低温胁迫对玉米幼苗生理指标的影响

-1-低温胁迫对玉米幼苗生理指标的影响摘要关键词：低温玉米冷害抗冷性0前言1材料与方法1、1材料共2个品种：品种名称、特性等介绍1、2材料培育过程11年3月18日，选籽粒饱满的玉米种子600粒，在75％的酒精中消毒10s，然后在5％的Ca（ClO）2溶液中浸泡10min。浸种处理（3月18日）2514h％无光催芽（3月19日）253d℃，分苗（3月22日），继续用蒸馏水培养2天。出一片真叶后用完全培养液（3月24日）25d℃，光下，7出两片真叶去胚乳后低温处理（3月31日），（设5℃、10℃、25℃三个处理，其中25℃为对照）低温处理2-3d后测定各项生理指标。1、3生理指标的测定方法叶绿素含量测定：722分光光度计丙酮法根系活力测定：TTC法过氧化物酶活性测定：愈创木酚法外渗电导率测定：DDS－307电导率仪法干物重测定：称重法2实验操作步骤2、1叶绿素含量测定2、1、1测定方法称取0.2g叶片380%(CaCO丙酮、石英砂（少许）、少许）研磨过滤定容25ml测定663nm、645nm的光密度（吸光度）2、1、2结果计算CA=12.7D663－2.59D645CB=22.9D645－4.67D663CT=CA+CB=20.3D645＋8.04D663叶绿素含量(mg·g－1)＝1mgmlg1000L－浓度（）提取液总体积（）重量（）-2-2、2根系活力测定2、2、1测定方法（1）反应①实验：gmlml称取0.3玉米根尖50.4％TTC溶液50.1M磷酸缓冲液于称量瓶中371h℃暗中保温加2ml2N硫酸终止此反应②空白：g2ml2N称取0.3玉米根尖硫酸称量瓶中5ml0.45ml0.1M％TTC溶液磷酸缓冲液371h℃暗中保温(2)测定分别取出根吸干水石英砂（少许）加3ml乙酸乙酯，研磨过滤用乙酸乙酯定容10ml480nm比色记录光密度（吸光度），查标准曲线2、2、2结果计算TTC还原强度＝gghTTC还原量（）根重（）时间（）2、3干物重测定法取一株玉米幼苗将其根、茎、叶剪开放入大培养皿中1052h℃烘干称重记录干物重(g·株－1)2、4外渗电导率测定2、4、1测定方法称取255CK℃光下（）℃光下（处理）各0.5g玉米叶片于小烧杯中各加20ml蒸馏水抽气浸泡10min测电导率（S1）煮沸2min测电导率（S2）2、4、2结果计算相对电导度(L)＝(S1－S0)·(S2－S0)-1伤害率(%)=(Lt－LCK)·(1－LCK)-1S0－蒸馏水电导率S1－煮沸前电导率S2－煮沸后电导率Lt－处理叶片的相对电导率LCK－对照叶片的相对电导率2、5过氧化物酶活性的测定2、5、1测定方法-3-（1）酶液制备：称取0.3g玉米叶片，加0.05mol/LPH5.5磷酸缓冲液研磨300010minr离心用磷酸缓冲液至定容10备用（2）活性测定：①反应222.90.05/5.51.00.2%1.00.05/0.1mlmolLPHmlHOmlmolLml磷酸缓冲液愈创木酚酶液3715min℃保温加2ml20%的三氯乙酸终止反应470nm比色。②对照：酶液先用沸水（5min）杀死。2、5、2结果结算过氧化物酶活性(活性单位·g-1·min-1)＝（△A·VT）·（0.01W·t·Vs）-1△A－光密度（吸光度）VT－提取液总体积（ml）W－样鲜重（g）t－反映时间（min）Vs－测定用酶液体积（ml）3、结果与分析表1低温胁迫下玉米各生理指标的测定结果品种温度(℃)叶绿素含量(mg·g-1)根系活力(μg·g-1·h-1)过氧化物酶活性(活性单位·g-1·min-1)相对电导率(L)伤害率(%)干物重(g·株－1)龙单132553、1干物重的变化3、2叶绿素含量的变化3、3根系活力的变化3、4外渗电导率的变化3、5过氧化物酶活性的变化参考文献