保健食品功效研究评价

保健食品功效研究评价及申报常见问题分析保健功能•特定保健功能声称•特定人群食用•调节机体功能、抵御环境有害因素、补充营养、缓解某些病理状况•不以治疗疾病为目的保健功能项目1.增加免疫力*2.辅助降血脂3.辅助降血糖4.抗氧化5.辅助改善记忆6.缓解视疲劳7.促进排铅8.清咽9.辅助降血压10.改善睡眠*11.促进泌乳12.缓解体力疲劳*13.提高缺氧耐受力*14.对辐射危害有辅助保护功能*15.减肥16.改善生长发育17.增加骨密度*18.改善营养性贫血19.对化学性肝损伤有辅助保护功能*20.祛痤疮21.祛黄褐斑22.改善皮肤水份23.改善皮肤油份24.调节肠道菌群25.促进消化26.通便27.对胃粘膜有辅助保护功能对受试样品的要求•受试样品的原料组成，物理、化学性质（包括化学结构、纯度、稳定性等）等有关资料•必须是规格化的定型产品，即符合既定的配方、生产工艺及质量标准•经过食品安全性毒理学评价和卫生学检验确认为安全的食品•明确的推荐食用量对受试样品的要求•功能学评价的样品与毒理学评价、卫生学检验的样品必须为同一批次•（安全性毒理学评价和功能学评价实验周期超过受试样品保质期的除外）•应提供功效成分或特征成分、营养成分的名称及含量•如需提供受试样品违禁药物检测报告时，应提交与功能学实验同一批次样品的违禁药物检测报告对给受试样品方式的要求•必须经口给予受试样品、首选灌胃•受试物溶解：溶剂应无毒、不破坏受试物成分，形成相对稳定的均匀液体•受试物配制方法及浓度、给予量与推荐量和剂量设计一致•如无法灌胃则加入饮水或饲料中，应尽可能准确计算各途径受试样品的给予量•测量每日饲料消耗量/饮水量，计算食物利用率对实验动物的要求•各种实验的具体要求，合理选择实验动物•动物的性别、年龄依实验需要进行选择•动物的数量要求为小鼠每组10－15只（单一性别），大鼠每组8－12只（单一性别）•动物应达到清洁级实验动物的要求•动物合格证对给受试样品剂量的要求•至少应设3个剂量组，另设空白对照组，必要时可设模型对照组、阳性对照组•在3个剂量组中，其中一个剂量应相当于人体推荐摄入量（折算为每公斤体重的剂量）的5倍（大鼠）或10倍（小鼠）•最高剂量原则上不得超过人体推荐摄入量的30倍（特殊情况除外）•受试样品的功能实验剂量必须在毒理学评价确定的安全剂量范围之内对给受试样品时间的要求•给受试样品的时间应根据具体实验而定，一般为7－30天•当给予受试样品的时间不足30天而实验结果阴性时，应延长至30天重新进行实验•当给予受试样品的时间超过30天而实验结果仍阴性时，则可终止实验（特殊情况除外）对受试样品处理的要求•受试样品推荐量较大，超过实验动物最大灌胃量时，可考虑适当减少受试样品中的非功效成分的含量•液体受试样品需要浓缩时，应尽可能选择不破坏其功效成分的方法•一般可选择60-70℃减压进行浓缩•浓缩的倍数依具体实验要求而定，应对应原推荐量对含乙醇受试样品处理的要求•对于含乙醇的受试样品，原则上应使用其定型的产品进行功能实验，其三个剂量组的乙醇含量与定型产品相同•如受试样品的推荐量较大，超过动物最大灌胃量时，允许将其进行浓缩，但最终的浓缩液体应恢复原乙醇含量•如乙醇含量超过15%，允许将其含量降至15%。调整受试样品乙醇含量应使用原产品的酒基对以冲泡形式饮用的受试样品处理的要求•使用该受试样品的水提取物进行功能实验•提取的方式应与产品推荐饮用的方式相同•如产品无特殊推荐饮用方式，则采用常压，温度80-90℃，时间30-60min的条件提取•水量为受试样品体积的10倍以上，提取2次，将其合并浓缩至所需浓度对合理设置对照组的要求•以载体和功效成分（或原料）组成的受试样品，当载体本身可能具有相同功能时，应将该载体作为对照例如：•糖对照组•酒基对照组•奶粉对照组兴奋剂检测•缓解体力疲劳•减肥•改善生长发育•辅助降血糖•改善睡眠人体试食试验规程1.辅助降血脂2.辅助降血糖3.抗氧化4.辅助改善记忆5.缓解视疲劳*6.促进排铅7.清咽8.辅助降血压9.促进泌乳10.减肥11.改善生长发育12.改善营养性贫血13.祛痤疮*14.祛黄褐斑*15.改善皮肤水份*16.改善皮肤油份*17.调节肠道菌群18.促进消化19.通便20.对胃粘膜有辅助保护功能对保健食品的要求•提供与试食试验同批次受试样品的卫生学检测报告，其检测结果应符合有关卫生标准的要求•必须已经过动物实验证实，确定其具有需验证的某种特定的保健功能•原则上应在动物功能学实验有效的前提下进行•必须经过动物毒理学安全性评价，并确认为安全的食品。