发酵工程第1章绪论.

本章内容一、发酵工程的定义及在生物技术中的地位二、发酵工程发展简史三、发酵工业的特点及其应用范围四、工业发酵的类型与典型过程五、发酵工程前沿及应用前景一、发酵工程定义及在生物技术中的地位1.何谓发酵？2.发酵工程概念？3.发酵工程在生物技术中的地位1.何谓发酵？ferver：发泡、沸腾fermentation微生物的发酵现象－－请看下面现象对发酵现象的不同理解－－两种角度（能量、产物）指微生物在无氧条件下，分解各种有机物质产生能量的一种方式，或者更严格地说，发酵是以有机物作为电子受体的氧化还原产能反应。生化和生理学意义上（侧重能量代谢）如葡萄糖在无氧条件下被微生物利用产生酒精,同时释放出CO2。6对发酵现象的不同理解－两种角度（能量、产物）发酵是指有机化合物进行无氧代谢释放能量的过程厌氧发酵是厌氧菌借助氧化-还原反应释放能量的过程发酵是酵母无氧呼吸产生能量的过程发酵是好氧生物在受到分子态氧短缺限制时的不完全氧化释放能量的过程生物化学家生物化学家看待微生物发酵过程：7工业微生物学家通过培养生物细胞（包括动、植物细胞）来合成产物的过程。通过微生物的生长繁殖和代谢活动来大量积累生产人们所需产品过程的理论和工程技术体系。（P1)侧重产品的生产：2.发酵工程概念？－－微生物细胞加工技术过程优化与放大传统发酵工程：利用微生物的生长和代谢活动来大量生产人们所需产品的过程理论与工程技术体系。（p1)该技术体系主要包括菌种选育与保藏、菌种扩大生产、代谢产物的生物合成与分离纯化制备等技术集成。现代发酵工程：是将DNA重组及细胞融合技术、酶工程技术、组学及代谢网络调控技术、过程工程优化与放大技术等新技术与传统发酵工程融合，大大提高传统发酵技术水平，拓展传统发酵应用领域和产品范围的一种现代工业生物技术体系（新一代工业生物技术）。强调现代生物技术、控制技术和装备技术在传统与现代发酵工业领域的集成应用。传统发酵工业：酿造及食品业、抗生素、氨基酸、核苷酸、有机酸、饲料添加剂、微生态制剂、生物农药、生物肥料等现代发酵工业：基因工程药物、细胞工程药物、疫苗；替代石油工业的大宗量的生物基化学品等，以及传统发酵工业升级。传统大型发酵工业的中央控制现代发酵工业的中央控制123.发酵工程在生物技术中的地位生物技术：应用自然科学和工程学的原理，依靠生物及其细胞的催化作用，将物料进行加工以提供产品或为社会服务的技术。发酵工程是生物技术的应用基础，是生物技术产业的核心。生物技术体系酶工程细胞工程发酵工程产物产品产品基因工程强调过程优化与控制分离和纯化产品。包括固液分离技术、细胞破壁技术、产物纯化技术，以及产品检验和包装技术等下游技术发酵过程控制，主要包括发酵条件的调控，无菌环境的控制，过程分析和控制等中游技术优良菌株的选育和保藏（包括菌种筛选、改造，菌种代谢路径改造等）上游技术上中下游相互关联！二、发酵工程发展简史1900以前自然发酵阶段1900—1940纯培养技术的建立1940—1950通气搅拌纯培养发酵技术的建立1950—1960诱变技术与代谢控制发酵技术的建立1960—1970开拓发酵原料时期（石油发酵时期）1970年以后进入基因工程菌发酵时期，以及细胞大规模培养技术的全面发展。近年来，以现代生物技术和过程工程技术为基础的现代发酵工业突飞猛进。自然发酵阶段主要是酿造工业主要产品：酒、酒精、醋、啤酒、干酪、酸乳等17世纪，能在容量为1500桶（一桶约136升）的木质大桶中进行第一次真正的大规模酿造1757年应用温度计主要特点：嫌气发酵，非纯种培养，产品质量不稳定纯培养技术的建立Koch首先发明固体培养基，建立细菌的纯粹培养Petri创造一种培养皿(petridish)用于微生物平板分离主要产品：酵母、甘油、乳酸、丙酮丁醇等第一次世界大战，Weizmann发明了丙酮丁醇发酵，建立了真正的无杂菌发酵。在面包酵母的生产中首先采用了分批补料培养技术。