生物实验中试剂的作用及实验方法总结

生物实验中试剂的作用及实验方法总结一．化学物质的检测方法①淀粉——碘液(蓝色)②还原性糖——斐林试剂\班氏试剂(砖红色)③CO2——Ca(OH)2溶液(澄清石灰水变浑浊)④乳酸——pH试纸⑤O2——余烬复然⑥蛋白质——被蛋白酶水解、双缩脲试剂(紫红色)⑦脂肪——苏丹Ⅲ染液(橘黄色）、苏丹Ⅳ染液(红色）⑧DNA——二苯胺(蓝色)⑨染色体——龙胆紫溶液，醋酸洋红溶液二．实验条件的控制方法1、加水中氧气——泵入空气或吹气或放入绿色植物2、减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水3、除去容器中CO2——NaOH溶液4、除去叶中原有淀粉——置于黑暗环境5、除去叶中叶绿素——酒精水浴加热6、除去光合对呼吸干扰——给植株遮光7、如何得到单色光——棱镜色散或透明薄膜滤光8、血液抗疑——加入柠檬酸钠9、线粒体提取——细胞匀浆离心10、骨无机盐的除去——盐酸溶液11、灭菌方法——培养基用高压蒸汽灭菌；接种环用火焰灼烧灭菌；双手用肥皂冼净，擦干后用75%酒精消毒；实验室或接种箱用甲醛蒸汽或紫外灯灭菌；整个过程都在实验室无菌区或酒精灯旁进行。三．实验结果的显示方法①光合速度——O2释放量或CO2吸收量或有机物生成量◆水生植物可依气泡的产生量或产生速率；◆离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目；◆植物体上的叶片可依指示剂（如碘液）处理后叶片颜色深浅。②呼吸速度——O2吸收量或CO2释放量或有机物消耗量③原子或分子转移途径——放射性同位素示踪④细胞液浓度大小——质壁分离⑤植物细胞是否死亡——质壁分离⑥甲状腺激素—动物耗氧量,发育速度等⑦生长激素—生长速度(体重、体长变化)⑧胰岛素作用—动物活动状态⑨菌量—菌落数，亚甲基蓝褪色程度四．实验中控制温度的方法1、还原糖，DNA鉴定——沸水浴加热2、酶促反应——水浴保温3、用酒精溶解叶中的叶绿素——酒精要隔水加热、4、细胞和组织培养以及微生物培养——恒温箱培养五、实验中常用器材和药品的使用1、NaOH：用于吸收CO2或改变溶液的pH2、Ca(OH)2：鉴定CO23、CaCl2提高细菌细胞壁的通透性4、HCl：解离或改变溶液的pH5、NaHCO3：提供CO26、NaCl：配制生理盐水或用于提取DNA7、琼脂：激素或其他物质的载体或培养基的凝固剂8、亚甲基蓝：用于检测污水的细菌含量9、酒精：用于消毒、提纯DNA、叶片脱色及配制解离液10、蔗糖：测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原、作为碳源和能源物质11、滤纸：过滤或纸层析12、纱布、尼龙布：过滤，遮光13、龙胆紫溶液或醋酸洋红：碱性染料，用于染色体染色14、柠檬酸钠——血液抗凝剂六、一些常见的实验方法⑴、根据颜色来确定某种物质的存在：淀粉+I2(蓝色)；还原性糖+斐林试剂(砖红色)；脂肪+苏丹Ⅲ(橘黄)或+苏丹Ⅳ(红色)；蛋白质+双缩脲试剂(紫色)；大肠杆菌+伊红和美蓝(菌落为深紫色，有金属光泽)⑵、用颜色标记法来确定原肠胚三个胚层的分化情况。⑶、用荧光标记法来证明细胞膜具有一定的流动性⑷、同位素示踪法：光合作用产生氧气的来源；光合作用中二氧化碳的去向；噬菌体侵染细菌实验证明DNA是遗传物质，蛋白质不是遗传物质；DNA的复制是半保留复制。