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2011级微生物学复习题一、名词解释柯赫法则:又称证病律,通常是用来确定侵染性病害病原物的操作程序。纯培养:微生物学中把从一个细胞或一群相同的细胞经过培养繁殖而得到的后代,称纯培养。富集培养:指从微生物混合群开始,对特定种的数量比例不断增高而引向纯培养的一种培养方法。芽孢:某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体,称为芽孢。偶译“内生孢子”。伴孢晶体(parasporalcrystal):少数芽孢杆菌,例如苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)在其形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体——δ内毒素,称为伴孢晶体。接合孢子:是由菌丝生出的结构大小相似、形态相同或略有不同两个配子囊接合后发育而成。锁状联合:为两核细胞形成分裂产生双核菌丝体的一种特有形式。常发生在菌丝顶端,开始时在细胞上产生突起,并向下弯曲,与下部细胞连接,形如锁状。溶源性细菌:细胞中含有以原噬菌体状态存在的温和噬菌体基因组的细菌称做溶源性细菌。蚀斑(plaque):若标本经过适当稀释进行接种并辅以染色处理,病毒可在培养的细胞单层上形成肉眼可见的局部病损区域,即蚀斑(plaque)或称空斑。一步生长曲线:定量描述毒性噬菌体生长规律的实验曲线称为一步生长曲线。鉴别培养基:用于鉴别不同类型微生物的培养基,特定的化学反应,产生明显的特征性变化,根据这种特征性变化,可将该种微生物与其他微生物区分开来。基团转位:是一种特殊的主动运输,与普通的主动运输相比,营养物质在运输的过程中发生了化学变化(糖在运输的过程中发生了磷酸化)。初级主动运输:质子泵执行的主动运输。次级主动运输:又称为继发性主动转运、联合转运。某种物质能够逆浓度差进行跨膜运输,但是其能量不是来自于ATP分解,而是由主动转运其他物质时造成的高势能提供,这种转运方式称为继发性主动转运。分批培养:将微生物置于一定容积的定量的培养基中培养,培养基一次性加入,不再补充和更换,最后一次性收获。连续培养:在微生物培养的过程中,不断地供给新鲜的营养物质,同时排除含菌体及代谢产物的发酵液,让培养的微生物长时间地处于对数生长期,以利于微生物的增殖速度和代谢活性处于某种稳定状态。二次生长:两种营养同时存在时,微生物首先利用其中较易利用的营养,进入稳定期后,经过短暂的适应,开始利用第二种营养物二次生长。恒浊培养:通过调节培养物流出的速度使培养物的浊度保持恒定的连续培养方式。恒化培养:通过流加方式,及时补充微生物所消耗的营养物质,使培养室中的营养物浓度基本恒定。有氧呼吸:是以分子氧作为最终电子(或氢)受体的氧化过程;是最普遍、最重要的生物氧化方式。无氧呼吸:以无机氧化物中的氧作为最终电子(和氢)受体的氧化作用。发酵(作用):在生物氧化中发酵是指无氧条件下,底物脱氢后所产生的还原力不经过呼吸链传递而直接交给一内源氧化性中间代谢产物的一类低效产能反应。在发酵工业上发酵是指任何利用厌氧或好氧,微生物来生产有用代谢产物的一类生产方式。硝酸盐呼吸:以硝酸盐作为最终电子受体的生物学过程,也称为硝酸盐的异化作用。反硝化作用:有些菌可将NO2进一步将其还原成N2,这个过程称为反硝化作用。亚硝化细菌:将氨氧化为亚硝酸并获得能量。诱导:是酶促分解底物或产物诱使微生物细胞合成分解代谢途径中有关酶的过程。阻遏:是阻碍代谢过程中包括关键酶在内的一系列酶的合成的现象,从而更彻底地控制和减少末端产物的合成。操纵子:是基因表达和控制的一个完整单元,其中包括结构基因,调节基因,操作子和启动子。反馈抑制:是指代谢的末端产物对酶(往往是代谢途径中的第一个酶)活性的抑制。代谢互锁:表面完全不相关的两条途径之间的调节。这种作用一般在高浓度下才显示,且为部分抑制。优先合成:在分支合成途径中,分支点后的两种酶竞争同一种底物,如AMP与GMP,Thr与Lys、Met,由于两种酶对底物的Km值(即对底物的亲和力)不同,故两条支路的一条优先合成。