生物分离与纯化技术模拟试卷七答案

生物分离与纯化技术模拟试卷七答案考试学科生物分离与纯化技术组、命题教师课题组考场考号考生班级系主任考生姓名装订线一、名词解释（每小题3分，共15分）1．沉降：是指当悬浮液静置时，密度较大的固体颗粒在重力的作用下逐渐下沉，这一过程成为沉降2．有机溶剂沉淀：在含有溶质的水溶液中加入一定量亲水的有机溶剂，降低溶质的溶解度，使其沉淀析出。3．分配层析：是根据在一个有两相同时存在的溶剂系统中，不同物质的分配系数不同而达到分离目的的一种层析技术。4．介电常数：表示介质对带有相反电荷的微粒之间的静电引力与真空对比减弱的倍数。5．有机酸沉析：含氮有机酸（如苦味酸和鞣酸等）能够与有机分子的碱性功能团形成复合物而沉淀析出。二、单选题（每小题1分，共15分）1．吸附色谱分离的依据是（A）。A、固定相对各物质的吸附力不同B、各物质分子大小不同C、各物质在流动相和固定相的分配系数不同D、各物质与专一分子的亲和力不同2．有机溶剂沉淀法中可使用的有机溶剂为（D）A.乙酸乙酯B正丁醇C.苯D.丙酮3．生物活性物质与金属离子形成难溶性的复合物沉析，然后适用（C）去除金属离子。A.SDSBCTABC.EDTAD.CPC4．吸附剂和吸附质之间作用力是通过（A）产生的吸附称为物理吸附。A.范德华力B库伦力C.静电引力D.相互结合5．洗脱吸附剂上附着的溶质，洗脱液的极性强弱关系为（A）A.石油醚﹤环己烷﹤四氯化碳B二氯甲烷﹤乙醚﹤四氯化碳C.乙酸乙酯﹤丙酮﹤氯仿D.吡啶﹤甲醇﹤水6．关于电泳分离中迁移率描述正确的是（A）A.带电分子所带净电荷成正比B分子的大小成正比C.缓冲液的黏度成正比D.以上都不对7．在什么情况下得到粗大而有规则的晶体（A）A.晶体生长速度大大超过晶核生成速度B晶体生长速度大大低于过晶核生成速度C.晶体生长速度等于晶核生成速度D.以上都不对8．恒速干燥阶段与降速干燥阶段，那一阶段先发生（A）A.恒速干燥阶段B降速干燥阶段C.同时发生D.只有一种会发生9．珠磨机破碎细胞，适用于（D）A.酵母菌B大肠杆菌C.巨大芽孢杆菌D.青霉10．酶提取液中，除所需酶外，还含有大量的杂蛋白、多糖、脂类和核酸等，为了进一步纯化，可用(E)方法除去杂质。A、调pH值和加热沉淀法B、蛋白质表面变性法C、降解或沉淀核酸法D、利用结合底物保护法除去杂蛋白E、以上都可以11．单宁沉析法制备菠萝蛋白酶实验中，加入1%的单宁于鲜菠萝汁中产生沉淀，属于(D)沉析原理。A盐析B有机溶剂沉析C等电点沉析D有机酸沉析12．超滤膜通常不以其孔径大小作为指标，而以截留分子量作为指标。所谓“分子量截留值”是指阻留率达（B）的最小被截留物质的分子量。A80%以上B90%以上C70%以上D95%以上13．从四环素发酵液中去除铁离子,可用（B）A．草酸酸化B．加黄血盐C．加硫酸锌D．氨水碱化14．超滤膜截留的颗粒直径为(B)A0.02～10µmB0.001～0.02µmC2nmD1nm15．按分离原理不同，电泳可分为（A）A区带电泳、自由界面电泳、等速电泳、等电聚焦电泳B纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、琼脂凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳C区带电泳、自由界面电泳、纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳D等速电泳、等电聚焦电泳、琼脂凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳三、判断题（每小题1分，共10分）1．常压干燥浓缩的缺点是设备投资及操作维护费用高，生产能力不太大。（×）2．冷冻干燥适用于高度热敏的生物物质。（√）3．溶剂的极性从小到大为丙醇＞乙醇＞水＞乙酸。（√）4．吸附剂氧化铝的活性与其含水量无关。（×）5．酸性、中性、碱性氨基酸在强碱性阴离子交换树脂柱上的吸附顺序是碱性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸（×）6．