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(三)灭菌法的几个重要参数指标1.D值——耐热参数2.Z值——灭菌温度系数3.FT值——T温度下的灭菌时间4.F0值——标准灭菌时间5.灭菌率L(Lethalrate)(致死率)1.D值——耐热参数1)定义:将一含微生物的样品在一定的温度下杀菌,当样品中的微生物消灭90%时,所需的时间,又称九成杀灭时间。(Decimalreductiontime)即细菌数减少一个对数单位所需的时间。•描述微生物对热的耐受性。D值定义图:据D值定义,若lgN1-lgN2=1则D=t2-t1==-即D为该直线斜率的负倒数。2112lglgNNtttg12)测定D值•用已知微生物数的悬浮液接种至样品溶液。•取若干个样品,至少用三种不同的时间曝热(在一定的温度下)。•以微生物存活数的对数值为纵坐标,以曝热时间为横坐标作图,得一直线,D值即为该直线的斜率负倒数。3)影响因素•不同微生物具有不同D值。D值越小,证明微生物抗热性越弱。曝热时间较短即可杀灭九成。•同一微生物,曝热温度T越高,D值越低(图3)T↑,lgN下降得快,D小;T↓,lgN下降得慢,D大D1D3D2121℃lgN125℃115℃Ot1•环境条件(介质)(表1)表1介质对D值的影响例:某样品在121℃下曝热3分钟,微生物数由2×105降低至8×103个。求D值。解D===2.146min2112lglgNNtt35108lg102lg32.Z值——灭菌温度系数1)定义:使D值减少90%所需增高的温度。(即D下降一个lg)描述微生物对温度变化的敏感性。2)测定Z值•至少用3个不同温度,分别测出某一个微生物在此三个温度下的D值。•以lgD为纵坐标,温度T为横坐标,画出一直线。•Z值即为此直线斜率负倒数。3)定义图(图4)Z=-==(若△lgD=lgD1-lgD2=1,则Z=T2-T1)lgD2-lgD1=D2/D1=10(T2-T1)/Ztg12112lglgDDTT1221lglgDDTTZTT214)影响因素•不同微生物,有不同Z值。•同一微生物在不同溶液中,Z值不同(表2)Z值越小,斜率越大,→T↑→D值变化大Z值越大,斜率越小,→T↑→D值变化小即Z值越大,此微生物对温度变化的敏感性越弱,企图通过升高温度来加速杀灭微生物的效果就不明显。表2嗜热脂肪杆菌在不同溶液中的Z值例:设Z=10℃,T1=110℃,T2=121℃。试分析T1、T2下的灭菌效果。(10-1.1=0.079)例:设Z=10℃,T1=110℃,T2=121℃。试分析T1、T2下的灭菌效果。(10-1.1=0.079)解:由Z=,可得:10==-1.1=0.079T1=110℃下,灭菌1min与T2=121℃下,灭菌0.079min等效,或=12.6T2=121℃下,灭菌1min与T1=110℃下,灭菌12.6min等效1221lglgDDTT12lglg121110DD12lgDD12DD21DD3.FT值——T温度下的灭菌时间1)定义:在一定的灭菌温度与已知Z值条件下的等效灭菌时间。FT=DT×△lgNDT:T温度时的D值。△lgN:T温度下灭菌程序使微生物下降的对数单位。(图5)若灭菌前微生物总数N0,则在T温度下杀灭至100所需时间为:FT=DTlgN0FT可理解为:灭菌程序赋予被灭菌品在T温度下的灭菌时间。4.F0值——标准灭菌时间在121℃及Z=10℃条件下的等效灭菌时间:F0=D121×△lgN5.灭菌率L(Lethalrate)(致死率)1)定义:指在温度T下,灭菌1min所获得的标准(T=121℃)灭菌时间L=D121/DT2)物理意义温度为121℃时杀灭90%微生物需D121=Amin,温度T时,杀灭90%的微生物需DT=Bmin。即121℃曝热Amin与T℃曝热Bmin的灭菌效力相当。故L=D121/DT表示T℃下曝热1min相当于在121℃下曝热A/Bmin。∵Z=,∴D2/D1=10(T1-T2)/Z令T2=121,T1=T,则L=D121/DT=10T-121/Z………………①∵FT=DT×△lgN,F0=D121×△lgN∴L=D121/DT=F0/FT……………………②∴FT=F0/L……………………………③(表3)由式L=10T-121/Z,可知当Z一定时,T↓→L↓,当T<100℃时,L→0即当温度低于100℃时,L可忽略不计。1221lglgDDTT表3Z=10℃时,不同温度下的灭菌率和T灭菌时间例:T=120℃时,∵Z=∴L==0.794120121121120lglgDDTTZTTDD12112010120121101211201211010121120ZTTTDD6.F0的计算1)理想状态,灭菌过程中升温、降温瞬间完成,灭菌温度恒定不变。则可用公式计算:FT=DT×lgN0,F0=D121×lgN0N0:灭菌前微生物数。2)实际上,一个产品灭菌过程总有三个阶段:升温、保温、冷却。即灭菌过程不是始终在恒定温度下进行。(下图)F0=即把每一时间点的灭菌率L叠加得到F0值,或F0=△t:测定的间隔时间通常取1min。t1:升温达到100℃的时间点。t2:冷却达到100℃的时间点。21)(ttdttL21)(tttLt
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