人教版河南省荥阳市高级中学2011-2012学年一轮选修3复习动物细胞工程

2．2动物细胞工程【基础回顾】1．动物细胞工程常用的技术手段有？其中哪一个技术手段是其他动物细胞工程技术的基础？2．动物细胞培养的过程？将从健康的动物体内取出的组织块，加入或处理一段时间后，组织块就会分散成单个细胞制成细胞悬液，在适宜环境中培养，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为。培养贴附性细胞时，要求培养皿或培养瓶内表面；当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会，这种现象称为细胞的。人们通常将动物组织消化后的初次培养称为。贴满瓶壁的细胞需要重新用处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，这样的培养称为。细胞传代至10代～50代左右时，增殖会逐渐减慢，以至于完全停止，但少部分细胞会克服寿命的极限，获得不死性，这些细胞已经发生了突变，正在朝着等同于癌细胞的方向发展。3．动物细胞培养的条件包括？为什么要在细胞培养液中添加一定量的抗生素？为什么应定期更换培养液？清除，防止危害。4．动物核移植概念？将动物的一个细胞的移入一个已经去掉的细胞中，使其重组并发育成一个新的，这个胚胎最终发育成为动物个体。用核移植的方法得到的动物称为？。5．体细胞核移植技术的应用前景有？6．进行细胞培养时为什么要将组织块分散成单个细胞？7．为什么用于冷冻保存的细胞或核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞？8．通过细胞核移植方法生产的克隆动物，并不是对核供体动物100%的复制，为什么？因为生物的性状除受基因控制以外，还受基因和的影响。9．动物细胞融合常用的诱导因素有？细胞融合技术的优点是？突破了的局限，使成为可能。10．制备单克隆抗体的技术流程是？①用对小鼠进行注射，使小鼠产生反应；②然后，把细胞和细胞融合；③再用特定的培养基进行筛选，在该培养基上，细胞和细胞都会死亡，只有细胞才能生长。这种杂种细胞的特点是？既能又能。④对上述经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行和，经过多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。⑤最后，将杂交瘤细胞在条件下做大规模培养，或注射到小鼠的内增殖，这样，从或中，就可以提取大量的单克隆抗体了。11．制备单抗的过程中第一次筛选是为了获得？，以后的几次筛选是为了获得？12．单克隆抗体最主要的优点是？。13．“生物导弹”是？把抗癌细胞的单克隆抗体跟、或相结合，制成“生物导弹”注入体内，借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞。这样既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。【习题自测】1、现有一长度为1000碱基对(by）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoR1酶切后得到的DNA分子仍是1000by，用Kpn1单独酶切得到400by和600by两种长度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同时酶切后得到200by和600by两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是2、利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是A．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B．体外培养单个效应B细胞（浆细胞）可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C．将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D．利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者3、用基因工程技术培育抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作正确的是A．用限制性核酸内切酶切割作为载体的烟草花叶病毒的核酸B．用DNA聚合酶连接经限制酶切割的抗除草剂基因和载体C．用显微注射法将重组DNA分子导入烟草的原生质体D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞4、关于细胞工程的说法不正确的是A．培养动物细胞和植物细胞的重要区别在于培养基的不同B．单克隆抗体与血清抗体相比，前者特异性强、灵敏度高，产量大C．动物细胞培养不需要在无菌条件下进行，而植物细胞培养则需要在无菌条件下进行D．在生物体内细胞没有表现出全能性，与基因表达的选择性密切相关5、2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白“的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是A．追踪目的基因在细胞内的复制过程B．追踪目的基因插入到染色体上的位置C.追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布D．追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构6、经测定某化合物含C、H、O、N、S，该化合物不可能具有的功能有A.与抗原物质发生特异性结合B.携带氨基酸进入核糖体C.用于基因工程获得黏性末端D.可连接上抗癌药物制成“生物导弹”7、植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性B．植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性C．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞增殖D．原生质体融合和动物细胞融合——生物膜的流动性8、下图是将人的生长激素基因导入细菌D细胞内，产生“工程菌”的示意图。所用的载体为质粒A。若已知细菌D细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌后，其上的基因能得到表达。