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生物分析实验设计方案(1)——紫外分光光度法测定酒中的糠醛一、实验背景(实验目的)糠醛在生产和生活中具有广泛的应用,它可使白酒产生爆烈、特香,可作高品质润湿油的溶剂,因此在酒业制造中大都将其作为辅助添加剂。但是,糠醛对人体存在着健康危害,急性毒性:人经口500mg/kg最小致死剂量。亚急性和慢性毒性:人吸入6.37~45.5ml/m3×3个月,发生粘膜刺激、结膜炎、流泪、头痛.而目前有很多人们嗜酒成性,不了解酒对人体的伤害,我们此次实验旨在测定酒中糠醛的含量,而对那些嗜酒人群敲醒警钟,喝酒要适量及其喝酒限度。二、实验原理糠醛是呋喃2位上的氢原子被醛基取代的衍生物,分子式为C5H4O2,又称2-呋喃甲醛,学名为呋喃甲醛,糠醛是一种有类似杏仁油气味的无色液体,在接触空气时自动氧化而变淡黄色,293.15K时糠醛的相对密度为1.1598,沸点434.85K,在室温下糠醛在水中的溶解度为8.3%,水在糠醛中的溶解度为4.8%。物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的能量,相应的发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子空间结构,其吸收光能情况也是不同。用紫外分光光度计方法,通过与标样的紫外吸光度进行对比,从而测得样品中的糠醛含量。三、实验仪器、试剂及实验材料1、主要仪器:(1)紫外可见分光光度计;(2)100mL棕色容量瓶×2;(3)移液管(5mL,10mL,25mL);(4)10mL比色管;(5)可调电热器;(6)蒸馏装置;(7)移液枪(100ul、1000ul);(8)量筒50ml;2、试剂:(1)无水乙醇(分析纯);注:等到看好无水乙醇的具体信息在填写吧。(2)呋喃甲醛(分析纯);含量99%(分析纯),沸点159.5——162.5°C,密度1.158——1.162g/ml,中国亭新化工厂(上海)。(3)50%无糠醛乙醇溶液:取无水乙醇50mL置于100mL棕色的容量瓶中,加水稀释至刻度;(4)取糠醛1000ul置于100mL棕色的容量瓶中,用50%不含糠醛的乙醇稀释至刻度,摇匀,此溶液浓度为0.01mlPmL;(5)糠醛标准使用液:准确吸取上述贮存溶液(0.01mlPmL的糠醛溶液)0.1mL置于100mL容量瓶中,用50%无糠醛溶液稀释至刻度,浓度为1×10-5ml/ml。⑹酒样:购买的时候贮存在常温柜台,北京红星股份有限公司红星二锅头,56度,清香型白酒。四、实验步骤:1)最大吸收波长的选择分别取不同浓度的糠醛溶液,于紫外分光光度计上测定不同波长下的吸光值。实际结果表明在276nm处显示最大吸收。因此,选择测定波长为276nm。2)标准曲线的制作分别取2.5mL、5.0mL、7.5mL、10.0mL、15.0mL、20.0mL、25.0mL的糠醛标准使用液(浓度为1×10-5ml/ml的糠醛溶液用50%的无糠醛乙醇定容至50ml容量瓶),再取适量置于10mL比色管中,然后用加入50%无糠醛乙醇溶液为空白,测定吸光度。绘制标准曲线。3)样品处理与测定酒样:取酒样5.0mL于50mL容量瓶中,再用50%的无糠醛乙醇定容至50ml容量瓶,充分摇匀,以50%无糠醛乙醇溶液为空白,测定吸光度。4)计算与结果以得的吸光度,从标准曲线中算出糠醛的含量.按下式计算出酒中糠醛的含量糠醛含量(ml)X=(C*V1)/V2式中X:样品中糠醛含量(ug);C:测定样品中糠醛的量(ul);V1:定容容量瓶的体积(ml);V2:取样量(ml)。五、实验安全问题:糠醛危险特性遇明火、高热或与氧化剂接触,有引起燃烧爆炸的危险,受高热分解放出有毒的气体,若遇高热,容器内压增大,有开裂和爆炸的危险。工作现场严禁吸烟、进食和饮水,工作毕,沐浴更衣,保持良好的卫生习惯。急救措施皮肤接触:脱去被污染的衣着,用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤,就医。眼睛接触:立即提起眼睑,用大量流动清水或生理盐水彻底冲洗至少15分钟,就医。吸入:迅速脱离现场至空气新鲜处,保持呼吸道通畅,如呼吸困难,给输氧,如呼吸停止,立即进行人工呼吸,就医。食入:饮足量温水,催吐,就医。灭火方法灭火剂:雾状水、泡沫、二氧化碳、干粉、砂土,用水灭火无效,但可用水保持火场中容器冷却。六、方案可行性分析:本实验的基本知识在上课讨论期间均有涉及,是我们小组各成员比较熟悉的内容,其中所需要的药剂,我们小组经过努力也均已经准备齐全,时间方面,无大变化,预计3个小时是可以完成的,在实验课程要求的范围之内,另外在安全方面我们也已经充分的给予考虑,从药品配制、中途实验、实验结束等中可能出现的意外情况,都准备了应急方案,总之在安全、经济、实验操作上均具有极高的可行性。
本文标题:生物分析大组实验设计方案--紫外分光光度法测定酒中糠醛
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