DB15T 1456-2018 苜蓿与禾本科饲料作物混合青贮饲料质量分级

ICS65.020.01B05备案号：59995-2018DB15内蒙古自治区地方标准DB15/T1456—2018苜蓿与禾本科饲料作物混合青贮饲料质量分级QualityGradingofmixedalfalfaandgramineouscropsilage2018-07-25发布2018-10-25实施内蒙古自治区质量技术监督局发布DB15/T1456—2018I前言本标准按GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由鄂尔多斯市农牧业局提出。本标准由鄂尔多斯市质量技术监督局归口。本标准起草单位：鄂尔多斯市农牧业科学研究院、中国农业大学、内蒙古草原工作站、内蒙古农业大学、鄂尔多斯市饲料草种监督检验站、鄂尔多斯市康泰仑农牧业股份有限公司、鄂尔多斯市农业技术推广站。本标准主要起草人：玉柱、余奕东、吴哲、达丽、娜日苏、王目森、贾婷婷、王美秀、薛虎、曹福中、闫俊先。DB15/T1456—20181苜蓿与禾本科饲料作物混合青贮饲料质量分级1范围本标准规定了苜蓿与禾本科饲料作物青贮饲料的质量标准、检测方法、质量分级判定规则。本标准适用于苜蓿与禾本科饲料作物的混合青贮饲料。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6432饲料中粗蛋白测定方法GB/T6435饲料中水分的测定GB/T6438饲料中粗灰分的测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB10468水果和蔬菜产品pH值的测定方法GB13078饲料卫生标准GB/T20195动物饲料试样的制备GB/T20806饲料中中性洗涤纤维（NDF）的测定NY/T2129饲草产品抽样技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1苜蓿与禾本科饲料作物混合青贮饲料mixedalfalfa-gramineouscropsilage将切碎的苜蓿与禾本科饲料作物混合，在密闭厌氧条件下发酵，产生乳酸，降低pH值，使有害微生物受到抑制而得以长期保存的饲料。3.2总氮totalnitrogen混合青贮饲料中氮的总量。3.3氨态氮ammonianitrogen混合青贮原料的蛋白质在发酵过程中分解产生的具有挥发性质的以氨形式存在的小分子含氮物质，其占混合青贮饲料总氮的百分比是衡量青贮过程中蛋白质降解程度的指标。4技术要求DB15/T1456—201824.1感官要求4.1.1颜色为黄绿色或黄褐色。4.1.2气味为酸香味或柔和酸味。4.1.3质地干净，茎叶结构完整，柔软物质不易脱落，无黏性或干硬，无霉斑。4.2质量标准苜蓿与禾本科饲料作物混合青贮饲料的营养化学指标应符合表1的要求。表1苜蓿与禾本科饲料作物混合青贮饲料质量分级指标等级一级二级三级pH≤4.5＞4.5,≤4.8＞4.8,≤5.1氨态氮/总氮,%≤8＞8,≤12＞12,≤16乙酸，%≤15＞15,≤20＞20,≤25丁酸，%0≤3≤4粗蛋白，%≥16＞14,≤16＞12,≤14中性洗涤纤维，%≤45＞45,≤50＞50,≤55粗灰分，%＜12注：乙酸、丁酸以占总酸的质量比表示；粗蛋白、中性洗涤纤维、粗灰分以占干物质的量表示。4.3卫生标准应符合GB13078的规定。5检测方法5.1抽样按NY/T2129的规定执行。5.2感官指标检测方法5.2.1颜色，在明亮的自然光条件下，肉眼目测。5.2.2气味，在混合青贮饲料常态下，贴近鼻尖嗅气味。5.2.3质地，用手指搓捻，感受混合青贮饲料的组织完整性以及是否发生霉变。5.3理化指标测定方法5.3.1试样制备混合青贮饲料化学指标分析样品制备，按照GB/T20195的规定执行。DB15/T1456—20183发酵品质指标分析样品的制备：分取混合青贮饲料样品20g，加入180mL蒸馏水，搅拌1min，用4层灭菌医药纱布和1层定性滤纸过滤，得到样品浸提液。5.3.2pH值将制备的混合青贮饲料试样浸提液，参见GB10468规定执行。5.3.3有机酸含量采用液相色谱法测定，参见附录A。5.3.4氨态氮含量采用比色法测定，参见附录B。5.3.5干物质含量参见GB/T6435的规定执行。5.3.6粗蛋白含量按照GB/T6432的规定执行。5.3.7中性洗涤纤维含量按照GB/T20806的规定执行。5.3.8粗灰分含量按照GB/T6438的规定执行。6判定规则6.1经感官评定，颜色、气味和质地符合品质要求初步判定为合格产品，否则初步判定为不合格产品。