CRP培训

四川多少家医院?多少台血球?一年血球工作量?HS-CRP?上海市医院的用量•上海市儿科医院:每天1100-1300测试•上海市儿童医院:每天1000测试•上海市新华医院:每天300-500测试•上海市长宁区中心医院:每天500-800测试•区中心医院:每天200-300测试•二乙医院:每天100-150测试•三甲医院:每天80-100测试年销售额分析天工作量年工作量300天HS-CRP5015000HS-CRP10030000HS-CRP20060000HS-CRP500150000C-反应蛋白•C反应蛋白（C-reactiveprotein,CRP）是由Tillet和Francis于1930年在一些急性病患者的血清中发现，是环状五球体蛋白，是炎性淋巴因子白介素-6、白介素-1，肿瘤坏死因子刺激肝脏上皮细胞合成的。因为它能和肺炎链球菌的荚膜C多糖起沉淀反应而得名。•超敏C反应蛋白（highsensitivityC-reactiveprotein,hs-CRP）是使用高敏感的检测方法检测出来的CRP，即检测方法具有检测到≤0.3mg/L的CRP的能力。hs-CRP/CRP的主要临床应用•感染的诊断和鉴别–CRP在细菌性感染明显升高，而病毒感染时无显著升高，为感染类型的鉴别提供了极其重要的依据。•确定抗生素的疗效–CRP降低的程度与症状的减轻和治疗后的天数明显相关（P0.01）。•与心血管疾病的关系–低水平的HS-CRP（0.1～3mg/L）与心血管疾病的发生有着密切的关系，是心血管炎症病变的生物标志物。•新生儿疾病的早期诊断和监测–早产儿与足月儿的CRP(3mg/L)升高与感染明显相关。故认为新生儿出生3d内测CRP仍有非常重要的意义。CRP的临床应用WBCESRCRP感染时反应速度升高较慢，治疗有效后变化缓慢2-3天可见升高，至少二－三周回复正常变化快速，几小时可见升高，平均8小时CRP增加一倍，随着治愈，一周内恢复正常。影响因素易受年龄、日间变化、妊娠与分娩、药物治疗等因素的影响。易受温度、贫血、血沉管位置、异常免疫球蛋白或复合物、药物等影响。不受生理、免疫状态药物治疗等影响。鉴别诊断不能鉴别细菌和病毒感染。不易鉴别细菌的病毒感染能鉴别细菌和病毒感染相关疾病的活动性WBC量的变化不能反应疾病的活动性无相关性CRP量的动态变化能反应疾病的活动性对CRP结果的解释正常人CRP≤8mg/l，其降低比升高更有意义，如果不是新生儿，病程6-12h，可基本排除细菌感染，10-99mg/l，提示局灶性或浅表感染，≥100mg/l提示败血症或侵袭性感染等严重感染。CRP推广的前提•要定量测定•与大型特定蛋白分析仪有可比性•最好采用末梢血或全血•最好能在1小时内得到实验结果。如医生在天后收到结果，CRP值的意义就不大了。检验医学的两极分化检验医学即时检验实验室自动化简单化自动化发展趋势•杨振华教授–将来的检验更靠近患者并分布在整个医院和社区门诊部，美国在近期多到80%的检验距离患者只有几步远的仪器完成，中央实验室仍将存在，来处理床边仪器不能检测的项目。•丛玉隆教授–将来POCT应该达到检查的70%-80%以上，基本改变目前的检验格局；当然中心实验室也应该存在，主要进行一些复杂的实验。POCT概念•Testdesignedtobeusedatonenearthesitewherethepatientislocated,thatdonotrequirepermanent,dedicatedspace,andthatareperformedoutsidethephysicalfacilitiesoftheclinicallaboratory•可在病人身边或就近进行的检验，不需要太多的时间，也不需要特定的地方，可在实验室以外的地方进行。