能表明目的基因已与载体结合，并被导入受体细胞的是A．在含氨苄青霉素的培养基和含四环素的培养基上均能生长繁殖的细菌B．在含氨苄青霉素的培养基和含四环素的培养基上都不能生长繁殖的细菌C．在含氨苄青霉素的培养基上能生长繁殖，但在含四环素的培养基上不能生长繁殖的细菌D．在含氨苄青霉素的培养基上不能生长繁殖，但在含四环素的培养基上能生长繁殖的细菌9、不是基因工程方法生产的药物是()A．干扰素B．白细胞介素C．青霉素D．乙肝疫苗10、下列关于细胞工程的有关叙述，不正确的是（）A．利用花药离体培养得到单倍体植株、从紫草的愈伤组织中提取紫草素、利用细胞工程培育“番茄一马铃薯”杂种植株都利用了植物组织培养技术B．在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生细胞脱分化、染色体变异或基因突变，而不可能发生细胞分化和基因重组C．动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体。D．一般而言，动物细胞培养不需经过脱分化过程，但可通过定向诱导动物干细胞，使其分化成所需的组织或器官11、干扰素用于治疗病毒感染引起的疾病，可通过基因工程大量获得。请回答相关问题。（1）已知干扰素基因的核苷酸序列，则获取目的基因的较简单方法是，目的基因还可以从cDNA文库获取，但cDNA文库只含某种生物的部分基因，原因是。（2）基因表达载体除含有干扰素基因外，还必须有、和等。（3）如果受体细胞为受精卵，则此过程还涉及到动物细胞培养技术，动物细胞培养的条件包括、营养、、气体环境，提供气体中CO2的主要作用是。（4）转基因技术是否成功，需要对受体细胞进行分子水平的检测，首先是检测受体细胞上是否插入目的基因，这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键，检测的方法是。最后还要检测目的基因是否翻译成了相应蛋白质，利用的技术是。12、回答下列有关动物细胞培养的问题：⑴动物细胞培养的细胞一般取自，这是由于这些细胞；动物细胞培养过程中当贴壁细胞分裂生长到细胞表面时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的，此时，瓶壁上形成的细胞层数是，要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是。⑵随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂缓慢以至于完全停止。继续传代培养时少部分细胞可以继续增殖，这些细胞会因突变而变成细胞，该种细胞的黏着性，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量。⑶现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是。检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到期的细胞用显微镜进行观察。⑷目前通常在条件下保存细胞，因为在这种条件下，细胞中的活性降低，细胞的速率降低。使用或保存的细胞通常为代以内，是因为这些细胞。⑸给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作进行攻击。13、右图为细胞融合的简略过程，请据图回答：（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用处理，除去了；由A、B到细胞C的过程中，常用的方法是。融合完成的标志是。形成的D细胞还要应用技术把D培养成植株。（2）若A、B是动物细胞，由A、B到C的过程中，常用的不同于植物原生质体融合的手段是，所形成的D称为，A、B融合为C的过程说明了。（3）若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠效应B细胞（浆细胞），那么，在获得此细胞之前，小鼠已经被注射了；注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应，生成了，图中B为；融合后筛选出的细胞应具有的特性是。生产单抗时可在体外培养，此时与植物组织培养的主要区别是培养基要用培养基。（物理状态），培养基中除了添加必要的营养物质外还需加入。14、科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并在大肠杆菌中成功表达。下图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆菌的过程。请据图回答：（1）步骤①和②中常用的工具酶是。（2）经过①和②步骤后，有些质粒上的基因内插入了外源目的基因，形成重组质粒。（3）步骤③是的过程。为了促进该过程，应用处理大肠杆菌。（4）步骤④：将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养，目的是筛选。能在C中生长的大肠杆菌有种。（5）步骤⑤：用无菌牙签挑取C上的单个菌落，分别接种到D（含氨苄青霉素和四环素）和E（含四环素）两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示。含目的基因的菌落位于（选填“D”或“E”）上。参考答案1---5DDDCC6---10BBCCC11、（1）人工合成法cDNA是由生物发育的某个时期的mRNA反转录产生（2）启动子终止子标记基因（3）无菌、无毒的环境温度和pH维持培养液的pH（4）染色体的DNADNA分子杂交技术抗原—抗体杂交12、⑴幼龄动物的组织或器官有旺盛的分裂能力相互接触接触抑制单层（或一层）胰蛋白酶⑵不死性（或癌）降低减少⑶由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）中⑷冷冻（或超低温、液氮）酶新陈代谢10能保持正常的二倍体核型⑸抗原13、（1）纤维素酶和果胶酶细胞壁离心、振动、电激或用PEG诱导产生新的细胞壁植物组织培养（2）灭活的病毒诱导杂交细胞生物膜的流动性（或组成膜的蛋白质分子和磷脂分子大都是可以运动的）（3）特定的抗原蛋白相应的效应B细胞（浆细胞）、记忆细胞、抗体骨髓瘤细胞既能大量增殖又能产生足够数量的特定抗体液体动物血清14、（1）限制酶DNA连接酶（2）氨苄青霉素抗性（3）将重组质粒(目的基因)导入大肠杆菌（受体细胞）Ca2+（4）含四环素抗性基因的大肠杆菌2（5）E