转基因-将外源目的基因通过载体转移到靶细胞内以补偿靶细胞的基因缺陷,调节靶细胞蛋白质的分泌水平

转基因-将外源目的基因通过载体转移到靶细胞内以补偿靶细胞的基因缺陷，调节靶细胞蛋白质的分泌水平转基因-将外源目的基因通过载体转移到靶细胞内以补偿靶细胞的基因缺陷，调节靶细胞蛋白质的分泌水平，使其获得新的生物学行为和功能。目前已广泛运用于细胞的基因改造，外源基因的导入方法很多，主要包括生物学载体法，机械法，化学法。学术术语来源---碱性成纤维细胞生长因子重组腺病毒转染兔骨髓间充质干细胞的表型变化文章亮点：1文章的创新性在于以重组腺病毒Ad.bFGF-eGFP转染骨髓间充质干细胞，观察转染后细胞形态、增殖速率及碱性成纤维细胞生长因子蛋白表达水平的变化，探讨转基因骨髓间充质干细胞作为组织工程韧带种子细胞的可行性。2实验结果提示碱性成纤维细胞生长因子重组腺病毒转染骨髓间充质干细胞可促进其向成纤维细胞分化，增加增殖活力。MOI值为50时进行转染效率最高，细胞毒性小，上清液中碱性成纤维细胞生长因子蛋白的表达水平在1周内较空病毒组及对照组明显升高，随着传代次数的增多，蛋白表达水平与空病毒组及对照组细胞差异性逐渐减小，此过程符合肌腱愈合的自然过程。关键词：干细胞；骨髓干细胞；碱性成纤维细胞生长因子；骨髓间充质干细胞；成纤维细胞；腺病毒；转染；863项目主题词：干细胞；间充质干细胞；成纤维细胞生长因子；酶联免疫吸附测定；转染摘要背景：外源性碱性成纤维细胞生长因子在韧带组织的愈合过程中发挥着重要作用，采用转基因方法将外源性基因转入细胞内能促进碱性成纤维细胞生长因子分泌。目的：观察碱性成纤维细胞生长因子重组腺病毒载体转染兔骨髓间充质干细胞后表型变化及碱性成纤维细胞生长因子蛋白的表达。方法：取P2代骨髓间充质干细胞，分为3组，正常培养组为对照组，其他2组分别转染重组腺病毒(Ad.bFGF-eGFP)及空病毒(Ad.eGFP)。相差显微镜观察各组细胞形态变化，MTT法测定细胞增殖曲线，ELISA法分析各组细胞上清液中碱性成纤维细胞生长因子蛋白质量浓度。结果与结论：转染后细胞呈现均一的成纤维细胞表型；碱性成纤维细胞生长因子重组腺病毒组细胞增殖活性高于空病毒组及对照组；ELISA结果提示碱性成纤维细胞生长因子重组腺病毒组在7d内上清液中碱性成纤维细胞生长因子蛋白质量浓度较空病毒组及对照组增加，差异有显著性意义(P0.05)。提示碱性成纤维细胞生长因子重组腺病毒转染骨髓间充质干细胞可促进其向成纤维细胞分化，增加增殖活力，促进其碱性成纤维细胞生长因子蛋白的表达。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程