环境激素双酚A降解菌的分离、鉴定及初步应用研究

东华大学硕士学位论文环境激素双酚A降解菌的分离、鉴定及初步应用研究姓名：王小存申请学位级别：硕士专业：环境科学指导教师：赵晓祥20070101环境激素双酚A降解菌的分离、鉴定及初步应用研究作者：王小存学位授予单位：东华大学相似文献(10条)1.期刊论文任仁.黄俊哪些物质属于内分泌干扰物(EDCs)-安全与环境工程2004,11(3)介绍了什么是内分泌干扰物(环境激素),指出其名单是很受关注的重要问题,介绍了目前影响较大的日本环境厅的关于环境内分泌干扰物的战略计划'98、世界自然基金会的环境中被报告具有生殖和内分泌干扰作用的化学物质清单、美国环保局的与在动物和人体中或在试管中的内分泌系统效应有关的化学物质初步清单、美国OurStolenFuture网站的具有内分泌干扰效应的普遍污染物清单的内容和特点,摘要编译了美国OurStolenFuture网站的干扰物名单.2.期刊论文赵军.韦薇.ZHAOJun.WEIWei环境激素对人体健康的影响-化学教育2008,29(11)环境激素是环境中存在的能干扰生物系统或过程产生异常效应的物质;它能干扰生物体内激素,损害人类的生殖机能或引发肿瘤等,对人类的生存与健康构成严重威胁;防治环境激素的根本对策是杜绝其产生的源头.3.学位论文杜玉复合材料对壬基酚的吸附净化及催化再生研究2009壬基酚是环境激素中强雌激素效应、难生物降解的化合物。治理洗涤、日化废水的关键就是对壬基酚的有效治理。本文研究制备了具有吸附分离和催化净化特点的复合膜，用于净化去除水中微量内分泌干扰物壬基酚。并通过X射线衍射(XRD)、紫外-可见吸收光谱(UV-vis)对所制备的CuO及复合膜进行表征分析。br　　(1)采用溶胶-凝胶、浸渍.提拉法制备了TiO2/ACF聚酯功能复合膜。该复合膜对100mL5mg/LNP具有较高的去除效率，可以达到80％左右，但是该复合膜负载不牢固，影响了重复使用效果和催化再生效率。通过在制膜过程中引入正硅酸乙酯和硅烷偶联剂KH560，改性TiO2/ACF聚酯功能复合膜。改性后的复合膜不仅负载牢固稳定，使得膜的重复使用成为可能、获得较高的催化再生能力，并且单纯吸附效果也大大提高，基本接近100％。br　　(2)采用水热合成法制备了纳米级CuO颗粒粉末，使用XRD、UV-vis等手段表征CuO催化剂的晶体特性和光吸收特性，数据显示所制备的CuO有着较高的光吸收效率和较宽的光吸收范围，其晶型为单斜晶体。采用浸渍法制备CTS/CuO/ACF聚酯功能复合膜，研究了膜中不同组分对5mg/LNP吸附所起的作用，并研究了pH值、温度对复合膜吸附NP的影响以及不同CuO负载量对复合膜光催化性能的影响。研究显示，酸性条件、提高温度均有利于复合膜对NP的吸附去除，氧化铜负载量增加有利于光催化净化能力提高。此外，多次连续吸附实验证明，CTS/CuO/ACF复合膜可重复利用性高，并且如果经过光催化再生其吸附去除壬基酚能力仍然能达到75％以上。4.期刊论文吕潇.李慧冬.杜红霞.王文博.黎秀卿.李杰.朱端卫.LUXiao.LIHui-dong.DUHong-xia.WANGWen-bo.LIXiu-qing.LIJie.ZHUDuan-wei农药类内分泌干扰物的研究进展-华中农业大学学报2006,25(1)论述了农药类内分泌干扰物对人类及动物的危害.对农药类内分泌干扰物类型、作用机理、测评技术及研究现状进行了综述.介绍了生物筛选的主要方法和研究进展.5.期刊论文王杉霖.张剑波.WangShanlin.ZhangJianbo中国环境内分泌干扰物的污染现状分析-环境污染与防治2005,27(3)内分泌干扰物严重威胁着全球环境和生态健康,基于人为源内分泌干扰物的分类,分析了国内内分泌干扰物的污染现状,指出了目前研究工作的局限,提出了今后研究重点及污染控制的建议.6.学位论文王轶楠p，p'-DDE、β-BHC单独及联合作用对大鼠睾丸支持细胞FasL表达和NF-κB活性的影响2008正常情况下，人和其他生物能根据自身生长发育的需要合成内分泌激素以调节正常新陈代谢。