丙型慢性肝炎时的树突状细胞功能_考藤达哉pdf

日本医学介绍2005年第26卷第6期·255·丙型慢性肝炎时的树突状细胞功能一、什么是树突状细胞树突状细胞(dendriticcels:DC)是机体内最强有力的抗原递呈细胞,是唯一能够刺激天然T细胞的细胞。人树突状细胞依系统分类为髓样树突状细胞(myeloidDC:MDC)和浆细胞样树突状细胞(plasmacytoidDC:PDC)。由骨髓中CD34阳性干细胞诱导为MDC和PDC的前体细胞,并在GM-CSF、TNFα及FLT3配体等细胞因子与造血因子作用下分化为DC。当MDC受到脂多糖(LPS)和CD40配体(CD40L)刺激时,便会产生IL-12及TNFα等细胞因子。PDC则在病毒感染时产生大量的Ⅰ型IFN。天然CD4T细胞向Th1/Th2的分化系由DC调控。具体而言,MDC诱导Th1,PDC诱导Th2的效能强,故又可分别称做DC1和考藤哉等DC2。然而,PDC依其刺激方式不同,既可产生IL-12,又可诱导细胞毒性T细胞(CTL),亦发挥MDC样作用。所以,DC在活体内富有功能上的可塑性,以其相互作用的调节而完善各自的功能,从而对免疫系统进行总括性调节。二、丙型肝炎时的树突状细胞功能1.树突状细胞亚群频率与功能低下DC不仅与免疫应答的激活相关,与免疫调节和抑制亦相关。已有报告指出,在发病与疾病表现同免疫学机制相关的各种疾病中存在DC功能低下或异常。作者等几个研究组对丙型慢性肝炎患者外周血单核细胞(PBMC)诱导的DC进行了研究,结果证实其异T细胞刺激功能和IL-12生成能力较非感染者表现低下。由于以往的研究都是以单核细胞体外诱导的DC为对象,HBV及HCV相比,构成输血后肝炎的可能性踪观察,随访期间均未出现肝炎症状。但献血极小。但在戊型肝炎流行地区之一的印度却有者1,54岁男性,于2002年9月ALT升高至报告称由200名献血者中检出3名(1.5%)966IU/L,抗HEV-IgM及IgG与HEVRNA均呈HEVRNA阳性。更有报道,对37例接受过输阳性;献血者2,35岁男性于2002年4月ALT血的HEV抗体阴性患者进行随访追踪检查发升为61IU/L,上述3项HEV标志亦均为阳性。现有2例(5.4%)于输血后第4～5周时出现须说明,这两名献血者在该次输血之前其ALT了抗-HEV-IgM及IgG阳转,其中有1例ALT增是正常的,而献血后其ALT复常,血清中HEV升,从而在印度认为输血亦有感染HEV的风亦转阴。献血者3是位41岁男性,2003年6险。在日本,亦有报道(Matsubayashi2004)于月升至62抗及阳性,ALTIU/L,HEV-IgMIgG戊型肝炎多发的北海道在2002年8月也发生但未查到HEVRNA。检测其3个月前的贮存过输血而致的戊肝病例。另对次于北海道但亦血清结果为抗阴性而阳性另HEVHEVRNA,可谓戊肝多发的本洲北部某血液中心(A),以有ALT略高(68IU/L)。以上检测结果表明,3及眼下尚无病例发生报告的本洲南部某血液中例献血者病毒血症期的ALT分别为966、61和心(B)检测2002年～2003年所采血液的抗68虽不适合供作输血但有1例ALTHEV-IgG阳性率分别为5.5%及2.1%,A、B两IU/L,仅稍高出标准因而令人怀疑61即机构相作比较,统计学上前者的阳性率显著为(IU/L),ALT。使在60以下也未必不处于病毒血症状态高〔144/2631vs56/2712,P0.00001(χ2检IU/L所以,今后应该充分考虑戊型肝炎发生率和抗验)〕。A血液机构560例ALT61IU/L者中3阳性率的地区差异对于正常的血源例(0.5%)检出抗HEV-IgM,其中2例(0.4%)HEV,ALT也要检查其有无HEV血症。HEVRNA。