条件致死突变型:突变后的菌体在某些条件下,可以生存,但在另一些条件下则发生死亡。质粒:细菌染色体外的共价闭合环状双链DNA分子.分子量约为2—100×10^6D.携带1—100个基因,一个菌细胞可有一至数十个质粒。F因子:致育因子,又称F质粒,其大小约100kb,这是最早发现的一种与大肠杆菌的有性生殖现象(接合作用)有关的质粒。基因突变:一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变。局限性转导:温和噬菌体λ裂解时的不正常切割:包含gal或bio基因。流产转导:转导DNA不能进行重组和复制,但其携带的基因可经过转录而得到表达。溶源转变(lysogenicconversion):温和噬菌体感染细胞后使之发生溶源化,因噬菌体的基因整合到宿主染色体上,而使后者获得了新性状的现象。Ames试验:用细菌突变来检测环境中存在的致癌物质的一种快速、简便的方法。共生:两种微生物共同生活在一起时,相互依赖,彼此有利,甚至形成特殊的共生体,它们在生理上表现出一定的分工,在组织和形态上产生了新的结构。拮抗:两种微生物生活在一起,其中一种能产生某种特殊的代谢产物或改变环境条件,从而抑制甚至杀死另一种微生物的现象。活性污泥:由活性细菌、原生动物和其它微生物与污废水中有机和无机固形物混凝交织在一起形成的絮状体。在污水处理过程中具有很强的吸附和分解有机物和毒物的能力。三域(原界)学说:20世纪70年代末由于美国伊利诺斯大学的C.R.Woese(伍斯)等人对大量微生物和其他生物进行16s和18srRNA的寡核苷酸测序,并比较其同源性水平后,提出了一个与以往各种界级分类不同的新系统,称为三域学说,“域”是一个比界更高的界级分类单元,过去曾称原界。三个域指的是细菌域(以前称“真细菌域”)、古生菌域(以前称古细菌域)、和真核生物域。双名法:由二个拉丁字或希腊字或拉丁化了的其它文字组成,一般用斜体表示:学名=属名+种名+(首次定名人)+现定名人+定名年份。二、微生物的拉丁文菌名,并了解该菌种的一种工业用途。大肠埃希氏菌(Escherichiacoli):大肠杆菌能作为宿主供大量的细菌病毒生长繁殖。醋酸杆菌(Acetobacter):醋是由醋酸杆菌发酵产生的。产氨短杆菌(Brevibacteriumammoniagenes):发酵生产核苷酸类产物(ATP、IMP、NAD、辅酶、FAD等)。北京棒杆菌(Corynebacterumpekinese):味精生产中使用的主要菌种。丙酮丁醇梭菌(Clostridiumacetobutylcum):在玉米粉培养液中生长旺盛,可产生大量的丙酮、丁醇和乙醇(3:6:1,W/W)等溶剂,故是重要的工业发酵菌种。黄色短杆菌(Brevibacteriumflavum):发酵生产各种氨基酸。德氏乳杆菌(Lactobacillusdelbrukii):酸奶、干酪。枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis):生产淀粉酶、蛋白酶、5’-核苷酸酶、某些氨基酸及核苷。运动发酵单孢菌(Zymomonasmobilis):通过ED途径产生乙醇。地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis):产生的蛋白酶能够承受高pH值的环境(如洗衣粉)。双歧杆菌(Bifidobacteriumspp.):乳制品或微生态制剂。链霉菌属(Streptomyces):抗生素主要由放线菌产生,而其中90%由链霉菌属产生。诺卡氏菌属(Nocardia):能生产的抗生素。酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae):酿造饮料酒和制作面包、酒精发酵。根霉(Rhizopus):能产生一些酶类,如淀粉酶、果胶酶、脂肪酶等,是生产这些酶类的菌种。毛霉(Mucar):能产生蛋白酶,具有很强的蛋白质分解能力,多用于制作腐乳、豆豉。黑曲霉(Aspergillusniger):制淀粉酶(α-淀粉酶和糖化型淀粉酶)。米曲霉(Aspergillusoryzae):大豆发酵食品(酱油、豆酱等)。