主要特点：纯培养为主、嫌氧发酵，产品质量控制水平大大提高。纯培养技术的建立二十世纪四十年代初，第二次世界大战爆发，青霉素的发现，迅速形成工业大规摸生产。1928年由Fleming发现青霉素1941年美国和英国合作对青霉素进行生产研究表面培养：1升扁瓶或锥形瓶，内装200mL麦麸培养基───40u/ml1943年沉浸培养：5m3───200u/ml当今：100m3─200m3───5-7万u/ml链霉素、金霉素、新霉索、红霉素通气搅拌发酵技术的建立标志：纯种培养深层发酵生产青霉素主要技术进展：通气搅拌解决了液体深层培养的供氧问题。无菌空气、培养基灭菌、无污染接种、大型发酵罐的密封与抗污染设计解决了耗氧发酵中的杂菌污染问题。主要特点：耗氧发酵实现规模化纯培养发酵，一系列过程工程技术创新。意义：推动抗生素工业乃至整个发酵工业快速发展建立了完整的好氧发酵放大技术及装备奠定了现代发酵工业的理论和实践基础通气搅拌发酵技术的建立大型发酵罐搅拌装置1.2发酵工程的发展历史180M3发酵罐车间大型空气压缩机1.2发酵工程的发展历史发酵车间的空气过滤器代谢控制发酵技术的建立基于代谢途径及其调控实现微生物菌种选育和控制发酵。代谢控制发酵技术：应用生物化学的代谢知识和遗传学理论，选育微生物突变株，从而调控微生物代谢，大量积累目标发酵产物。主要应用：氨基酸、有机酸及核苷酸等基于初级代谢产物的发酵生产，以及抗生素等开拓新的发酵原料时期目的：以烃类为碳源生产微生物细胞作为饲料蛋白质的来源技术进步：发展了高压喷射式、强制循环式等多种发酵罐及其发酵技术计算机和自动控制技术的运用：灭菌和发酵过程自动控制，促进发酵工业朝连续化、自动化方向发展特点：解决发酵原料及人畜争粮问题；规模和自动化程度显著提高，能耗过大。开拓新的发酵原料时期基因工程阶段（现代发酵工业新阶段）主要标志基因工程产品生产以及基因工程技术应用世界上已批准上市的基因工程药物有几十种，如：胰岛素、人生长激素等。29主要特点基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术以及发酵过程优化及放大技术的全面进步高产微生物代谢产物及非微生物代谢产物的基因工程菌构建及产品的发酵生产主导碳氧经济发展，碳氢经济的替代及生物炼制技术的兴起基因工程阶段（现代发酵工业新阶段）人胰岛素人生长激素(GH)表皮生长因子(EGF)肿瘤坏死因子白细胞介素-2(IL-2)尿激酶原猪生长激素(PGH)牛生长激素(BGH)纤维素酶,-干扰素乙型肝炎疫苗集落刺激因子(CSF)促红细胞生成素(EPO)抗血友病因子组织溶纤原激活剂(t-PA)部分利用基因工程技术研制的产品发酵现象→酿造食品工业→非食品工业→青霉素→抗菌素发酵工业→氨基酸,核酸发酵（代谢控制发酵）→基因工程菌→动物细胞大规模培养→植物细胞大规模培养→藻类细胞大规模培养→转基因动物第一个转折点：非食品工业第二个转折点：青霉素→抗菌素发酵工业第三个转折点：切断支路代谢:酶的活力调控,酶的合成调控(反馈控制和反馈阻遏),解除菌体自身的反馈调节,突变株的应用,前体、终产物、副产物等近代转折点：基因、动物、海洋发酵工程发展简史三、发酵工业的特点发酵过程一般是在常温常压下进行的生化反应，反应安全，要求条件较简单。可用较廉价原料生产较高价值产品。反应专一性强。能够专一性地和高度选择性地对某些较为复杂的化合物进行特定部位的生物转化修饰。发酵过程中对杂菌污染的防治至关重要。菌种是关键。发酵生产不受地理、气候、季节等自然条件限制。