3谷仁烨朱丽影译姚桢校并呈阳性对上述名献血者作追·256·日本医学介绍2005年第26卷第6期而此种DC功能低下是否反映了活体内的实际情况却存有疑问。于是,作者(Kanto2004)直接从患者外周血中分离出MDC和PDC用以检测其功能。实验上,首先测定外周血中DC亚群数值。以PBMC中Lineage标志(CD3、CD14、CD16、CD19、CD20、CD56)阴性而HLA-DR阳性细胞为DC,再用CD11c和CD123染色性鉴定MDC(Lineage-、HLA-DR+、CD11c+CD123+和PDC(Lineage-、HLA-DR+、CD11c-、CD123++)。随后依PBMC频率计算各DC亚群的绝对数,将HCV感染组与非感染组作比较。结果丙肝患者组较对照组显示低下。另外,又检测分析了各亚群异T细胞刺激功能,MDC的IL-12生成能力、PDC的IFNα生成能力,两组对比均表明丙肝患者组显示低下。关于丙型慢性肝炎患者DC亚群减少的机制,认为有可能缘于CD34阳性干细胞的DC分化诱导功能受障。MDC及PDC前体细胞(DC祖细胞)本也已存在于外周血中,依其分化阶段分类为早期祖细胞(Lineage-、CD123+、CD34+、CD45RA-)与晚期祖细胞(Lineage-、CD123+、CD34+、CD45RA+)。将此类DC祖细胞数值同DC亚群那样进行丙肝患者与非感染者比较发现,早期与晚期祖细胞均较患者组减少,而且数值同MDC和PDC的数值互呈相关。提示由骨髓干细胞向DC化的功能障碍为DC数值减少原因之一。2.树突状细胞的NK激活功能低下DC以激活NK和NKT细胞而调节感染初期的免疫应答。目前虽无有关通过IFNγ等细胞因子间接地抑制HCV复制NK细胞清除HCV感染细胞的报道,却可认为它可。作者对比检测丙型慢性肝炎患者和非感染者的单核细胞源DC的NK细胞激活能力发现,在这一激活过程中除通过IL-12等细胞因子途径外,尚可通过DC表达的NK激活配体与NK细胞激活受体(NKG2D)相结合的系统。激活配体中,MHC-Ⅰ相关链A/B(MICA/B)备受注目。作者探索了种种刺激对DC表达MICA/B的影响,结果证实LPS、CD40L等刺激未引起MICA/B表达,但IFNα刺激确可使之表达,即IFNα刺激可使DC通过MICA/B而激活NK细胞,促进细胞损害活性。但据Jinushi(2003)报告,以IFNα刺激丙肝患者DC并未发现MICA/B表达,亦未出现NK细胞损害活性亢进。由此可见,丙肝患者的DC在从IFNα刺激到MICA/B表达这一步骤中存在障碍而致不能有效地激活NK细胞。该报道还称,在依对IFNα的反应性DC诱导MICA/B表达上,又有DC源IL-15的自分泌作用,但丙肝患者DC的IL-15生成能力却较非感染者显著降低。3.树突状细胞可致Th1诱导低下在由机体清除HCV上,HCV特异性CTL的感染肝细胞排除作用是必需的。而在CTL诱导上,Th1型CD4反应十分重要。Th1优势免疫环境在HCV清除上重要这一点,已由对急性肝炎和IFNα显效病例的分析得以揭示。为了分析DC的Th1/Th2诱导功能,作者(Kanto2004)将MDC、PDC与天然CD4T细胞共同培育,然后检测其T细胞的细胞因子生成能力。结果发现,非感染者的MDC诱导能产生IFNγ的Th1细胞能力很强。相比之下,丙肝患者的MDC的Th1诱导功能甚低(P0.05)。究其原因,丙肝患者MDC的IL-12生成能力低下为原因之一,此可认为丙肝患者是处于不易诱导CTL的免疫环境之中。但患者的PDC其Th1诱导功能同非感染者无异,而能很好地诱导生成IL-10的T细胞(P0.05)。近年多有报导称,病毒感染及癌症时产生IL-10及TGFβ的调节性T细胞对免疫系统呈现抑制作用,从而与疾病的进展机制相关。