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第八章螺形菌螺形菌是一类菌体弯曲的细菌,包括弧菌属、弯曲菌属和螺杆菌属。主要致病菌有霍乱弧菌、空肠弯曲菌、幽门螺杆菌第一节弧菌属弧菌属细菌是一大群菌体短小,弯曲弧形的革兰阴性菌。菌体一端有单鞭毛,运动活泼,无芽胞,需氧或兼性厌氧,生长于碱性培养基上。本菌属共有36个种,广泛分布于自然界中,以水中最多。其中对人类有致病性的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌。一霍乱弧菌霍乱弧菌是引起烈性传染病霍乱的病原体,曾在世界上引起多次大流行,死亡率甚高,属于国际检疫传染病。霍乱弧菌分为古典生物型与Eltor生物型。(一)生物学性状1.形态与染色新分离菌株呈弧形或逗点状,人工培养后常呈杆状。无荚膜,无芽胞,单鞭毛,周身菌毛,运动活泼。取病人米泔水样粪便直接涂片染色镜检,可见细菌相互排列如“鱼群”状;悬滴观察可见细菌呈穿梭运动2.培养与生化反应培养该菌营养要求不高,需氧或兼性厌氧;耐碱不耐酸,在pH8.8-9.2的碱性环境中生长迅速。pH8.4的碱性蛋白胨水常用于增菌培养,其他细菌在此高pH培养基中不易生长。在碱性琼脂平板上培养24h,形成圆形、透明或半透明、表面光滑无色扁平的菌落在TCBS培养基上培养,菌落呈黄色,可作为霍乱弧菌选择性培养基生化反应该菌能发酵甘露醇及蔗糖,缓慢发酵乳糖,产酸不产气,形成靛基质,还原硝酸盐为亚硝酸盐,霍乱红(亚硝酸吲哚)反应阳性,氧化酶阳性,过氧化氢酶阳性不同生物型霍乱弧菌生化反应不同,鉴别可通过生化反应(如古典生物型VP试验阴性,而ELTor生物型为阳性)3.抗原结构与分型H抗原特异性低,为弧菌属所共有,H抗体无保护作用O抗原特异性高,根据O抗原不同,可将弧菌分为155个血清群。霍乱弧菌两种血清型均在O1群,可与O1诊断血清凝集。其余血清群霍乱弧菌虽然亦引起腹泻,但很少流行并不与O1诊断血清凝集,称为不凝集霍乱弧菌或非典型霍乱弧菌4.抵抗力霍乱弧菌对热及消毒剂抵抗力弱,55℃湿热15min即死亡。对酸的抵抗力更弱,在正常胃酸中仅能存活4min。在河水中能存活1-3w。对氯敏感,用漂白粉处理患者排泄物可达到消毒目的。ElTor生物型比古典生物型的抵抗力强二、致病性和免疫性(一)致病物质霍乱弧菌的致病作用主要是由细菌的粘附作用和产1.粘附作用霍乱弧菌进入小肠后依靠活泼的鞭毛运动,穿过肠粘膜表面的粘液层,有毒株产生的粘液素酶有液化粘液的作用,然后通过普通菌毛粘附于肠壁上皮细胞刷状缘的微绒毛上2.肠毒素(CE)是致腹泻中最强烈的毒素,是肠毒素的代表霍乱肠毒素的作用机制(二)所致疾病自然情况下,人类是霍乱弧菌的唯一易感者。摄入108-1010个细菌可造成感染,引起霍乱,传染源为患者及带菌者,通过污染的水源或食物经口摄入,突破胃酸屏障进入小肠致病临床表现病人产生严重的呕吐、腹泻。腹泻物呈米泔水样。由于体内水和电解质大量丧失,临床呈现严重的脱水、电解质紊乱和代谢性酸中毒。病人可因肾功能衰竭、休克而死亡。病后绝大多数患者可短期带菌,一般不超过2w。EITor弧菌感染者,带菌时间可达数月。病原菌主要存在于胆囊中霍乱病人脱水貌—眼窝深陷、皮肤弹性消失(三)免疫性霍乱弧菌感染后可获得牢固的免疫力,很少再次感染,此种病后免疫力包括血流中抗肠毒素抗体(IgM和IgG)及局部抗菌抗体(sIgA)。血清抗体一般在7-14d滴度达高峰,随后渐降,一般可持续3个月左右。肠道sIgA可阻止弧菌的粘附,并抑制细菌的侵袭和产生毒素。肠毒素抗体可阻断肠毒素与小肠上皮细胞上的GM1受体结合。各群之间无交叉免疫三、微生物学检查法霍乱是烈性传染病,对首例病人应快速、准确作出诊断,并及时作出疫情报告,迅速采取防治措施,扑灭疫情。流行期间一般可凭临床症状对大量病人做出诊断。但在条件许可时仍需进行微生物学检查1.直接镜检取米泔水样粪便作悬滴法检查,可见运动高度活泼的细菌,染色后为G-弧菌,鱼群状排列2.