消毒剂效力及有效期验证方案

WYETHPHARMACEUTICALCO.LTD.惠氏制药有限公司QualificationofDisinfectantEffectivenessandStabilityTMP-07-077Page1of8TESTMETHODVALIDATIONPROTOCOL分析方法验证方案方案编号(版本号:):ProtocolNo.(Version:):(V:)TMP-07-077分析方法名称TESTMETHOD:QUALIFICATIONOFDISINFECTANTEFFECTIVENESSANDSTABILITY消毒剂效力及有效期确认方案WYETHPHARMACEUTICALCO.LTD.惠氏制药有限公司QualificationofDisinfectantEffectivenessandStabilityTMP-07-077Page2of8PROTOCOLAPPROVALPAGE方案批准页PROTOCOLPREPARATION方案准备WYETHPHARMACEUTICALCO.,LTD.惠氏制药有限公司SIGNATURE签名DATE日期QCMicrobialAnalystQCMicrobialAnalystPROTOCOLREVIEW方案复核QCSeniorAnalystQCManagerQAValidationOfficerPROTOCOLAPPROVAL方案批准SeniorQOManagerWYETHPHARMACEUTICALCO.LTD.惠氏制药有限公司QualificationofDisinfectantEffectivenessandStabilityTMP-07-077Page3of8PROTOCOLREVISIONHISTORYPAGE方案修订历史记录页REVISIONNUMBER修订次数VERSION版本号REVISIONCONTENT修订内容01Original原稿WYETHPHARMACEUTICALCO.LTD.惠氏制药有限公司QualificationofDisinfectantEffectivenessandStabilityTMP-07-077Page4of81.目的PURPOSE..........................................................................................................................................52.范围SCOPE...............................................................................................................................................53.引言INTRODUCTION................................................................................................................................54.参考资料REFENRENCE...........................................................................................................................65.验证方法TESTMETHOD..........................................................................................................................65.1.所用仪器和物料..........................................................................................................................................65.2.测试工作菌种..............................................................................................................................................65.3.实验程序.....................................................................................................................................................66.接受标准.....................................................................................................................................................86.1.消毒效力接受标准：...................................................................................................................................86.2.中和效力控制及其接受标准：.....................................................................................................................8WYETHPHARMACEUTICALCO.LTD.