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1选修三习题整理一基因工程(一)选择题1(99广东卷)下列哪一项属于克隆?DA.将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中B.将抗药菌的某基因引人草履虫的细胞内c.将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞D.将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系2(09浙江).下列关于基因工程的叙述,错误..的是DA.目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B.限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达3(08全国)已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点,如图中箭头所指,如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断,则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子,若在每个DNA分子上至少有一个酶切位点被该酶切断,则理论上讲,经该酶酶切后,这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是CA.3B.4C.9D.124(07广东卷)现有一长度为1000碱基对(by)的DNA分子,用限制性核酸内切酶EcoR1酶切后得到的DNA分子仍是1000by,用Kpn1单独酶切得到400by和600by两种长度的DNA分子,用EcoRI,Kpnl同时酶切后得到200by和600by两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是D5.β地中海贫血症是严重的常染色体隐性(a)遗传病,由β珠蛋白基因突变引起,患者2常因心力衰竭而死亡,目前此病尚无根治方法,仅能通过产前诊断来防患儿出生。某家庭夫妻均正常,已生下一患病女儿,为确定已怀孕的第2个孩子是否会再患此病,需提取每个人的DNA和羊水中胎儿细胞的DNA进行分析,图示为胎儿父亲及母亲染色体DNA经限制酶切割后的结果,其它的人切割结果如表,则胎儿的患病概率是D()DNA来源限制酶I处理后,含β珠蛋白基因的DNA片段长度限制酶II处理后,含β珠蛋白基因的DNA片段长度父亲2.2kb和2.0kb只有15.3kb母亲2.2kb和2.0kb15.3kb和13.5kb患病女儿2.2kb和2.0kb只有15.3kb胎儿2.2kb和2.0kb只有15.3kbA.0B.14C.12D.16基因芯片的测序原理是DNA分子杂交测序方法,它是通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法。先在一块基片表面固定序列已知的八核苷酸的探针,当溶液中带有荧光标记的靶核酸序列,与基因芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时,通过确定荧光强度最强的探针位置,获得一组序列完全互补的探针序列。据此可重组出靶核酸的序列TATGCAATCTAG(过程见图1)。若靶核酸序列与八核苷酸的探针杂交后,荧光强度最强的探针位置如图2所示,请分析溶液中靶序列为……………………………………………………………………………………(A)A.AGCCTAGCTGAAB.TCGGATCGACTTC.ATCGACTTD.TAGCTGAA(二)简答题1(07江苏)很久以前科学家在土壤中发现了某种细菌能制造一种对昆虫有毒的蛋白质,当3时许多人就想把编码这一蛋白质的基因(抗虫基因)转移到农作物中,以降低昆虫对农作物造成的危害。20世纪90年代,美国科学家采用基因工程技术首次培育出抗虫玉米新品种。下图为这一转基因玉米的主要培育过程。(1)获得特定目的基因的途径除了从该细菌中直接分离抗虫基因外,还可以▲。将目的基因与运载体结合时必须用▲酶和DNA连接酶。在基因工程中,常用的运载体有▲等,而作为运载体必须具备相应的条件,例如应具有▲以便进行筛选。(2)由转基因玉米细胞经过▲形成愈伤组织,然后发育成胚状体和试管苗。若要制备转基因玉米的人工种子,可选择上述实验过程中的▲再包裹合适的▲等。(1)人工合成同种限制质粒(或动植物病毒或噬菌体等)标记基因(2)脱分化(或去分化)胚状体人造种皮2.(09浙江)(18分)正常小鼠体内常染色体上的B基因编码胱硫醚γ—裂解酶(G酶),体液中的H2S主要由G酶催化产生。为了研究G酶的功能,需要选育基因型为B-B-的小鼠。通过将小鼠一条常染色体上的B基因去除,培育出了一只基因型为B+B-的雄性小鼠(B+表示具有B基因,B-表示去除了B基因,B+和B-不是显隐性关系),请回答:(1)现提供正常小鼠和一只B+B-雄性小鼠,欲选育B-B-雄性小鼠。请用遗传图解表示选育过程(遗传图解中表现型不作要求)。(2)B基因控制G酶的合成,其中翻译过程在细胞质的上进行,通过tRNA上的与mRNA上的碱基识别,将氨基酸转移到肽链上。酶的催化反应具有高效性,胱硫醚在G酶的催化下生成H2S的速率加快,这是因为。(3)右图表示不同基因型小鼠血浆中G酶浓度和H2S浓度的关系。B-B-个体的血浆中没有G酶而仍有少量H2S产生,这是因为。通过比较B+B+和B+B-个体的基因型、G酶浓度与H2S浓度之间的关系,可得出的结论是。4(2)核糖体发密码子G酶能降低化学反应活化能(3)①血压中的H2S不仅仅由G酶催化产生②基因可通过控制G酶的合成来控制H2S浓度3、(05江苏卷)(9分)在植物基因工程中,用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体.把目的基因重组人Ti质粒上的T-DNA片段中,再将重组的T-DNA插入植物细胞的染色体DNA中。(1)科学家在进行上述基因操作时,要用同一种分别切割质粒和目的基因,质粒的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过而黏合。(2)将携带抗除草剂基因的重组Ti质粒导入二倍体油菜细胞,经培养、筛选获得一株有抗除草剂特性的转基因植株。经分析,该植株含有一个携带目的基因的T-DNA片段,因此可以把它看作是杂合子。理论上,在该转基因植株自交F1代中,仍具有抗除草剂特性的植株占总数的,原因是。