⑸、确定某种元素为植物生长必需的元素的方法:水培法(完全培养液与缺素完全培养液对照)⑹、获得无籽果实的方法:用适宜浓度的生长素处理花蕾期已去雄的子房，如无籽蕃茄、诱导染色体变异，如无籽西瓜。⑺、确定某种激素功能的方法：饲喂法，切除注射法，阉割移植法，切除口服法。⑻、确定传入、传出神经的功能：刺激+观察效应器的反应或测定神经上的电位变化。⑼、植物杂交的方法雌雄同花：花蕾期去雄+套袋+开花期人工授粉+套袋雌雄异花：花蕾期雌花套袋+开花期人工授粉+套袋⑽、确定某一显性个体基因型的方法：测交；该显性个体自交。⑾、确定某一性状为显性性状或隐性性状的方法：具有一对相对性状的纯合体的杂交自交，观察后代是否有性状分离。⑿、确定某一个体是否具有抗性基因的方法：确定小麦是否具有抗锈病基因，用锈病菌去侵染，一段时间后，观察有无锈斑出现。⒀、鉴定血型的方法：用标准血清与待测血型混合，在显微镜下观察血液的凝集情况。⒁、育种的方法：杂交育种；人工诱变育种；单倍体育种；基因工程育种；细胞工程育种;多倍体育种等。⒂、测定种群密度的方法：样方法；标志重捕法⒃、生态瓶的制作方法；瓶必须透明，且封闭⒄、分离微生物的方法：平板划线法；用选择培养基培养(如：圆褐固氮菌的分离，金黄色葡萄球菌的分离，细菌和酵母菌的分离)⒅、测定微生物群体生长的方法：测定细菌的数目---显微计数测定细菌的重量---取一定体积的培养基，经离心分离，反复洗涤后，称湿重，或烘干后称干重。七、实验研究方法1、显微观察法如观察植物细胞有丝分裂的实验，观察植物细胞质壁分离和复原的实验。2、观察法观察微生物的外在性状和表现等，如观察注射了甲状腺激素的小狗的活动状况，观察动物的毛色和植物花色的遗传实验等。3、同位素示踪法如噬菌体侵染细菌的实验，用18O和14C追踪光合作用中氧原子和碳原子转移途径的实验等。4、加法创意如用饲喂法研究甲状腺激素的实验、用注射法研究生长激素的实验，用移植法研究性激素的实验等。5、减法创意如用阉割法、摘除法研究性激素、甲状腺激素、生长激素的实验，雌蕊授粉后除去发育着的种子实验等。6、杂交实验法如孟德尔发现遗传定律的植物杂交、测交的实验，小麦的杂交实验等。7、化学分析法如番茄和水稻对Ca和Si选择吸收的实验，叶绿体中色素的提取和分离实验等。8、理论分析法如大小草履虫竞争的实验，植物根向地生长、茎背地生长的实验，植物向光性的实验等。9、模拟实验法如渗透作用的实验装置，分离定律的模拟实验等。七、实验技术1、光学显微镜的使用适用于观察生物的微观结构，如细胞的结构，包括光镜下可看到的各种细胞器。2、临时装片、切片和涂片的制作技术适用于显微观察，凡需在显微镜下观察的生物材料，必须先制成临时装片、切片或涂片。如“观察植物细胞的质壁分离和复原的实验”中要制作洋葱表皮的临时装片，在生物组织中脂肪的鉴定中要制作花生种子的切片等。3、研磨和过滤技术适用于从生物组织中提取物质，如酶、色素等。研磨时要先将生物材料切碎，然后加入研磨剂〈常用SiO2〉、提取液及其他必要物质，充分研磨后，往往要进行过滤，以除去滤渣，所用过滤器具则根据需要或或根据试题中提供的器材加以选用，如可用滤纸、纱布、脱脂棉、尼龙布等。4、解离技术用于破坏细胞壁，分散植物细胞，制作临时装片。5、恒温技术适用于有酶参加的生化反应，一般用水浴或恒温箱。根据题目要求选用。6、纸层析技术适用于溶液中物质分离。重要步骤包括制备滤纸条、画滤液细线、层析分离。7、根尖培养技术观察植物根尖有丝分裂的实验8、溶液培养法探究植物必需的矿质元素的实验，〈拓展——微生物生长因子的判断的实验〉；植物的无土栽培〈注意溶液浓度和溶解氧〉。