然而近些年来，人类不断发现一些存在于生物机体之外的具有与人和生物内分泌激素作用类似的物质，有时能引起生物内分泌紊乱，人们称之为环境激素(environmentalhormones)，又称为内分泌干扰化学物(endocrinedisruptingchemicals，EDCs)。近年来，不断报道野生动物和人类生殖发育异常现象，学者们认为环境雌激素及其他的内分泌干扰物是造成生殖异常的共同原因。有机氯农药滴滴涕(2,2-bis(4-chlorophenyl)-1,1,1-trichloroethane，DDT)和六六六(benzene-hexachloride，BHC，HCB)是污染范围广、危害大、在环境中残留时间长并可通过食物链的生物放大作用而进入机体的持久性有机污染物(persistentorganicpollutants，POPs)，可在机体脂肪组织和血脂中存留数十年。P,p’-DDE和b-BHC分别是有机氯农药DDT和BHC的主要代谢产物，在人体和其他动物体内的水平较高。研究表明，这些有机氯农药及其代谢产物多具有生殖内分泌干扰作用，特别是对男性生殖功能的影响已引起人们的高度重视。Fas和FasL是介导细胞凋亡的一对膜蛋白，生精细胞凋亡增多时，Fas和FasL表达明显增强；NF-κB与细胞凋亡的关系密切，其参与多种凋亡相关基因的转录调控，并且发现NF-κB与细胞凋亡存在双向调节关系，它既可抑制细胞凋亡也可促进细胞凋亡；但p,p’-DDE、b-BHC单独及联合作用是否对支持细胞FasL表达和NF-κB活性有影响以及这种影响在p,p’-DDE、b-BHC单独及联合致雄性生殖损害中的意义的研究，国内外鲜有报道。本课题以支持细胞（睾丸曲细精管中唯一的体细胞）作为靶细胞，以p,p’-DDE、b-BHC单独及联合作为受试物来初步探讨进而揭示p,p’-DDE、b-BHC单独及联合作用是否通过激活Fas/FasL系统及其下游NF-κB而对雄性生殖系统造成危害，为p,p’-DDE、b-BHC单独及联合致男性生殖能力下降的机制研究提供一定的科学依据。第一部分：大鼠睾丸支持细胞的离体培养及p,p’-DDE、b-BHC单独及联合作用对支持细胞活力的影响目的：通过探讨p,p’-DDE、b-BHC单独及联合作用对支持细胞活力的影响来确定细胞的作用浓度。方法：对离体培养的支持细胞分别用10mmol/L、30mmol/L、50mmol/L、70mmol/L的p,p’-DDE、b-BHC单独及联合染毒24h后用MTT比色法测定其在490nm的吸光度值。结果：不同浓度p,p’-DDE、b-BHC单独及联合作用于支持细胞24h后，支持细胞的吸光度随着浓度增加而呈下降的趋势。P,p’-DDE、b-BHC单独作用后，其活性改变在50、70mmol/L组有统计学意义(与溶剂对照组比较，P0.05)，联合染毒后活性改变在50mmol/L时有统计学意义(与溶剂对照组比较，P0.05)，而其他组别与溶剂对照组比较无统计学意义。结论：吸光度值随着染毒浓度的增加而有逐渐降低的趋势。当p,p’-DDE、b-BHC单独及联合浓度达到50mmol/L时可以看出支持细胞的活性明显降低，与溶剂对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。第二部分：p,p’-DDE、b-BHC单独及联合作用对大鼠睾丸支持细胞FasLmRNA和蛋白表达的影响目的：探讨p,p’-DDE、b-BHC单独及联合作用对支持细胞FasLmRNA和蛋白表达的影响。方法：RT-PCR法研究FasLmRNA表达情况；WesternBlot法研究FasL蛋白表达情况。