推测这一作用也可能存在于HCV感染中,但未能明确。作者实验结果已提示丙肝患者PDC可能诱导调节性T细胞样细胞,目前正在探索IL-10生成CD4T细胞功能及其在疾病表现的相关性。三、丙型肝炎患者树突状细胞亚群减少与功能低下的机制关于丙型慢性肝炎患者DC亚群减少及功能低下的机制,考虑可能为DC的HCV感染。日本医学介绍2005年第26卷第6期·257·乙型慢性肝炎拉米夫定疗法大石和佳等一、拉米夫定的最佳适应证病例(2004)先后报告,即使对于失代偿性肝硬化,拉米夫定(lamivudine:LAM)的适应对象也可取得暂时改善肝衰状态而获延长生命的效是不管HBeAg是阳性或阴性,而HBVDNA为果。只是,此时有可能遭遇突破后肝炎复燃重阳性,且ALT检测值异常的慢性肝炎。携带状症化而致命,尤其在出现YMDD变异株时更须态活动发病不久的病例多无组织学病变的进提高警惕,密切观察经过尤为重要。展,其HBVDNA复制水平高而HBeAg常呈阳最近有报道,对于接受肝移植的乙型肝炎性。但是,在此类病例常可预测早期出现变异病例,为了预防移植术后的再感染,应由术前数病毒株,故不提倡对之积极投用LAM。对于这月起(DiPaolo2004)及对于进行化疗中的恶性种较为年轻的患者,当以首选IFN治疗为好。肿瘤患者为了防止HBV再激活(Idilman慢性肝炎之中,组织学上有进展〔新犬山分类2004),投用LAM均可取得良好效果。之F2A2以上(相当于我国标准G2、S2以上—二、拉米夫定治疗中能否中途停药?译注)〕、转氨酶持续增升而明显有演进为肝硬服用LAM中如果中途停药,可能招致肝炎化迹象的病例,则必要投予LAM以阻止其病情复燃,故而很难掌握中止停服的时机。特别是发展。此外,对于抗-HBe阳性、但HBVDNA当有YMDD变异出现时因已引起肝炎恶化,倘反复复制而组织学病变进展的病例,亦是LAM若此际停药则有引发本已由LAM抑制的野生良好的适应对象。株生长复制之险,所以不应停药。另方面,近年还有,LAM对于乙型急性肝炎、慢性肝炎确有当已出现YMDD变异株之后继续服用重症化以及乙型剧症肝炎也可认为是有效的疗LAM无益的报道(Liaw2004),但对此尚未取法。剧症肝炎是可能死亡近半的危重病症,本得共识。一般而论,确定是否要中途停药必须药在肝细胞如此重度损害的病例充分发挥抗病检测HBV相关病毒学标志并对经过进行密切毒效应有时需要1～2个月,因此应尽可能早期观察。在HBeAg阳性慢性肝炎患者须待其血投药。重症化或剧症化的指标是凝血酶原活性清学转变持续6个月以上,在HBeAg阴性患者重度低下和肝细胞生长因子(HGF)检测值升要待其的HBsAg消失或HBVDNA转阴持续6高。另外认为,对于有可能发生肝衰的肝硬化,个月以上作为停药指标。虽说HBsAg消失即为使肝炎活动静息及提升肝脏储备功能亦可使可停药,但为了避免患者肝细胞内残存的少量用LAM。最近,Lee(2003)与ManolakopoulosHBV复燃,此际依然不应立即停药。已有实验发现,当使DC强制表达HCV核心蛋E1/E2蛋白侵入MDC。但另一方面,PDC则未白时,便可重现丙肝患者DC功能低下即显示观察到阳性信号。作者又应用存在于丙型急性异T细胞刺激功能及IL-12生成能力低下。作肝炎患者血清的HCV作了感染试验,结果同样者(Kaimori2004)将HCVE1/E2蛋白携带于外造成MDC感染,并也由MDC查到复制中间体膜,以水泡性口炎病毒基因作为报道基因制成负链HCVRNA。以上系列实验结果提示,MDC组合绿色荧光蛋白(GFP)的假-HCV,用以检测的减少与功能低下均与HCV感染相关,但PDC对DC亚群有否感染。结果表明,于MDC可观的功能低下机制依然有待澄清。察到GFP荧光信号即证实病毒已通过HCV渡卓译姚桢校