•中文译名–即时检验即时检验的优点•周转时间改善•操作容易•监测越好，做的越频繁•样品量少，集中分析变为现场•个性化服务•经济利益–减少住院天数–减少并发症即时检验的优点•周转时间改善•操作容易•监测越好，做的越频繁•样品量少，集中分析变为现场•个性化服务•经济利益–减少住院天数–减少并发症即时检验的缺点•质控不完善•人为误差大是结果质量差70%原因来源•结果与实验室结果有差别•成本高•项目单一，设备重复•网络化差，资料记录不便即时检验发展趋势•定性和半定量向全定量转换•自带独立质控系统•开展项目更多•操作更简单•速度更快•降低成本•自动化•信息化即时检验发展趋势•定性和半定量向全定量转换•自带独立质控系统•开展项目更多•操作更简单•速度更快•降低成本•自动化•信息化中国POCT特点•医生和病人使用较少•主要在检验科急诊•单机工作量远远大于国外•中小型医院使用较多•大型医院因为质量原因采用较少HS-CRP/CRP的市场分析•使用的仪器–大型特定蛋白分析仪：•优点：项目多，准确，采用散射速率法，批量速度快•缺点：只能使用血清，仪器成本高，单个标本速度慢–POCT（即时检验）小型仪器•优点：标本来源多（末梢血、全血、血清）、仪器成本低、操作简单、单个速度快•缺点：结果准确性少差，整体速度慢，全手工操作，信息化程度差–与血球一起做都是末梢血、全血标本，因此大型特定蛋白分析仪不合适HS-CRP/CRP的市场分析–医院分类•儿童医院：已经成熟，基本与血球计数同时做，量已经很大，目前大型儿童医院已经达到300-500个测试每天。•中小型综合医院：开始逐步在门急诊推广，一般为血球量的一半到全部组合。标本主要是做五分类的静脉全血或末梢血。•大型和特大型医院：目前开展的医院比较少，主要原因：大型仪器只能做血清，而目前POCT仪器结果差，速度慢，手工操作步骤多，无条码，不能联LIS因此虽然能做全血也没有医院愿意采用其它POCT基本操作步骤上机检测P-914P-911吸取混匀液不够是混匀加入试剂加入稀释管手摇混匀采集标本不够准备稀释液标本登记吸取标本是手工抄写结果读取空白艾瑞德增强型Hs-CRP/CRP检测操作步骤一.采血全血（原试管）末梢血（“子弹头”）和血球仪器共用试管或子弹头,免去采血艾瑞德增强型Hs-CRP/CRP检测操作步骤二.条形码扫描（可选）LIS系统病人信息、项目信息艾瑞德增强型Hs-CRP/CRP检测操作步骤三.全自动吸样、稀释、加样原试管子弹头四.检测、报告艾瑞德增强型Hs-CRP/CRP检测操作步骤检测结果传输到LIS系统艾瑞德操作步骤上机检测P-850P-853吸取混匀液混匀加入试剂加入稀释管手摇混匀采集标本不够准备稀释液标本登记吸取标本是手工抄写结果读取空白P-907P-908取消vaitaitis-2004改善•减少9个步骤•改善2个步骤•消除人为误差•减少1800步骤(每天200个标本)其他产品基本操作步骤其中红色部分是艾瑞德省略的步骤,绿色是改进的步骤减去十个步骤,简化到二个步骤(可以和血球共用试管或子弹头,自动吸样)采血标本登记吸取标本加入稀释管手摇混匀吸取混合液/加样加入试剂手工抄录结果上机测试读取空白混匀准备稀释液艾瑞德（增强型）快速测定仪特点•干式免疫层吸原理，采用专利的两点定标，实现真正的全定量。•标本类型多：末梢血、全血、血清•速度快：每小时120个测试•自动化程度高：可以直接上原始管和子弹头，自动稀释，自动加到干片上•支持标本条码和LIS系统•中文窗口操作系统•质量赶上大型仪器数据精确•全血C.V.（变异系数）≤7％(ISO要求14%)•与大型仪器相关性好98%•重复性好，结果准确。