离子交换剂是一种不溶于酸、碱及有机溶剂的固态学分子化合物。（√）7．蛋白质变性后溶解度降低，主要是因为电荷被中和及水膜被去除所引起的。（×）8．高压匀浆法可破碎高度分枝的微生物。（×）9．离心是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异而实现分离的。（√）10．若两性物质结合了较多阳离子，则等电点pH降低。（×）题目得分评卷人一题目得分评卷人二题目得分评卷人三装订线四、填空题（每小题1分，共15分）1．晶体质量主要指（晶体大小），（晶体性状）和（晶体纯度）三个方面；2．根据分离机理的不同，色谱法可分为（吸附色谱），（离子交换色谱），（凝胶色谱），（分配色谱）和（亲和色谱）。3．蛋白质等生物大分子，在溶液中呈稳定的分散状态，其原因是由于（分子表面电荷）和（水化层）；4．影响有机溶剂沉淀的因素有（温度）、（pH）、（样品浓度）、（中性盐浓度）和（金属离子）。五、简答题（每小题7分，共35分）1．影响有机溶剂沉析的因素？（一）温度（二）生物样品的浓度（三）pH（四）离子强度（五）金属离子2．何时应用静态离子交换分离法？一般只是在试探性实验、测定交换平衡常数、某些交换动力学的研究、交换分配系数的测定、络合物离解常数的测定、滴定曲线的研究、某些催化反应的试探性研究、除去盐溶液中过剩的酸和碱、吸附溶液中所含的高分子量物质等方面可能用到。此外还用于不适合用柱进行操作的离子交换分离，如溶液粘度太大、含有悬浮固体及在反应时放出气体会造成沟流或堵塞管柱；或者是含有碳酸盐、亚硫酸盐、硫化物的溶液与氢型阳离子柱交换时；以及某些交换速度较慢、交换要求在一步完成的等条件下，还是可以采用的。3．疏水柱层析分离原理？亲水性蛋白质（酶）表面均含有一定量的疏水性基团。尽管在水溶液中蛋白质（酶）具有将疏水性基团折叠在分子内部而表面显露极性和荷电基团的趋势，但总会有一些疏水性基团或极性基团的疏水部位暴露在蛋白质（酶）表面。这部分疏水基团可与亲水性固定相表面偶联的短链烷基、苯基等弱疏水基会发生疏水性相互作用，被固定相（疏水性吸附剂）所吸附。4．影响电泳分离的主要因素？1、大分子的性质2、电场强度3、溶液的pH4、溶液的离子强度5、电渗6、温度7、支持物的影响5．简述中药有效成分常用的提取、分离方法。提取方法：溶剂提取法、水蒸气蒸馏法、超临界流体萃取法。分离方法：溶剂法包括酸碱溶剂法、溶剂分配法，沉淀法包括专属试剂沉淀法、分级沉淀法、盐析法、结晶法、分馏法、膜分离法、升华法、色谱法。六、案例分析题（共10分）生物药物在生产制备中的特殊性有哪些?主要有哪些制造方法?生物药物是以生物材料为原料制取的。其制造技术具有下列特点。①目的物存在于组成非常复杂的生物材料中。②有些目的物在生物材料中含量极微，因此分离纯化步骤多，难以获得高收率。③生物活性成分离开生物体后，易变性破坏，分离过程必须十分小心，以保护有效物质的生物活性。④生物药物制造工艺几乎都在溶液中进行，各种理化因素和生物学因素(如温度、pH、离子强度)对溶液中各种组分的综合影响常常难以确定，以致许多工艺设计理论性不强，实验结果常带有很大经验成分。⑤为了保护目的物的活性及结构完整性，生物制药工艺多采用温和的“多阶式”方法，即“逐级分离”法。因此工艺流程长，操作繁琐。⑥生物药物的均一性检测与化学上的纯度概念不完全相同。由于生物药品对环境变化十分敏感，结构与功能关系多变复杂，因此对其均一性的评估常常是有条件的，或者只能通过不同角度测定，最后才能给出相对“均一性”结论。生物药物分离制备方法的主要依据原理有两方面。①根据不同组分分配率的差别进行分离。②根据生物大分子的特性采用多种分离手段交互进行，分离纯化的主要方法有：a．根据分子形状和分子大小不同的分离方法；b．根据分子电离性质(带电性)不同的分离方法；c．根据分子极性大小与溶解度不同的分离方法；d．根据配基特异性不同的亲和色谱分离法。精制一个具体生物药物，常常需要根据它的多种理化性质和生物学特性，采用多种分离方法有机结合，才能达到预期目的。题目得分评卷人四题目得分评卷人五题目得分评卷人六