方法。本标准适用于驼血多肽的生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB2760食品添加剂使用标准GB4789.1食品微生物学检验总则GB4789.2食品微生物学检验菌落总数测定GB4789.3食品微生物学检验大肠菌群计数GB5009.3食品中水分的测定GB5009.4食品中灰分的测定GB5009.5食品中蛋白质的测定GB/T22492大豆肽粉GB5009.11食品中总砷及无机砷的测定GB5009.12食品中铅的测定GB5009.123食品中铬的测定GB5009.15食品中镉的测定GB5009.17食品中总汞及有机汞的测定3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1驼血多肽camebloodpolypeptide以检验检疫合格的骆驼血为原料，经酶解、离心、浓缩、干燥、包装等工序制成的多肽产品。3.2肽含量thecontentofCameblood肽占试样的质量分数。4技术要求4.1原料要求骆驼血来自非疫区，经宰前宰后检疫合格的健康骆驼，屠宰后经卫生采集无污染的新鲜骆驼血。1T/CAAA018—20194.2感官要求应符合表1的要求。表1感官要求项目要求检验方法色泽淡黄色或乳白色，色泽均匀一致。滋味和气味具有本品特有的气味和滋味，无焦糊味和其它异味。组织形态粉末状，无结块现象。杂质无肉眼可见的外来杂质。取适量试样置于白色瓷盘中，在自然光下观察色泽和状态。闻其气味，用温开水漱口，品其滋味4.3理化指标应符合表2的要求。表2理化指标项目指标检验方法蛋白质(以干基计,N×5.79)/(g/100g)≥80.0GB5009.5肽含量（以干基计）/(g/100g)≥80.0GB/T22492相对分子量小于3000Da的多肽所占比例/%≥80.0附录A水分(g/100g)≥5.0GB5009.3灰分(以干基计）/(g/100g)≤8.0GB5009.44.4污染物限量污染物限量应符合表3的要求。表3污染物限量项目指标检验方法铅（以Pd计）/（mg/kg）≤1.0GB5009.12镉（以Cd计）/（mg/kg）≤0.1GB5009.15总砷（以As计）/（mg/kg）≤1.0GB5009.11铬（以Cr计）/（mg/kg）≤2.0GB5009.123总汞（以Hg计）/（mg/kg）≤0.1GB/T5009.174.5微生物指标应符合表4的要求。表4微生物限量采样方案a及限量项目ncmM检验方法菌落总数/(CFU/g)52104105GB4789.2大肠菌群/(CFU/g)5210102GB4789.3注：a样品的采样及处理按GB4789.1的规定执行。2T/CAAA018—20194.6食品添加剂食品添加剂的使用应符合GB2760的要求及相关公告的规定。5检测方法驼血多肽所占比例的检测方法见规范性附录A。3T/CAAA018—2019附录A（规范性附录）相对分子质量小于3000Da的驼血多肽所占比例的检测方法(高效体积排阻色谱法)A.1方法提要采用高效体积排阻色谱法测定。即以多孔性填料为固定相，依据样品组分分子体积大小的差别进行分离，在肽键的紫外吸收波长220nm条件下检测，使用相对分子质量分布测定的专用数据处理软件（即GPC软件），对标准品和样品的色谱图及其数据进行处理，根据相对分子质量校正曲线方程，计算得到驼血多肽的相对分子质量大小及分布范围。A.2试剂A.2.1乙腈：色谱纯A.2.2三氟乙酸：分析纯A.2.3水：GB/T6682规定的一级水A.2.4相对分子质量校正曲线所用标准品：A.2.4.1细胞色素C（cytochromeC,MW12384）A.2.4.2抑肽酶（aprotinin,MW6512）A.2.4.3杆菌酶（bacitracin,MW1423）A.2.4.4乙氨酸－乙氨酸－酪氨酸－精氨酸（MW451）A.2.4.5乙氨酸－乙氨酸－乙氨酸（MW189）A.3仪器和设备A.3.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器和含有GPC数据处理软件的色谱工作站A.3.2流动相真空抽滤脱气装置A.3.3超声波振荡器A.3.4分析天平：感量0.0001gA.4色谱条件与系统适应性实验A.4.1色谱柱：TSKgelG2000SWXL300mm×7.8mm(GELLOT502R)或性能与此相近的同类型其他适用于测定肽的分子量分布的凝胶柱A.4.2流动相：乙腈：水：三氟乙酸，体积比为40:60:0.05A.4.3检测波长：220nmA.4.4流速：0.5mL/minA.4.5柱温：30℃A.4.6进样体积：10μLA.4.7为使色谱系统符合检测要求，规定在上述色谱条件下，凝胶色谱柱的柱效即理论塔板数（N）4T/CAAA018—2019按三肽标准品（乙氨酸－乙氨酸－乙氨酸）峰计算不低于5000，蛋白肽的分配系数（Kd）应在0～1之间A.5相对分子质量校正曲线制作分别用流动相配制成浓度为1.0g/L左右的上述不同相对分子质量的肽标准品溶液，用孔径为0.2μm～0.5μm聚四氟乙烯或尼龙过滤膜过滤后分别进样，得到系列标准品的色谱图。以相对分子质量的对数（lgMW）对保留时间作图或作线性回归得到相对分子质量校正曲线及其方程。A.6样品制备用称量纸称取样品125.0mg左右，转移至25mL容量瓶中，用流动相定容至刻度，超声振荡10min，使样品充分溶解混匀，用孔径为0.2μm～0.5μm聚四氟乙烯或尼龙过滤膜过滤，其滤液用于测定。A.7相对分子质量的计算将A.6制备的样品溶液在A.4色谱条件下进样分析，然后使用GPC数据处理软件，根据相对分子质量校正曲线方程对样品的色谱图及其数据进行计算处理，即可得到样品中驼血多肽的相对分子质量大小及分布范围。用峰面积归一化法计算相对分子质量在3000以下的驼血多肽相对百分比之和。__________________________5