TCCCMHPIE 1.38-2018 植物提取物 瑞鲍迪苷D

T中国医药保健品进出口商会团体标准T/CCCMHPIE1.38—2018ICS11.120C25植物提取物瑞鲍迪苷DPlantextract——RebaudiosideD中国医药保健品进出口商会发布2018-07-01发布2018-07-15实施T/CCCMHPIE1.38—2018I前言本标准按照GB/T1.1－2009和GB/T20004.1－2016给出的规则起草。本标准由中国医药保健品进出口商会提出。本标准由中华人民共和国商务部归口。本标准起草单位：北京绿色金可生物技术股份有限公司、山东海根生物技术有限公司。本标准主要起草人：姚军芳、侯翔燕、李文、吕显刚、张培楠、李艳梅、邢振武、孔正。T/CCCMHPIE1.38—20181瑞鲍迪苷D1范围本标准规定了瑞鲍迪苷D的技术要求、检验方法、检验规则、包装、标签、运输和贮存和保质期要求。本标准适用于菊科甜叶菊属植物甜叶菊（SteviarebaudianaBertoni）的叶，经水提取柱精制后，结晶、干燥得到的瑞鲍迪苷D。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB6985食品容器、包装材料用添加剂使用卫生标准《中华人民共和国药典（2015年版）》第四部0831干燥失重测定法《中华人民共和国药典（2015年版）》第四部2302灰分测定法《中华人民共和国药典（2015年版）》第四部2321铅、镉、砷、汞、铜测定法《中华人民共和国药典（2015年版）》第四部1105非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法《中华人民共和国药典（2015年版）》第四部1106非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法3有效成分名称、结构式、分子式和相对分子质量有效成分名称：瑞鲍迪苷D（RebaudiosideD）分子式：C50H80O28相对分子质量：1129.15结构式：T/CCCMHPIE1.38—201824技术要求4.1工艺要求4.1.1植物原料菊科、甜叶菊属植物甜叶菊SteviarebaudianaBertoni的叶子，春、夏、秋季均可采收，除去茎枝，摘取叶片，鲜用或晒干。4.1.2工艺过程甜菊叶→水提取→柱精制→洗脱→浓缩→干燥→溶解→结晶→干燥→产品4.2产品要求4.2.1感官要求应符合表1的规定。表1感官要求4.2.2理化要求应符合表2的规定。表2理化要求项目要求色泽白色滋味与气味气微、味浓甜外观粉末，无肉眼可见杂质项目指标鉴别供试品成分与瑞鲍迪苷D标准品色谱峰保留时间一致瑞鲍迪苷D（以干质计）/%≥95.0干燥失重/%≤5.0灰分/%≤1.0砷（As）/(mg/kg)≤1.0铅（Pb）/(mg/kg)≤1.0镉（Cd）/(mg/kg)≤1.0T/CCCMHPIE1.38—201834.2.3微生物要求应符合表3的规定。表3微生物要求4.2.4其他污染物其他污染物限量要求，依据不同要求，应符合我国相关法规的规定。对于出口产品，应符合出口国相关法规的规定。5．检验方法5.1感官检验启开试样后，立即嗅其气味；另取试样适量置于白色瓷盘中，在自然光线下，观察其色泽、外观，并检查有无异物。5.2理化指标5.2.1鉴别按第A.2章中规定的方法进行测定，供试品图谱应与瑞鲍迪苷D标准品色谱峰保留时间一致。5.2.2瑞鲍迪苷D按第A.2章中规定的方法进行测定。5.2.3干燥失重测定汞（Hg）/(mg/kg)≤0.1乙醇残留/%≤0.5甲醇残留/%≤0.02项目指标需氧菌总数/(CFU/g)≤1000霉菌及酵母菌数/(CFU/g)≤100大肠埃希菌不得检出沙门氏菌不得检出T/CCCMHPIE1.38—20184按《中华人民共和国药典（2015年版）》第四部0831干燥失重测定法进行测定。5.2.4灰分测定按《中华人民共和国药典（2015年版）》第四部2302灰分测定法中总灰分测定法进行测定。5.2.5砷按《中华人民共和国药典（2015年版）》第四部2321铅、镉、砷、汞、铜测定法中原子吸收分光光度法进行测定。5.2.6铅按《中华人民共和国药典（2015年版）》第四部2321铅、镉、砷、汞、铜测定法中原子吸收分光光度法进行测定。5.2.7镉按《中华人民共和国药典（2015年版）》第四部2321铅、镉、砷、汞、铜测定法中原子吸收分光光度法进行测定。5.2.8汞按《中华人民共和国药典（2015年版）》第四部2321铅、镉、砷、汞、铜测定法中原子吸收分光光度法进行测定。5.2.9甲醇、乙醇残留按《中华人民共和国药典（2015年版）》第四部0861残留溶剂测定法第二法（毛细管柱顶空进样系统程序升温法）进行测定。5.3微生物指标5.3.1需氧菌总数检验按《中华人民共和国药典（2015年版）》第四部1105非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法中规定的方法检验。5.3.2霉菌及酵母菌数按《中华人民共和国药典（2015年版）》第四部1105非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法中规定的方法检验。5.3.3大肠埃希菌检验T/CCCMHPIE1.38—20185按《中华人民共和国药典（2015年版）》第四部1106非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法中规定的方法检验。5.3.4沙门氏菌检验按《中华人民共和国药典（2015年版）》第四部1106非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法中规定的方法检验。6检验规则6.1组批同品种、同等级、同一批投料生产的产品，以同一生产日期为一检验批次。