LC-MS-MS定量培训参考资料

1ABChina©2008AppliedBiosystems感谢您使用ABI产品●请将您的手机设置为静音●卫生间位于大门右侧●敬请各位留意紧急通道,大门左侧楼梯2ABChina©2008AppliedBiosystems培训日程第一天上午9:00-下午4:009:00-9:20爱普拜斯应用生物系统公司技术服务体系简介9:20-9:40用户自我介绍9:40-10:00合影10:00-10:10茶歇10:10-11:30串联液质系统分析原理11:30-12:00总结与问题解答12:00-1:30工作午餐1:30-4:00实验操作练习实验操作内容：仪器硬件设备简介与维护ESI、APCI源的转换方法管路的正确连接方法：连续进样、色谱进样等复习PPG校正方法及应注意的问题3ABChina©2008AppliedBiosystems培训日程第二天上午9:00-下午4:009:00-10:30Analyst软件概揽、定量分析流程简介10:30-10:40茶歇10:40-11:30如何建立定量方法、定量列表及结果计算，Analyst软件的使用（电脑模拟演示11:30-12:00），总结与问题解答12:00-1:30工作午餐1:30-4:00实验操作练习实验操作内容：定量方法建立的基本流程MRM方法建立与参数优化-FIA优化源参数-LC-MS调整优化目标化合物的保留时间，并进行进一步参数优化与调整，以得到满意的灵敏度4ABChina©2008AppliedBiosystems培训日程第三天上午9:00-下午4:009:00-10:00定量分析思路与成功液质分析的经验。10:00-10:30Analyst软件的使用（电脑模拟演示）－常用Script功能简介10:30-10:40茶歇10:40-12:00Analyst软件的使用（电脑模拟演示）－计算器、数据库功能及其他问题解答12:00-1:30工作午餐1:30-4:00实验操作练习实验操作内容：练习Analyst软件拓展功能Library、Calculator、Scripts…上机操作自由练习5ABChina©2008AppliedBiosystemsASCMissionStatement亚太技术应用支持中心宗旨Toofferastate-of-the-artfacilityforChinaandAsiaPacific,providingtheadvancedmassspectrometryproductportfolioinafunctionalsetting,arangeofapplicationandtrainingexperts,andcomprehensivecustomersupportprograms,toservethelifesciencecommunityandmeetourcustomer’sneeds.为中国和亚太区提供一个我公司最现代化的质谱技术支持中心平台,为生命科学领域的研究者和我们的客户提供快捷、全方位的一站式服务！6ABChina©2008AppliedBiosystemsASCTechnologyandSupportAreas技术和应用范围Pharmaceutical&NaturalProducts,Proteomics&BiomarkerResearch,Forensics,EnvironmentandFoodSafetyTesting新药研发,天然产物,蛋白组学和生物标志物,法医,环境和食品安全分析QTRAP®FamilyQSTAR®ELITETOF/TOFTMFamilyLightSight™&Cliquid™SoftwareiTRAQ™ReagentsTempoTMLCFamilyAPI®FamilySmallMoleculesProteomics/BiomarkerPOROS®ReagentsMarkerView™andAnalyst®SoftwareProteinPilot™Software7ABChina©2008AppliedBiosystemsInstrumentDemonstrationandSampleAnalysis仪器示范和各个领域中的样品分析BestinClassHighPerformanceAdvancedTandemMassSpectrometers性能卓越技术领先的串联质谱仪系列8ABChina©2008AppliedBiosystemsComprehensiveandSystematicTrainingPrograms提供综合性和系统性培训，包括技术和应用培训-Regulartrainingcoursespostedontheweb常规培训班(网络注册）-Trainingcoursesonthedemand客户特殊需求的培训班-Externaltraining客户培训-Internaltraining内部员工培训9ABChina©2008AppliedBiosystemsDevelopmentofRegionalSpecificApplications针对本土需求提供服务,开发本土应用市场–如食品安全分析XICof+MRM(10pairs):249.3/104.2amufromSample1(STD0#1)of30OCT02DAY8Validatio...Max.1233.3cps.1234567891011121314Time,min0.05000.01.0e41.5e42.0e42.5e43.0e43.5e44.0e44.5e45.0e45.5e46.0e46.5e47.0e47.5e48.0e413.6014.4613.201.539.000.071.7910.5411.506.549.764.537.626.198.552.874.175.62XICof+MRM(10pairs):249.3/104.2amufromSample6(STD2.0#