竞争对手日本常光IREADER韩国艾可美芬兰QUICKREADER国赛希亚克备注方法学免疫层析法免疫层析法透射比浊散射比浊散射比浊散射比浊法是不适合进行全血测定反应步骤一步法三步法四步法五步法五步法步骤多,操作复杂前处理自动化手动手动手动手动自动化可以避免人为误差样本条码支持无无无无定标类型实时两点定标+定标卡定标卡定标卡定标卡定标卡窗口操作界面支持中文窗口无无无无内置质控有有无无无实际速度/小时90-10050252580有效测定范围0.25-1600.5-2008-1603-1403-160常光的范围是真实测出来的,且0.25是真正符合超敏要求其它消耗品无有有有有我们的机会•儿童医院–工作量大，方法落后•三甲医院–目前无竞争，质量和操作满足要求，一旦组合工作量巨大，血球量的一半到全部•区中心医院–工作量大，方法落后投资回报•大型和特大型医院–需要2-3套仪器•大型医院–需要1-2套仪器•中型医院–需要1套仪器•每套仪器5.25万,一般半年内回本,最慢9个月•售后服务主要是送货,仪器有问题直接更换•原理：免疫层析法双抗体夹心法•检测：CCD散射测定＋＋抗原C1/2原理HAuCl4枸橼酸胶体金抗体抗体•胶体金C1/2鼠抗体•胶体金羊抗鼠抗体单克隆抗体单克隆抗体•胶体金TT全定量每批试剂有十点定标曲线两点定标即：C1&C2抗干扰、数据可靠、准确CRP检测范围0.25～160mg/lXYC1C2T两点定标法示意图XC2T一点定标法示意图BBY强大的可扩展功能•常光i-Reader同一台仪器可检测多种项目品牌（产商）型号检测项目日本Jokoh(常光)i-Reader快速检测仪SF、FOB、Hb、CRP、HS-CRP、HCG、LH、Tn-I、Myo……(PSA、CEA、AFP、Ca19-9、Ca125,T3、T4、TSH2010年上市）更多测定项目可扩展可以扩展项目多•心肌标志物–Tni–Myo•铁蛋白•肿瘤标志物共二十七个项目艾瑞德在妇产科开展的项目项目•促黄体生成素（LH）–由腺垂体嗜碱粒细胞分泌。在女性（LH）协同FSH共同作用维持卵巢的月经周期，导致排卵与黄体形成。•人绒毛膜促性腺激素（HCG）–人绒毛膜促性腺激素(hCG)是一种由胎盘产生的、结构与垂体激素FSH、TSH和LH类似的糖蛋白激素。这些激素都含有相同的α亚单位(MW15000–20000道尔顿)，但因β亚单位不同而造成各自免疫学和生物学上的特异性。谢谢!影响散射浊度法因素一•伪浊度的影响–伪浊度形成原因很复杂，主要是抗血清含有非特异性的交叉反应性杂抗体成分；增浊剂浓度和反应时间掌握不当；样品本身的浊度处理不当；试剂的污染和变质；器材尤其是比色杯等不够清洁等因素。–目前用散射法测定全血仪器，都是采用人工加试剂和控制时间，因此容易产生伪浊度，从而造成测量不准。比浊法•透射光免疫浊度法–透射光免疫浊度法是个极简便的方法，测定方式是测定入射光因反射、吸收或散射后的衰减，读数以吸收光单位（A）或OD表示，这种A值反映了入射光和透射光的比率。•散射比浊法–散射比浊的原理是根据雷利(Rayleigh)公式提出的，当复合物较小时（3*10）呈全透射，透射与散射相当。当复合物大于入射光波的1/20时，形成不对称前向散射，在90o以前的角度测量散射光皆取得最佳效果，散射光的量代表复合物的量。影响散射浊度法因素三•钩状效应的影响–钩状效应存在于各种免疫测定方法中，在免疫浊度测定中也十分明显。现在很多仪器已具有检查钩状效应的功能，一经发现便可对样品稀释后复测。当病人症状与检测结果明显不符时，应怀疑其存在。–目前用散射法测定全血仪器，没有自动稀释功能和过量检测功能，因此对于由于浓度过高而产生的钩状效应，从而产生假阴性。影响散射浊度法因素二•非特异性散射光的影响–免疫浊度法经常受内源性光散射的干扰，为避免这些非特异性光散射的影响，应用透射比浊法时需保证抗体组分在3％以下，散射比浊法需保证在0.5％以下。–全血的血细胞或血细胞碎片会产生非特异性散射光，从而影响测定准确性，相对来说透射比浊法的准确性比散射比浊法要准确些。