6.2出厂检验6.2.1产品须逐批检验，检验合格并签发合格证后产品方可出厂。6.2.2出厂检验项目：干燥失重、灰分、残留溶剂、瑞鲍迪苷D含量、需氧菌总数、霉菌及酵母菌数。6.3型式检验63.1型式检验项目包括本标准中规定的全部项目。6.3.2正常生产时每年应进行一次型式检验。6.3.3有下列情况之一时须进行型式检验。a）原料来源变动较大时；b)正式投产后，如配方、生产工艺有较大变化，可能影响产品质量时；c)出厂检验与上一次型式检验结果有较大差异时；d)产品停产6个月以上，恢复生产时；e)食品安全监督部门提出进行型式检验的要求时。6.4判定规则6.4.1检验结果全部项目符合本标准规定时，判该批产品为合格品。6.4.2检验结果不符合本标准要求时，可以在原批次产品中双倍抽样复检一次，判定以复检结果为准。复检后仍有一项或一项以上不符合标准时，判该批产品为不合格品。7包装、标签、运输、贮存T/CCCMHPIE1.38—201867.1包装包装材料应符合GB9865食品安全国家标准食品接触材料及制品用添加剂使用标准的要求。7.2标签7.2.1包装标签上应标明：产品名称、批号、规格、净含量、执行标准、生产厂名、厂址、产地、生产日期、保质期、贮存条件。7.2.2外包装箱体上应标明：防潮、防晒、勿重压、等字样或标志。标签内容清晰可见，标签应粘贴牢固。7.3运输运输时必须轻装轻卸，不得与有毒、有害、有异味、易污染物品混装载运，严防挤压、雨淋、暴晒。7.4贮存产品应贮存于干燥、通风、阴凉、避光和清洁的仓库中。堆码距墙壁和地面20cm以上、并有垫隔物。避免与有毒、有害、易腐、易污染等物品一起堆放。7.5保质期在符合规定的贮运条件、包装完整、未经开启封口的情况下，保质期为24个月。T/CCCMHPIE1.38—20187附录A（规范性附录）检验方法A.1一般规定本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和符合GB/T6682规定的实验用水。实验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。A.2瑞鲍迪苷D含量的测定方法A.2.1方法提要样品经30%乙腈溶解后，采用高效液相色谱法测定，用外标法定量。A.2.2仪器和材料A.2.2.1分析天平，感量为0.1mg。A.2.2.2高效液相色谱仪（附紫外检测器）。A.2.2.3超声波清洗器。A.2.2.40.45µm微孔滤膜，有机相。A.2.3试剂和溶液A.2.3.1乙腈，色谱纯。A.2.3.2磷酸氢二钠，分析纯。A.2.3.3纯水，GB/T6682规定的二级水。A.2.3.4对照品：瑞鲍迪苷D，CAS号63279-13-0，购自USP，货号1600154或具有等效性的对照品。A.2.4色谱条件及系统适用性A.2.4.1色谱条件A.2.4.1.1色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶（C18）柱（250×4.6mm,5µm）。T/CCCMHPIE1.38—20188A.2.4.1.2流动相：A：pH2.6磷酸盐缓冲溶液（称取十二水合磷酸氢二钠3.58g，加水800mL溶解，用磷酸调至pH2.6，加水稀释至1000mL），B：pH2.6磷酸盐缓冲溶液-乙腈（50:50，V/V）。洗脱梯度见表1。表1洗脱梯度时间/min流动相A/%流动相B/%0.0160405.00386250.00386251.00604060.006040A.2.4.1.3流速：0.60mL/minA.2.4.1.4检测波长（UV）：210nmA.2.4.1.5柱温：40℃A.2.4.2系统适用性理论塔板数按瑞鲍迪苷D峰计算不得低于5000；取对照品溶液10µL，重复进样不少于3次，瑞鲍迪苷D峰面积的相对标准偏差（RSD）不得大于1.0%。A.2.4.2溶液制备A.2.4.2.1对照品溶液的制备取瑞鲍迪苷D对照品适量，加入30%的乙腈溶解制成每1mL含1mg的溶液，摇匀即得。A.2.4.2.2供试品溶液的制备取样品50mg，精密称定，于50mL的量瓶中，加入30%的乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀。用0.45μm微孔滤膜过滤即得供试液。A.2.5测定方法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10µL，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。T/CCCMHPIE1.38—20189A.2.6结果计算瑞鲍迪苷D含量以质量分数w1计，数值以%表示，按公式（E.1）计算：1001002111111/)w(mAPVCAw……………………………（E.1）w1——供试品中瑞鲍迪苷D的质量分数；A1——供试品溶液中瑞鲍迪苷D的峰面积；A2——对照品溶液中瑞鲍迪苷D的峰面积；C1——对照品溶液的浓度，mg/mL；V1——供试品溶液的稀释体积，mL；w——供试品的干燥失重，%；m1——供试品的称样量，mg；P1——对照品中瑞鲍迪苷D的纯度，%。T/CCCMHPIE1.38—201810附录B（资料性附录）图谱及参考保留时间B.1瑞鲍迪苷DHPLC图谱及参考保留时间B.1.1瑞鲍迪苷DHPLC图谱见图B.1和图B.2min01020304050mAU010020030040011.840图B.1瑞鲍迪苷D对照品HPLC图谱图B.2瑞鲍迪苷D供试品HPLC图谱T/CCCMHPIE1.38—201811B.1.2瑞鲍迪苷DHPLC参考保留时间表B.1瑞鲍迪苷D供试品HPLC图谱组分名称保留时间（min）瑞鲍迪苷D11.8非商业性声明：上述所采用的设备、色谱柱、标准对照品等，涉及具体商业品牌、型号的，仅供参考，无商业目的，鼓励标准使用者尝试使用不同品牌、型号的设备、色谱柱及标准品。