结果：RT-PCR法发现支持细胞内FasLmRNA的表达随p,p’-DDE、b-BHC单独及联合浓度的增加而增强，各高浓度组(50mmol/L)FasLmRNA表达与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)，各组内低(10mmol/L)、中浓度组(30mmol/L)FasLmRNA表达与高浓度组(50mmol/L)比较差异有统计学意义(P0.05)；WesternBlot法发现支持细胞内FasL蛋白的表达随p,p’-DDE、b-BHC单独及联合浓度的增加而增强，各低(10mmol/L)、中(30mmol/L)、高(50mmol/L)浓度组与对照组比较差异均有统计学意义(P0.05)。在各高浓度组(50mmol/L)，蛋白表达情况与FasLmRNA的表达相一致。在时间点上FasL在24h内呈现先增高后降低的趋势，在染毒后6h表达量最多。结论：大鼠睾丸支持细胞经p,p’-DDE、b-BHC单独及联合染毒后，FasLmRNA表达明显升高，蛋白表达也呈现增高的趋势；在时间点上，蛋白表达在24h内呈现先增高后降低的趋势。第三部分：p,p’-DDE、b-BHC单独及联合作用对大鼠睾丸支持细胞NF-κB活性的影响目的：探讨p,p’-DDE、b-BHC单独及联合作用对大鼠睾丸支持细胞NF-κB活性的影响。方法：用激光共聚焦显微镜检测NF-κB的转位激活状况。结果：支持细胞细胞核被染成蓝色，NF-κBp65被染成红色，在正常情况下，NF-κB主要存在于胞浆中，不同浓度的p,p’-DDE、b-BHC单独及联合染毒支持细胞24h后，NF-κBp65转移到细胞核中，核转录因子的活性随染毒浓度的增加而增强，各联合染毒浓度组的作用比p,p’-DDE、b-BHC单独作用更加明显。结论：NF-κB的活性随p,p’-DDE、b-BHC单独及联合染毒浓度的增加而增强，且联合作用比单独作用更加明显。综上所述，本研究结果表明：1.P,p’-DDE、b-BHC单独及联合对支持细胞的最大染毒浓度为50mmol/L；2.大鼠睾丸支持细胞在p,p’-DDE、b-BHC单独及联合作用24h后，FasLmRNA的表达随着染毒浓度的增加而表达增强；3.FasL蛋白表达随着染毒浓度的增加而增强，在24h内呈现先增高后降低的趋势；4.NF-κB随染毒浓度的增加而活性逐渐增强，呈剂量依赖性关系。这些研究表明p,p’-DDE、b-BHC单独及联合作用可引起睾丸支持细胞FasLmRNA水平的升高，进而导致FasL蛋白表达的升高，激活Fas/FasL系统，而NF-κB可能通过调控FasL的表达，进而通过调节睾丸生殖细胞的凋亡而影响正常精子发生。研究还发现联合染毒组NF-κB的活性比单独作用时更加明显，因此可推测p,p’-DDE、b-BHC的联合对离体大鼠睾丸支持细胞的影响有交互作用，但p,p’-DDE、b-BHC单独及联合作用对FasL和NF-κB下游Caspase的影响及其对支持细胞凋亡的影响，还有待于深入研究。7.期刊论文郑晓英.周玉文.ZHENGXiao-ying.ZHOUYu-wen城市污泥中邻苯二甲酸酯类环境激素的研究进展-环境与健康杂志2006,23(4)邻苯二甲酸酯类环境激素对环境的污染及对内分泌的干扰作用已引起世界各国的广泛关注.该文论述了城市污泥中邻苯二甲酸酯的研究进展,并针对目前存在的问题,提出了防治措施及研究重点.8.学位论文王兰三种酚类环境激素物质的检测新方法的研究2006环境激素又称为内分泌干扰物，是一种由于人类的生产和生活活动而释放到周围环境中的，对人体内和动物体内原本营造的正常激素功能施加影响，从而影响内分泌系统的化学物质。它们能影响人类等多种生物的生殖功能与发育系统，降低生殖和免疫能力，导致神经系统失调及多种生理异常。近年来，环境激素问题已经成为继温室效应、臭氧层破坏之后的第三大环境问题，对其筛选及检测方法的研究，现己成为环境科学研究的热点领域之一。本文研究了检测环境激素中双酚A(BPA)和2,4，6-三氯苯酚(TCP)的荧光免疫分析法及检测对叔丁基苯酚的流动注射化学发光法。这两种方法用于检测这三种环境激素物质均可达到比较理想的效果。通过制备BPA和TCP的特异性抗体，建立荧光免疫分析法。先在半抗原BPA