发酵工业的特点发酵工业的范围微生物菌体酶制剂代谢产物生物转化微生物特殊机能的利用利用微生物消除环境污染利用微生物发酵保持生态平衡微生物湿法冶金利用基因工程菌株开拓发酵工程新领域微生物菌体传统菌体发酵工业现代菌体发酵工业酵母发酵菌体蛋白（单细胞蛋白）发酵杀虫剂：苏云金杆菌，蜡样芽孢杆菌，侧孢芽孢杆菌；白僵菌、绿僵菌疫苗新的菌体发酵产品:药用功能菌体茯苓菌→茯苓担子真菌→灵芝、香菇类虫草头孢菌密环菌微生物菌体面包酵母藻类芽孢杆菌和伴孢晶体虫草头孢菌发酵生产虫草酶制剂广泛用于医药工业、食品和轻工业、石油化工酶试剂盒：医用诊断试剂盒、工业分析试剂盒等药用酶制剂：胆固醇氧化酶，葡萄糖氧化酶等食品工业用酶制剂：果胶酶，淀粉酶等基因重组技术用酶制剂：核酸酶（nuclease），包括DNA、RNA的内切酶、外切酶，DNA限制性内切酶、DNA连接酶等。饲料酶制剂：木聚糖酶、β-葡聚糖酶、纤维素酶等微生物转化在用维生素C一步和二步发酵法生产中,起主要氧化作用的葡糖酸杆菌对作用底物(D-山梨醇或L-山梨糖)的分子结构进行特异性改变。★微观分类：（1）酿酒工业（2）发酵食品工业（3）有机溶剂发酵工业（4）抗生素发酵工业（5）有机酸发酵工业（6）酶制剂发酵工业（7）核甘酸类物质发酵工业（8）氨基酸发酵工业（9）生理活性物质发酵工业（10）维生素发酵工业（11）菌体蛋白发酵工业（12）环境净化工业（13）生物能工业（14）微生物冶金工业44发酵工业简介发酵食品有机酸氨基酸核酸类物质酶制剂医药工业（抗生素…）饲料工业（单细胞蛋白环境工程（废物处理）其它（冶金工业…）FermentationIndustryFermentedFoodsOrganicAcidsAminoAcidsNucleotidesEnzymesPharmaceutical(Antibiotics…)Feedstuff(eg.SCP)EnvironmentalApplication(WasteTreatment)Others(eg.Metallurgicalindustry)45四、工业发酵的类型固体发酵厌氧发酵需氧发酵兼性厌氧发酵液体发酵（包括液体深层发酵）按培养基物理性状浅盘固体发酵深层固体发酵（机械通风制曲）按微生物对氧需求按发酵工艺流程分批发酵补料分批发酵连续发酵单级恒化器连续发酵多级恒化器连续发酵带有细胞再循环的单级恒化器连续发酵四、工业发酵的类型按菌的种类单菌种发酵多菌种混合发酵（混合菌发酵）新发展的微生物培养方法载体培养两步法液体深层培养发酵工业的基本生产过程空气空气净化处理保藏菌种斜面活化扩大培养种子罐主发酵碳源、氮源等营养物质灭菌产物分离纯化成品49发酵工业的基本生产过程1.用作种子扩大培养及发酵生产的各种培养基的配制；2.培养基、发酵罐及其附属设备的消毒灭菌；3.扩大培养出有活性的适量纯种，以一定比例接种入发酵罐中；4.控制最适发酵条件使微生物生长并形成大量的代谢产物；5.将产物提取并精制，以得到合格的产品；6.回收或处理发酵过程中所产生的三废物质。发酵工业的基本生产过程发酵工业的典型过程－－深层发酵过程发酵工业发展趋向及应用前景基因工程的发展为发酵工程带来新的活力。采用发酵技术进行高等动植物细胞培养，具有诱人前景。不断开发和采用大型节能高效的发酵装置，计算机自动控制将成为发酵生产控制的主要手段。强调代谢机理与调控研究，使微生物的机能得到进一步开发。生态型发酵工业的兴起：清洁生产。再生资源的利用。混合菌发酵强调微生物群落与功能研究，提高发酵效率。发酵工业发展趋向及应用前景清洁生产按照联合国环境规划署（UNEP）的定义：“清洁生产是一种新的创造性的思想，该思想将整体预防的环境战略持续应用于生产过程、产品和服务中，以增加生态效益和减少人类及环境的风险。对生产过程，要求节约原材料和能源，淘汰有毒原材料，减降所有废弃物的数量和毒性；对产品，要求减少从原材料提炼到产品最终处置的全生命周期的不利影响；对服务，要求将环境因素纳入设计和所提供的服务中。”混合菌发酵的应用传统酿造和食品发酵工业：白酒，酱油、醋、豆豉有机废弃物（工业、城市和农业）的发酵处理与转化：生物能源：生物制氢、生物制沼气生物饲料生物肥料学习重点基本过程过程优化过程控制过程放大一条主线、两个重点、三个层次、四个目标发酵工艺过程过程优化放大反应器细胞、分子高转化率高产量高效率低成本发酵工程是连接生物科