(3)种植上述转基因油菜,它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种,造成“基因污染”。如果把目的基因导人叶绿体DNA中,就可以避免“基因污染”,原因是。(9分(1)限制性内切酶碱基互补配对(2)3/4雌雄配子各有1/2含抗除草剂基因;受精时,雌雄配于随机结合(3)叶绿体遗传表现为母系遗传,目的基因不会通过花粉传递丽在下一代中显现出来4.(06江苏)基因工程又叫基因拼接技术。(1)在该技术中,用人工合成方法获得目的基因的途径之一是:以目的基因转录的为模板,成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成。(2)基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌、。若将真核基因在原核细胞中表达,对该目的基因的基本要求是。(3)假设以大肠杆菌质粒作为运载体,并以同一种限制性内切酶切割运载体与目的基因,将切割后的运载体与目的基因片段混合,并加入DNA连接酶。连接产物至少有种环状DNA分子,它们分别是。(1)信使RNA(mRNA)逆转录(反转录)双链DNA(目的基因)(2)动植物细胞除去内含子(3)3运载体自连的、目的基因片段自连的、运载体与目的基因片段相连的环状DNA分子5(08天津)30、(20分)Ⅰ、(10分)下图为人β-珠蛋白基因与其mRNA杂交的示意图,①-⑦表示基因的不同功能区。5据图回答:⑴上述分子杂交的原理是;细胞中β-珠蛋白基因编码区不能翻译的序列是(填写图中序号)。⑵细胞中β-珠蛋白基因开始转录时,能识别和结合①中调控序列的酶是。⑶若一个卵原细胞的一条染色体上,β-珠蛋白基因编码区中一个A替换成T,则由该卵原细胞产生的卵细胞携带该突变基因的概率是。⑷上述突变基因的两个携带者婚配,其后代中含该突变基因的概率是。Ⅰ、(10分)⑴碱基互补配对原则③和⑤⑵RNA聚合酶⑶1/4⑷3/46(08海南)(18分)图为某种质粒表到载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因,tctR为四环素抗性基因,P启动子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。据图回答:(1)将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别用EcoRI酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有、、三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒,需要对这些连接产物进行。(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是;(3)在上述实验中,为了防止目的基因和基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是。(18分)(1)目的基因—载体连接物载体--载体连接物目的基因--目的基因连接物分离纯化(每空2分,共8分)(其他合理答案也给分)(2)载体--载体连接物(2分);目的基因--载体连接物(1分)、载体--载体连接物(1分)(3)启动子mRNA(每空2分,共4分)(4)EcoRI和BamHI(2分)(只答一个酶不给分)7(9分)人体细胞内含有抑制癌症发生的P53基因,生物技术可对此类基因的变化进行检测。(1)目的基因的获取方法通常包括________和________。(2)上图表示从正常人和患者体内获取的P53基因的部分区域。与正常人相比,患者在该6区域的碱基会发生改变,在上图中用方框圈出发生改编的碱基对,这种变异被称为________。(3)已知限制酶E识别序列为CCGG,若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的P53基因部分区域(见上图),那么正常人的会被切成________个片段,而患者的则被切割成长度为________对碱基和________对碱基的两种片段。(4)如果某人的P53基因部分区域经限制酶E完全切割后,共出现170、220、290和460碱基对的四种片段,那么该人的基因型是________(以P+表示正常基因,Pn表示异常基因)。(9分)(1)从细胞中分离通过化学方法人工合成(2)见下图基因碱基对的替换(基因突变)(3)3460220PP8据图回答下列问题:(1)图中①~⑤所示的是生物工程为_________________。图中④过程中碱基互补配对方式有__________种。(2)基因表达载体中的_______________是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。在上述过程中,不能将日的基因直接导人受精卵中的原因是_______________,⑤过程中只用同一种限制酶切割含目的基因的DNA片段和运载体,将会______________________________(任答一点)。(3)若想预期蛋白质通过乳腺反应器生产,则在图中⑨过程之前要对精于进行筛选,保留含性染色体为____________的精子。在⑧、⑨过程中为避免多精人卵的两道屏障依次是______________________________、______________________________。(4)为获得较多的受精卵作为研究材料,图中⑥过程一般注射促性腺激素使供体7____________________________。为提高培育成功率,进行⑩过程之前,要对______________动物做________________处理。若图中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢,则在⑧之前须进行体外培养到________________期方能受精。9(9分)降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA,过程如下图。在此过程中发现,合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题:(1)Klenow酶是一种________酶,合成的双链DNA有________个碱基对。(2)获得的双链DNA经EcoRⅠ(识别序列和切割位点-G↓AATTC-)和BamHⅠ(识别序列和切割位点-G
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