分离培养将粪便或呕吐物接种于碱性蛋白胨水或琼脂平板上培养。霍乱弧菌较其他细菌繁殖快,直接取可疑培养物涂片镜检、做生化反应及血清学凝集试验3.快速诊断可用荧光菌球检查法或SPA协同凝集试验检测霍乱弧菌四、防治原则加强检疫,及时检出病人,尽早隔离治疗,对患者及带菌者的粪便及呕吐物要进行消毒处理,防止污染水皮下接种死菌苗,可增强人群的特异性免疫力,但血清抗体持续时间较短,仅为3-6个月此外,B亚单位-全菌灭活口服疫苗、基因工程疫减毒活疫苗某些国家已批准使用治疗补充液体和电解质是治疗霍乱的关键,应用抗生素缩短排菌期,常用的抗生素有链霉素、氯霉素、庆大霉素等第二节副溶血性弧菌副溶血性弧菌是一种嗜盐性细菌,存在于近海岸的海水和鱼、贝类海产品中,具有致病性的菌株能引起人类食物中毒,是我国沿海地区最常见的一种食物中毒1、G-菌,常呈弧状、杆状、丝状等多形性,菌体一端有单鞭毛,营养要求不高,故在外界可长期生存。本菌特点嗜盐,在含3.5%-4.5%NaCl的培养基中最易生长,在无盐蛋白胨水中生长很差,甚至不生长。生长的pH范围是7.0-9.5,最适pH为7.72、绝大多数致病性副溶血性弧菌能产生溶血毒素使人或家兔的红细胞溶解。其溶血能力与该菌的致病力呈平行关系,而大多数非致病性菌株则无此毒素。该毒素也具有肠道毒性3、副溶血性弧菌引起的食物中毒经海产品及盐淹渍品传播,常见的为海蜇、蟹类、鱼、毛蚶等。食用被污染的食品后,经2-26h潜伏期后发病主要症状是腹痛、腹泻,呕吐及发热,粪便为水样或糊状,少数有血水样便或粘液血便。多发于夏秋季,病程较短,一般恢复较快病后免疫力不强,可重复感染,治疗可用抗菌药物,如庆大霉素等血水样便幽门螺杆菌(HP)1982年澳大利亚学者巴里·马歇尔(BarryJ.Marshall)和罗宾·沃伦(J.RobinWarren)二人从胃活检组织中首次分离出,因此获得2005年的诺贝尔生理学或医学奖。平均世界人口的50%被感染,发展中国家有些地区甚至达90%以上。幽门螺杆菌与萎缩性胃炎、胃、十二指肠溃疡和胃癌等疾病相关。形态结构G-,细长弯曲呈螺形。一端或两端有多根带鞘鞭毛,运动活泼有动力。鞭毛在定居中起锚住作用。一、生物学特性1.HP为微需氧菌,最适温度为37℃2.HP对湿度(85%以上)要求较高,营养要求较高需含血液才能生长,常用血琼脂培养基,经72h才长出菌落3.HP的菌落形态为圆形孤立的小菌落,无色半透明呈露滴状培养特性生化反应•HP生化反应不活跃,不能利用糖类。•HP具有大量高活力的胞外脲酶,故脲酶活性的测定可作为HP的快速诊断方法。•还能产生氧化酶、触酶、碱性磷酸酶、α-谷氨酰转肽酶、亮氨酸胺肽酶和DNA酶等。致病物质:鞭毛、尿素酶、粘附素、脂多糖和毒素二、致病性与免疫性所致疾病功能性消化不良慢性胃炎消化性溃疡胃癌胃淋巴瘤1994年世界卫生组织/国际癌症研究机构(WHO/IARC)将幽门螺杆菌定为Ⅰ类致癌原。经胃镜取活检组织,同时进行尿素酶试验、组织学检查及细菌培养是诊断感染的最可靠方法。未作胃镜检查者,可通过尿素[13C/14C]呼气试验、粪便幽门螺杆菌抗原检测和血清学试验检查。三、微生物学检查法快速脲酶试验是一种简便实用、快速敏感、较为准确可靠的诊断方法。脲酶试剂由尿素、基质、酚红指示剂等组成,将小块的活组织块放人装有尿素培养基瓶内,如培养基由黄变为红色为阳性,提示该菌脲酶已将尿素分解。13C或14C标记尿素呼吸试验病人禁食一夜,进食用13c或14c标记的尿素,HP产生的尿素酶分解脲素释放CO2,因此可测定病人呼吸中释放带有同位素的CO2量,如CO2含量超过标准,提示有HP存在该方法敏感性与特异性均好疫苗正在研制当中。治疗——三联疗法:抑酸剂或铋剂+两种抗生素。目前使用的抗生素有四环素、阿莫西林、甲硝唑、替硝唑、克拉霉素等。四、防治原则
本文标题:07.螺形菌
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