1)of30OCT02DAY8Validatio...Max.1.3e4cps.1234567891011121314Time,min0.01.0e42.0e43.0e44.0e45.0e46.0e47.0e48.0e49.0e41.0e51.1e51.2e51.3e51.4e51.5e57.67Nitrofuranmetabolitesinchichen10ABChina©2008AppliedBiosystemsProvideOn-siteandRemoteSupportNetwork提供多样化的支持，边远地区的客户也能享受到及时的服务Skype,emails,webex,webinars在线服务Phonesupport&trackingsystem电话支持和追踪服务Onsiteapplicationsupport现场应用支持11ABChina©2008AppliedBiosystemsASCAComprehensiveOne-StopFacilityServesABCustomersinAsiaPacific为生命科学领域的研究者和我们的客户提供快捷、全方位的一站式服务！Comprehensivetrainingprograms多样化的培训Demo&sampleanalysis示范和样品分析Integratingscience&technology,andexpertise,tohelpthelifesciencecommunityandsatisfycustomers综合科技，专业技术，让生命科学研究者和我们的客户得到最满意的服务Developmentofregionalspecificapplications开发本土应用On-siteandremotesupportnetwork现场和在线支持FoodSafetyCollaborationwithleadersinthefield与行业领导者合作美国应用生物系统公司亚太区技术服务中心串联液质系统分析原理13ABChina©2008AppliedBiosystems联系方式●硬件及保修：8008100497●软件及应用：8008203488北京8008100192\广州8008302001●网站：©2008AppliedBiosystemsDay1培训日程9:00-9:20爱普拜斯应用生物系统公司技术服务体系简介9:20-9:40用户自我介绍9:40-10:00合影10:00-10:10茶歇10:10-11:30串联液质系统分析原理11:30-12:00总结与问题解答12:00-1:30工作午餐1:30-4:00实验操作练习来自什么单位、使用仪器的型号、主要用途、对质谱技术的了解程度、想通过培训班学到些什么？15ABChina©2008AppliedBiosystems100200300400500600m/z0100%254.2194.2507.3334.3399.7质谱的基本概念一、质谱是什么？一、质谱是什么？MassSpectromety特殊的天平：称量离子的质量。质谱学：是一门研究气相离子结构、性质及反应行为的科学。二、质谱能做什么？二、质谱能做什么？定性：化合物的结构定量：混合物的组成领域：化学、生物学、医学、药学、环境、物理、材料、能源等三、质谱的独到之处是什么？三、质谱的独到之处是什么？4个特性：Sensitivity灵敏Speed快速Specificity特异Stoichiometry化学计量16ABChina©2008AppliedBiosystems●质谱分析过程：样品通过进样系统进入离子源，由于结构性质不同而电离为各种不同质荷比（m/z）的分子离子和碎片离子，而后，带有样品信息的离子碎片被加速进入质量分析器，不同的离子在质量分析器中被分离并按质荷比大小依次抵达检测器，经记录即得到按不同质荷比排列的离子质量谱，也就是质谱(massspectrum)。●质谱：按离子的质荷比的大小依次排列形成的图谱质谱技术：17ABChina©2008AppliedBiosystems质谱是如何工作的质谱是如何工作的样品引入离子化质量分析器质量分析检测器检测数据分析离子源+133013301330134013401340135013501350100100100757575505050252525000样品引入Methodtovaporizesample•Solid•Liquid•Vapor检测离子离子的形成(带电荷的离子)根据质荷比(m/z)分离质谱图18ABChina©2008AppliedBiosystems液相色谱串联质谱1.液体样品通过LC或连续进样进入离子源中2.液体中有关的分子转变成气态的离子；这些离子到达真空界面3.在电场梯度和压力梯度下，离子通过界面4.离子在四级杆中传输、选择或碎裂5.离子被检测，信号传输到工作站，显示质谱数据q0Q1q2Q319ABChina©2008AppliedBiosystemsIonsourceMassanalyserGC/MS:EI,CIQuadrupoleLC/MS:ESI,APCI,APPIIontrapBiomolecules:MALDITimeofFlightTriplequadrupoleHybridMSSet-upofamassspectrometer：20ABChina©2008AppliedBiosystems样品引入方法●连续进样-提供准确的低流速。允许连续的样品引入以便仪器的调谐和优化。●分流进样-使用针泵和LC系统优化离子源和化合物参数。●流动注射进样(FIA)-没有柱子的情况下，使用LC高通量的优化离子源参数。●液相色谱-使用LC在宽的流速范围下，分离、分析混合物21ABChina©2008AppliedBiosystemsTripleQuadrupolesequenceofevents离子检测离子过滤离子运输离子产生离子过滤离子处理22ABChina©2008A