6.2混合青贮饲料的质量分级指标均同时符合某一等级时，则判定所代表的批次产品为该等级；当任意一项指标低于该等级指标时，则按单项指标最低值所在条块等级定级。DB15/T1456—20184AA附录A（资料性附录）高效液相色谱法测定混贮饲料有机酸含量A.1试剂和材料乙酸和丁酸标准品，符合GB/T6682的一级水，分析纯高氯酸。A.2仪器高效液相色谱仪，配备紫外检测器和工作站。A.3测定程序A.3.1色谱条件ShodexKC-811色谱柱，3mmol/L高氯酸为流动相，流速1mL/min，SPD检测器，检测波长210nm，柱温50℃，进样量5μL。A.3.2色谱测定将10mg/ml的乙酸和丁酸标准储备液，分别稀释配制成0.25、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0mg/ml六种浓度梯度的乙酸标准工作液和0.125、0.25、0.50、0.75、1.00、1.50mg/ml六种浓度梯度的丁酸标准工作液，然后将这两种标准液配成六种浓度梯度的混合标准液。采用外标法，用乙酸和丁酸标准液制作标准工作曲线。样品浸提液中待测乙酸和丁酸响应值应在工作曲线范围内，否则，就应稀释样品浸提液或重新配制标准工作液。上机测定时，标准工作溶液与样品浸提液进样体积一样，每测定若干试样，需测定一个标准工作溶液。标准工作溶液和试样浸提液乙酸、丁酸的响应值均应在仪器检测的线性范围内。按照色谱条件分析标准品，乙酸和丁酸的保留时间分别约为11.2min、15.8min，标准品的液相色谱图见图1。说明：mAU——毫吸光度minutes——分钟图1乙酸和丁酸混合标准品的液相色谱图A.3.3样品的检测乙酸丁酸(min)DB15/T1456—20185将制备的混合青贮饲料样品浸提液，通过0.22μm水系滤膜过滤后，采用高效液相色谱法测定乙酸和丁酸含量。A.3.4结果计算用色谱工作站计算样品浸提液被测物的含量。再通过换算浸提液制备过程中对应的样品量，获得乙酸和丁酸在样品中的比例。DB15/T1456—20186BB附录B（资料性附录）氨态氮含量的测定B.1试剂B.1.1除非另有规定，仅使用分析纯试剂和符合GB/T6682的三级水。B.1.2亚硝基铁氰化钠（Na2[Fe(CN)5·NO]2H2O）。B.1.3结晶苯酚（C6H5O）。B.1.4氢氧化钠（NaOH）。B.1.5磷酸氢二钠（Na2HPO6·7H2O）。B.1.6次氯酸钠（NaClO）：含活性氯≥8.5%。B.1.7硫酸铵[(NH4)2SO4]。B.1.8苯酚试剂将0.15g亚硝基铁氰化钠溶解在1.5L蒸馏水中，再加入29.7g结晶苯酚，定容到3L后贮存在棕色玻璃试剂瓶中，低温保存。B.1.9次氯酸钠试剂将15g氢氧化钠溶解在2L蒸馏水中，再加入113.6g磷酸氢二钠，中火加热并不断搅拌至完全溶解。冷却后加入44.1mL含≥8.5%活性氯的次氯酸钠溶液并混匀，定容到3L，贮藏于棕色试剂瓶中，低温保存。B.1.10标准铵贮备液称取0.6607g经100℃烘干24h的硫酸铵溶于蒸馏水中，并定容至100mL，配制成100mmol/L的标准铵贮备液。B.2仪器与设备B.2.1分光光度计：630nm，1cm石英比色皿。B.2.2水浴锅。B.2.3移液器：50μL。B.2.4移液管：2mL，5mL。B.2.5玻璃器皿：试管，所需器皿用稀盐酸浸泡，依次用自来水、蒸馏水洗净。B.3测定步骤DB15/T1456—20187B.3.1标准曲线的建立取标准铵贮备液稀释配制成1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mmol/L五种不同浓度梯度的标准液。向每支试管中加入50μL标准液，空白为50μL蒸馏水；向每支试管中加入2.5mL的苯酚试剂，摇匀；再向每支试管中加入2mL次氯酸钠试剂，并混匀；将混合液在95℃水浴中加热显色反应5min；冷却后，630nm波长下比色。以吸光度和标准液浓度为坐标轴建立标准曲线。B.3.2样品的检测向每支试管中加入50μL正文中所述制备样品浸出液，按正文中的检测步骤测定样本液的吸光度。B.3.3水分测定按GB/T6435的规定执行。B.3.4总氮的检测按GB/T6432的规定执行。B.3.5结果计算氨态氮的含量按式（2）进行计算。2102014100/20180NMDX）（…………………………………………（B.1）式中：X——氨态氮含量，单位为占总氮的质量百分比（总氮%）；——样液的浓度，单位为毫摩尔每升（mmol/L）；D——样液的总稀释倍数；M——样品的水分含量，单位为百分比（%）；N——样品的总氮含量，单位为占鲜样的质量百分比（%鲜样）。