FCR酶活性测定开题报告

本科毕业论文开题报告题目：苹果叶片FCR酶活力定位和活性测定学生姓名：专业：班级学号：指导教师：指导教师职称：年月日选题的目的意义：铁是植物生长发育必需的微量元素。由于土壤中铁的生物有效性普遍较低,缺铁是限制全球农业生产的重要因素之一。目前,虽然对植物缺铁的生理响应已经有较为全面的了解,但是对这些缺铁响应的信号调控过程知之甚少。为了进一步了解植物缺铁响应的分子调控机理,我们采用病毒诱导的基因沉默(VIGS)的方法研究了14-3-3基因(TFT7)在番茄缺铁响应中的作用。通过构建烟草花叶病毒诱导的14-3-3基因(TFT7)沉默载体,以农杆菌为媒介侵染番茄获得基因沉默植株。结果表明,在缺铁条件下,14-3-3基因(TFT7)沉默后,根部铁还原酶(FCR,FerricChelateReductase)活性明显降低。该结果初步证明了14-3-3蛋白参与了缺铁诱导的铁还原酶活性的调控过程。实验中还研究了不同磷处理对饭豆铁营养的影响。在缺铁条件下,低磷显著促进了铁从根向地上部的转运,增加了叶绿素含量,缓解了黄化现象。研究结果证明了低磷能够促进缺铁情况下植物体内铁的再利用。国内研究现状缺铁（FE）是农作物生产，特别是石灰性土壤上农作物生产的主要限制因素之一。植物在缺铁环境下进化出2类适应性机制，即双子叶植物和非禾本科单子叶植物中的StrategyI及禾本科植物中的StrategyII。在StrategyI的植物中，由于根系只能吸收二价铁离子，因此铁缺乏诱导根系细胞质膜上的高铁还原酶（Ferricchelatereductase,FCR)是这类植物适应缺铁胁迫的关键环节。经过近40年的研究，人们对FCR酶活性功能及基因（FRO2)诱导等已有了较为全面的了解；在植物感受和响应缺铁信号的研究方面，虽有研究证明生长素和NO可能参与了FCR的诱导，但FCR酶活性诱导中的信号转导过程仍不清晰。浙江大学生命科学学院植物科学研究所郑绍建研究组利用一系列与生长素合成、极性运输和NO合成相关的拟南芥突变体材料，并结合添加外源生长素和NO供体、生长素极性运输和NO合成抑制剂、NO淬灭剂等实验，深入探讨了同时作为信号物质的生长素和NO在诱导FCR活性过程中的上下游关系，证明NO位于生长素的下游，NO直接作用于激活FRO2的转录因子FIT，并最终激活FRO2的表达。加深了人们参与铁缺乏诱导FCR活性过程中的信号物质及其作用机理的理解，完善这一过程中的信号转导模型。参考文献：Bavaresco,L.,P.Bonini,andE.Giachino.2000。Resistanceandsusceptibilityofsomegrape-vinevarietiestolime-inducedchlorosis.物理学园艺。Ojeda,M.,B.Schaffer,andFSDavies.2004Rootandleafferricchelatereductaseactivityinpondappleandsoursop.J.植物营养。Lucena,JJ2000.Effectsofbicarbonate,nitrate,andotherenvironmentalfactorsonirondefi-ciencychlorosis.J.植物营养。Imsande,J.1998.Iron,sulfur,andchlorophylldeficiencies:Aneedforanintegrativeapproachinplantphysiology.生理学。.研究的基本思路和方法：在测定体系中含有足量的Fe3+EDTA和Fe2+的专性螯合剂菲绕啉，菲绕啉可以和Fe2+生成稳定的红色螯合物，但不与Fe3+发生反应。如果根系能将根及范围内Fe3+的还原为Fe2+，则Fe2+便能与菲绕啉生成红色螯合物，从而使具有较强三价铁螯合物还原活性的根的根际范围出现颜色变化。1、缺铁黄叶和正常叶片和空白三个处理，FCR活力染色定位测定；2、通过染色，反应，凝固，振荡，观察反应情况研究的主要内容：1、调查研究不同缺铁处理对FCR活力的影响。2、通过对试验数据的统计、对比分析。为植物缺铁诱导的影响提供参考依据。预期结果：通过对研究FCR酶对苹果叶片及其生长发育影响的研究，完成6000字左右的毕业论文，为生产上对作物生产防治提供有力的理论依据。阶段进度计划序号主要工作内容起止日期备注一二三四查阅文献并完成开题报告试验阶段：试验材料准备和设施、数据调查试验数据的整理统计分析、撰写毕业论文完成毕业论文答辩2013.11.15-2014.1.172014.3.1-2014.5.152014.5.16-2014.5.302014.6.1-2014.6.15指导教师意见：立题目标明确，研究进度计划合理可行。在研究过程注意安排调查时间，保证本调查研究的顺利进展。签名:年月日指导小组审核意见：指导小组负责人签名年月日