基因工程学习要点

基因工程学习要点一、基因工程：1、基因工程操作的必要工具：限制酶DNA连接酶载体作用作用部位作用特点(条件)①写出GAATTC切出黏性末端的序列：②写出GATATC切出平末端的序列CTTAAGCTATAG二、基因工程的基本过程：1、方法①________________________________________:先_________，再用________酶切割。方法②______________________：对于核苷酸序列已知的基因可直接人工合成；逆转录法：2、3、导入生物种类植物动物微生物常用方法农杆菌转化法(见练习7题)Ca2＋处理法受体细胞原核细胞微生物作为受体细胞的优点：4、依据标记基因的特征：（1）单标记基因----用含抗生素的培养基培养受体（2）双标记基因----需要破坏其中一个标记基因下图a表示基因工程中经常选用的运载体——pBR322质粒，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因。目的基因如果插入某抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性。限制酶切位点位于Tetr内。为了检查运载体是否导入原本没有Ampr和Tetr的大肠杆菌（受体细胞），将大肠杆菌涂布在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图b的结果（黑点表示_________________________________菌落）。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图c的结果（空圈表示与b对照无菌落的位置）。请在b图中圈出转基因大肠杆菌的位置。（3）或者做个体水平的鉴定，如抗虫棉是否具有抗虫性：______________________________哪一步不需要用碱基互补配对原则？三、比较限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶和解旋酶项目限制酶DNA连接酶DNA聚合酶解旋酶作用底物作用部位作用结果四、转基因技术的应用：1、2、3、巩固提高：1、基因工程的过程（字母表示物质，编号表示过程）⑴a物质是________，其本质是___________；b物质是_________；c和d物质是________；e物质是___________；f物质是___________。⑵①过程是____________。②过程是_______________。①、②过程用到的c和d，要求是______________，其目的是________________________。③过程是____________，形成f时符合______________原则。f和a相比，特点是_________________。④过程是把质粒导入________细胞。⑤过程是细胞通过分裂增殖后进行筛选。筛选的一个重要方法是_____________________________________________，例如导入的是胰岛素基因，那么筛选时就检测_______________________________。2、图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点，ampr表示氨苄青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是()A．图甲中的质粒用BamHⅠ切割后，含有4个游离的磷酸基团B．在构建重组质粒时，可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNAC．用PstⅠ和HindⅢ酶切，加入DNA连接酶后可得到1种符合要求的重组质粒D．导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长3、抗虫棉的产生具有重大的意义，在抗虫棉产生过程中，毒蛋白基因的受体细胞是()A．棉花受精卵细胞B．棉花分裂旺盛的体细胞C．棉花的花粉粒D．棉花任何细胞4、如图所示,若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因,并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb,1kb=1000对碱基)上相应的E—F区域(0.2kb),那么所形成的重组质粒pZHZ2。A.既能被E也能被F切开B.能被E但不能被F切开C.既不能被E也不能被F切开D.能被F但不能被E切开5、切割目的基因需要用到限制酶。下列有关限制酶的相关表述正确的是(↓示剪切点)()A.限制酶切割的都是氢键B.—CCGC↓GG—序列被限制酶切割后断裂的碱基对有4对C.能识别—G↓GATCC—序列的限制酶,也能识别—↓GATC—序列D.—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制酶切出的断裂末端核苷酸数目相同6、下列关于转基因生物安全性的叙述,错误．．的是()A.种植转基因作物应与传统农业种植区隔离B.转基因作物被动物食用后,目的基因会转入动物体细胞中C.种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性[来源:Zxxk.Com]D.转基因植物的目的基因可能转入根际微生物7、下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是()A．②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上C．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异