超滤标准操作规程

长春长生生物科技股份有限公司企业标准文件编码总页数6起草人起草日期年月日审核人审核日期年月日批准人批准日期年月日执行日期年月日颁发部门生产管理部版本号印数甲型肝炎减毒活疫苗原液超滤SOP目的:为保证CUF-20型超滤器在生产过程中的使用达到规范化、标准化，特制定本操作规程。范围:本操作规程适用于CUF-20型超滤器超滤透析甲肝原液。职责:纯化组人员应严格按本标准操作程序的要求进行超滤操作。QA应监督检查本标准的实施效果。内容：1.操作前检查1.1工作环境的检查超滤操作应在万级环境的百级层流罩下进行，操作前应检查以下事项：1.1.1操作间处于清洁状态，无上次工作遗留物，无与本次操作无关的物品。长春长生生物科技股份有限公司企业标准文件名称：甲型肝炎减毒活疫苗原液超滤SOP执行日期文件编号：页码2/61.1.2操作间备有废弃物收集容器。1.1.3生产状态标识已挂好。1.1.4提前30分钟开启层流罩。1.2设备仪器运行检查1.2.1超滤器型号：CUF-20资产编号：01D002074厂家：美国密理博公司状态完好，备用。1.2.2蠕动泵型号：ZG60-600资产编号：01G001061厂家：保定兰格恒流泵有限公司。状态完好，备用。1.3物料及器具检查1.3.1透析液：核实批号、数量及有效期。1.3.20.1NNaOH：核实批号、数量及有效期。1.3.310倍浓缩199培养液、8.0%碳酸氢钠液：核实批号、数量及有效期。1.3.4待透析原液的确认:确认原液的批号及液量。1.3.50.1%新洁尔灭溶液或3%来苏儿溶液：经0.2um除菌过滤.核实批号及有效期。长春长生生物科技股份有限公司企业标准文件名称：CUF-20型超滤器SOP执行日期文件编号：页码3/61.3.610L瓶、桶盖、10号栓、100mL瓶、10mL吸管、钢瓶经0.105Mpa.121C60分钟湿热灭菌，核实数量及有效期。1.3.7超滤管道、分液管道、50L桶、20L桶经0.105Mpa.123C、90分钟湿热灭菌，核实数量及有效期。2.操作过程2.1启动蠕动泵，进液管道、回液管道、膜下排液管道用0.1NNaOH溶液循环30分钟。2.2管道连接：进液管道、回液管道、膜下管道和已灭菌的超滤管道无菌连接。膜下排液管道无菌放入回收桶中，将收集原液的管道放入20L桶内，用止血钳夹住，待收集原液备用。2.3冲洗膜2.3.1用另外20L0.1NNaOH冲洗膜包。2.3.2用透析液冲洗膜包：关闭部分回流阀门，打开膜下滤出阀门，用透析液冲洗膜包，至回流端和膜下的液体pH值呈中性。2.4取样：核对原液批号、液量，用10mL吸管取样至青瓶，抗原1mL，三氯甲烷残留量3mL，青瓶盖栓写标签待检。2.5透析：原液用透析液5-7倍稀释.将超滤器的进液管道放入透析液稀释后的原液瓶内，打开回液管道的止血钳，检查各连接管道连接是否正确，连接管道是否渗漏，各管道不要折皱，然后启动蠕动泵，调节泵速，使进液端压力控制在1.0bar-1.5bar，回流口端压力控制在长春长生生物科技股份有限公司企业标准文件名称：CUF-20型超滤器SOP执行日期文件编号：页码4/60.4bar-0.9bar之间。在透析过程中，不要停止蠕动泵，回液瓶中一定要确保原液收回量80%的液体在循环。2.5.1回收原液：当全部原液透析完之后，回流阀门全部打开，关闭膜下滤出阀，打开收集原液管道的止血钳，用199培养液将原液连续3次循环回收20L桶内，每次循环5分钟，泵速由慢至透析泵速：4升/分钟(收回透析原液量)。为确保病毒不损失，可再反复收集3次，关闭蠕动泵。(收集时也可适当浓缩，浓缩则透析时间短，则回收率高,。但是浓缩倍数过大则易导致病毒聚集，不易回收，影响收率。)2.5.2回收原液取样：用10mL吸管取样，抗原1mL、三氯甲烷残留量3mL、病毒滴度2mL、牛血清白蛋白残留量1mL、异常毒性15mL，盖栓写标签待检。将回收的原液用分液管道分至10L(或5L)钢瓶内，每个钢瓶做无菌检查、支原体检查。包好瓶口，放置-60C冰箱。2.6清洗超滤器：用灭菌注射用水冲洗膜，冲洗体积：膜包面积冲洗体积0.5㎡标准膜包10升3.膜包的完整性检测3.1首先确定系统已经清洗好。3.2将超滤系统内的水排空。3.3调节进口压力至规定压力。长春长生生物科技股份有限公司企业标准文件名称：CUF-20型超滤器SOP执行日期文件编号：页码5/63.4把回流口用阀门或其他方法封闭。3.5膜下排液管道口是开放的。3.6稳定超滤系统的规定压力5分钟让残留的水排走。3.7测量并记录气压、温度和从透液口出来的气体流量.气体流量可用气体流量计测量或用量筒测量(一定时间内在倒置的灌满水的量筒中有多少体积水被排走)充分湿润的完整的超滤膜的空气流量(毫升/分钟)膜分子量或孔径0.5m2标准膜包空气流量标准测试压力psi(bar)PLCTK3000018毫升/分钟10(0.68)PLCHK10000012毫升/分钟10(0.68)结果：测得的空气流量低于标准为合格，超过为不合格。4超滤器及膜包清洗、消毒、除热源：用0.1NNaOH循环。在循环过程中,反复关闭回流阀,排净气泡,确保所有的表面接触到NaOH。循环30分钟关闭。5清场5.1操作完成后,将用后物品装入废弃物收集容器内,移出操作室,送洗刷处理。5.2将操作间原有设备、工具经消毒剂擦拭干净,放回原处,确保各种设施运转正常，挂”备用”标识。长春长生生物科技股份有限公司企业标准文件名称：CUF-20型超滤器SOP执行日期文件编号：页码6/65.3洁净室清洁洁净室的工作台、凳、开关、插座、地面用浸湿消毒液的抹布擦拭。5.4上述过程检查合格后,操作室挂”已清洁”状态标识牌。5.5使用过的无菌服、抹布送洗衣间清洗。6过程分析超滤器、蠕动泵:状态良好,操作结果合乎预期。7变更记载:版本生效日期变更原因及目的12培训:培训部门:疫苗七室培训对象:CUF-20型超滤器使用人员培训时间:60分钟