惠氏制药有限公司QualificationofDisinfectantEffectivenessandStabilityTMP-07-077Page5of81.目的PURPOSE验证惠氏苏州工厂目前使用的几种消毒剂ProcessLpHse:酸性、ProcessVespheneⅡse:碱性、Ethanol酒精溶液、快活溶液，在不锈钢、橡胶、瓷砖、玻璃、塑料门帘、墙面等不同材质上的消毒效力，同时验证消毒剂的使用有效期。2.范围SCOPE本验证需要验证的消毒剂有：ProcessLpHse:(酸性)、ProcessVespheneⅡse:(碱性)、Ethanol酒精溶液、快活溶液FORWARDdisinfectant四种。表1：各消毒剂使用时涉及的材质消毒剂类型适用对象所涉及的材质ProcessLpHse:酸性酚类消毒剂（广谱、中效）生产设备/器具/车间地面、墙壁、天花板不锈钢、橡胶、瓷砖、玻璃、塑料门帘、墙面ProcessVespheneⅡse:碱性酚类消毒剂（广谱、中效）车间设备/器具/操作间地漏不锈钢、橡胶、瓷砖、玻璃、塑料门帘、墙面Ethanol酒精溶液醇类消毒剂（中效）生产设备/器具/微生物实验室不锈钢、橡胶、瓷砖、玻璃、塑料门帘、墙面快活溶液季铵盐类消毒剂（低效）车间地面、墙壁、天花板/非控制区域、车间公用区不锈钢、橡胶、瓷砖、玻璃、塑料门帘、墙面3.引言INTRODUCTION本验证的原理是，在某种材质表面接种0.1ml(104-105CFU)的菌种，室温下自然风干后，将消毒剂直接喷在材质表面，等消毒剂作用一段时间后，检验没有被杀灭的细菌数；根据细菌被杀灭的数量，来判断消毒剂的杀菌效果。实际消毒操作时，消毒剂喷到要消毒物体表面后，再通过人为的涂擦等操作使消毒剂与物体表面充分接触，同时，此操作也会机械去除掉一部分微生物。在该验证中，消毒剂是喷到材质表面，这种方法要比实际消毒时的效果差，因此验证的结果更能体现实际的消毒效果。WYETHPHARMACEUTICALCO.LTD.惠氏制药有限公司QualificationofDisinfectantEffectivenessandStabilityTMP-07-077Page6of84.参考资料REFENRENCEDisinfectantEffectivenessStudy（812-AnalyticalReport-0807-1.0）SOPTS-35(V5)5.验证方法TESTMETHOD5.1.所用仪器和物料所用培养皿、移液管、容器均在121度下灭菌30分钟后使用无菌一次性培养皿，移液管。生物安全柜(BHC-1300ⅡA/B3生物安全柜)工作窗口吸入风速为≥0.5m/s灭菌锅培养箱（25度和32度各一个）5.2.测试工作菌种大肠埃希菌（CMCC(B)44102）菌种斜面金黄色葡萄球菌（CMCC(B)26003）菌种斜面白色念珠菌（CMCC98001）菌种斜面环境菌种科氏葡萄球菌斜面（六、九、十月环境检测沉降菌平板上连续检出科氏葡萄球菌，特选此菌为环境菌种）需验证的消毒剂应质量合格并在有效期即将结束时开始验证试验，实验所用的仪器设备均在校正合格期限内。5.3.实验程序5.3.1.消毒剂的配置：消毒剂按照相关的程序进行稀释，配置好的消毒剂溶液储存在实际操作时使用的喷壶中，在有效期内（7天）每天模拟日常使用方法使用，第8天开始验证试验。消毒剂配置方法及消毒反应时间见表2.5.3.2.材质的准备：所需的材质均是在实际操作中消毒剂所消毒的表面材质，准备的材质需为无菌材质，在实验过程中，每个实验组需3块同种材质同时进行。WYETHPHARMACEUTICALCO.LTD.惠氏制药有限公司QualificationofDisinfectantEffectivenessandStabilityTMP-07-077Page7of8表2.消毒剂配置方法及消毒反应时间消毒剂稀释比例反应时间菌种ProcessLpHse:酸性1:256(v/v)3,5,10minutes大肠埃希菌金黄色葡萄球菌白色念珠菌科氏葡萄球菌ProcessVespheneⅡse:碱性1:128(v/v)3,5,10minutes大肠埃希菌金黄色葡萄球菌白色念珠菌科氏葡萄球菌Ethanol酒精溶液75%2,3,5minutes大肠埃希菌金黄色葡萄球菌白色念珠菌科氏葡萄球菌快活溶液1:10(v/v)3,5,10minutes大肠埃希菌金黄色葡萄球菌白色念珠菌科氏葡萄球菌5.3.3.菌悬液的制备：取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌及环境菌种科氏葡萄球菌的营养琼脂斜面培养物，接种至营养琼脂斜面上，在35~37℃培养20~22小时。再接种上述菌种的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，在35~37℃培养18~24小时，上述营养肉汤培养物用0.9%无菌生理盐水溶液逐级10倍稀释，制成每0.1ml含菌落数104-105CFU的菌悬液。5.3.4.实验操作：准备3块待测表面材质于生物安全柜内，分别吸取0.1ml(104-105CFU)接种于3块待测表面材质上，让其在生物安全柜中自然风干后待测，将配置好的的消毒装入喷壶中，均匀地喷洒在材质的表面后立即开始计时，按表2等计时结束后，迅速把该材质放入100ml的D/E中和液中，充分振荡1min后经0.45微米的滤膜过滤，用100ml/次的D/E中和液冲洗3次，取滤膜放在D/E中和琼脂平板上培养。培养条件：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌及环境菌种科氏葡萄球菌在30-35℃，至少3天，重复以上实验操作3次，完成验证实验。WYETHPHARMACEUTICALCO.LTD.惠氏制药有限公司QualificationofDisinfectantEffectivenessandStabilityTMP-07-077Page8of85.3.