产黄青霉(Penicilliumchrysogenum):产黄青霉。三、复习重点问题绪论1.十九世纪哪两个焦点问题的争论促使了微生物学的诞生?巴斯德的贡献?柯赫的贡献?问题之一:微生物能不能自发产生;问题之二:传染病的性质是什么。1发现并证实发酵是由微生物引起的;2彻底否定了“自然发生”学说:著名的曲颈瓶试验。1.证实了炭疽病菌是炭疽病的病原菌2.发现了肺结核病的病原菌;3.科赫原则。2.什么是微生物?工业微生物的种类?微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物,个体微小,结构简单,通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚的生物,统称为微生物。主要包括五大类:(1)病毒一非细胞型生物;(2)细菌一单细胞(原核);(3)放线菌一单细胞(原核):(4)酵母菌一单细胞真菌(真核):(5)霉菌一单或多细胞真菌(真核)。此外还有:(1)蓝细菌(蓝绿藻)——原核微生物,单细胞或细胞聚合物(2)支原体、立克次氏体、衣原体——单细胞,介于病毒与细菌之间(原核):(3)单细胞藻类——可归于植物界(微细藻类)(4)原生动物——单细胞,可归于动物界。3.微生物特点有哪些?体积小,面积大;吸收多,转化快;生长旺,繁殖快;适应强,易变异;分布广,种类多。4.1977年,美国CarlWoese利用16SrRNA建立分子进化树,提出三原界(或三总界)系统(古细菌原界Archaebacteria、真细菌原界Eubacteria、真核生物原界Eucaryotes),并提出古生菌是不同于细菌和真核生物的特殊类群。微生物的纯培养和显微技术1.纯培养技术是进行微生物学研究的基础!2.高压蒸汽灭菌锅的注意事项。在灭菌过程中,应注意排净锅内冷空气,锅内冷空气如排放不净,会影响灭菌效果,达不到彻底灭菌的目的。由于高压蒸汽灭菌时,要使用温度高达120℃、两个大气压的过热蒸汽,操作时,必须严格按照操作规程操作,否则容易发生意外事故。3.接种操作需要在火焰附近(酒精灯、煤气灯)进行。4.微生物纯种分离的原理和方法原理:把特定微生物从混杂的微生物群体中分离出来,获得只含有某种或某一株微生物纯培养的过程称为微生物的纯种分离。要获得某微生物的纯培养物,可根据该微生物的特性,设计出只利于此菌生长而不利于他菌生长的条件(含培养基组分和培养条件),大量淘汰其他杂菌。再通过各种稀释法,使它们在固体培养基上单独长成菌落。从微生物群体中经分离而生长在平板上的单个菌落并不能保证一定是纯培养,还要经过一系列的分离、纯化和坚定方能确定。(1)用固体培养获得纯培养:平板涂布分离法(SpreadPlate)、稀释倒平板法、平板划线分离法(StreakPlate)、稀释摇管法(厌氧培养法)(2)用液体培养获得纯培养:将待分离的样品进行连续稀释得到高度稀释的效果,如果经过稀释后的大多数试管中没有微生物生长,那么有微生物生长的试管得到的培养物可能就是由一个微生物个体繁殖而来的纯培养物.这种方法适合于细胞较大的微生物.(3)单细胞(单孢子)分离法:毛细管法:用毛细管提取微生物个体,适合于较大微生物。显微操作仪:用显微针、钩、环等挑取单个细胞或孢子以获得纯培养。小液滴法:将经过适当稀释后的样品制成小液滴,在显微镜下选取只含一个细胞的液滴来进行纯培养物的分离。(4)选择性培养分离法:1、利用选择培养基进行直接分离2、富集培养5.提高显微镜分辨率的措施。显微镜的分辨率是由所用光波长短和物镜数值口径决定,缩短使用的光波波长或增加数值口径可以提高分辨率。但是可见光光波幅值较窄,紫外光波较长,可是不能用肉眼观察。所以利用减小光波长是有限的。而要增加数值口径,可以提高介质折射率。显微镜总的放大倍数是目镜和物镜放大倍数的乘积,也可以通过增加物镜的放大倍数使分辨率增高。6.活体观察:可采用压滴法、悬滴法及菌丝埋片法等在明视野、暗视野或相差显微镜下对微生物活体进行直接观察。7.一般说来,严格的无菌操作是一切微生物工作的基本要求,但在分离与培养极端嗜盐菌时常在没有点酒精灯的普通实验台上倾倒培养平板、在日常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