试验前的准备•伦理委员会批准•每组受试者的有效例数不少于50人，且试验的脱离率不得超过15％•志愿受试者应填写参加试验的知情同意书•受试者必须有可靠的病史，以排除可能干扰试验目的的各种因素•人体试食试验应是卫生部认定的保健食品功能学检验机构主持，如需与医院共同实施，必须选择三级甲等医院系统的常规体检•病史•胸透、心电图和腹部B超检查•生理指标（血压、心率等），症状和体征•常规的血液学指标（血红蛋白、红细胞和白细胞计数，必要时做白细胞分类），生化指标（转氨酶、血清蛋白质、白蛋白/球蛋白比值，尿素、肌酐、血脂、血糖等）•各项指标于试验开始及结束时各测定一次（例外情况：儿童，胸透、心电和B超等）增加免疫力试验项目体重脏器/体重比值：胸腺/体重，脾脏/体重•细胞免疫功能测定：小鼠脾淋巴细胞转化实验，迟发型变态反应实验•体液免疫功能测定：抗体生成细胞检测，血清溶血素测定•单核—巨噬细胞功能测定：小鼠碳廓清实验，小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验•NK细胞活性测定增加免疫力结果判定•在细胞免疫功能、体液免疫功能、单核—巨噬细胞功能、NK细胞活性四个方面任两个方面结果阳性•两个实验结果均为阳性，或任一个实验的两个剂量组结果阳性：细胞免疫功能测定，体液免疫功能测定，单核—巨噬细胞功能测定•两个剂量组结果阳性：NK细胞活性测定辅助降血脂动物试验•血清总胆固醇•甘油三酯•高密度脂蛋白胆固醇•根据血清总胆固醇（TC）水平，进行随机分组•模型对照•定期称量体重•高密度脂蛋白•采用方差分析，先进行方差齐性检验辅助降血脂动物试验结果判定•血清总胆固醇和甘油三酯二项指标阳性，可判定该受试样品辅助降血脂动物实验结果阳性•①甘油三酯二个剂量组结果阳性；②甘油三酯一个剂量组结果阳性，同时高密度脂蛋白胆固醇结果阳性，可判定该受试样品辅助降低甘油三酯动物实验结果阳性•①血清总胆固醇二个剂量组结果阳性；②血清总胆固醇一个剂量组结果阳性，同时高密度脂蛋白胆固醇结果阳性，可判定该受试样品辅助降低血清总胆固醇动物实验结果阳性辅助降血脂人体试食试验•血清总胆固醇•甘油三酯•高密度脂蛋白胆固醇•一般状况包括精神、睡眠、饮食、大小便、血压等•血、尿、便常规检查•半年内采血2次•根据血脂随机分组•年龄、性别、饮食等均衡性•受试期间保持平日的生活和饮食习惯•自身和组间两种对照设计•安慰剂或空白对照辅助降血脂人体试验结果判定①血清总胆固醇和甘油三酯二项指标阳性，可判定该受试样品具有辅助降血脂作用；②血清总胆固醇、甘油三酯两项指标中任一项指标阳性，同时高密度脂蛋白胆固醇结果阳性，可判定该受试样品具有辅助降低血清总胆固醇或辅助降低甘油三酯作用辅助降血糖动物实验•体重•空腹血糖•糖耐量•模型动物•正常动物空腹血糖和糖耐量两项指标中一项指标阳性，且对正常动物空腹血糖无影响，即可判定该受试样品辅助降血糖动物实验结果阳性辅助降血糖人体实验•空腹血糖•餐后2小时血糖•尿糖•按血糖随机分组•对病程、服药种类等，进行均衡性检验•18-65岁，纳入标准•安慰剂或空白对照空腹血糖、餐后2小时血糖两项指标中任何一项指标阳性，可判定该受试样品具有辅助降血糖作用空腹和餐后血糖结果判定空腹血糖①试食组自身比较，差异显著，且试验后平均血糖下降≥10％②试食组与对照组比较，血糖值下降或血糖下降百分率差异显著满足上述两个条件餐后2h血糖①试验组自身比较，差异显著，且试验后平均血糖下降≥10％②试食组与对照组比较，血糖值下降或血糖下降百分率差异显著满足上述两个条件抗氧化动物实验•体重•过氧化脂质含量：丙二醛或脂褐质•抗氧化酶活力：超氧化物歧化酶或谷胱甘肽过氧化物酶•D-半乳糖、辐照、溴代苯•过氧化脂质含量中任一指标和抗氧化酶活性中任一指标均为阳性，可判定该受试样品抗氧化动物实验结果阳性抗氧化人体实验•丙二醛•超氧化物歧化酶•谷胱甘肽过氧化物酶•丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶三项实验中二项实验结果阳性，可判定该受试样品具有抗氧化作用•45-65岁•按MDA、SOD、GSH-Px水平随机组，年龄、性别、生活饮食习惯等均衡•各项指标于试验开始及结束时各测定一次（包括胸透、心电图、腹部B超）辅助改善记忆动物实验•体重•跳台实验•避暗实验•穿梭箱实验•水迷宫实验•四项至少选三项•正常动物与记忆障碍模型动物任选其一•重复一次（重新饲养动物，重复所做实验）•跳台实验、避暗实验、穿梭箱实验、水迷宫实验四项实验中任二项实验结果阳性•重复实验结果一致（所重复的同一项实验两次结果均为阳性）•可以判定为该受试样品改善记忆作用动物实验结果阳性•动物年龄与适宜人群辅助改善记忆人体实验•指向记忆•联想学习•图象自由回忆•无意义图形再认•人像特点联系回忆•记忆商•记忆商结果阳性，可判定该受试样品具有辅助改善记忆作用•主试人员必须经过专门的培训，取得结业证书•对照、双盲、随机•组间文化程度、年龄等均衡•对照组必须服用安慰剂（剂型、色泽、外观、口感、包装等均与受试样品相同）•受试者年龄与适宜人群•儿童体检简化，伦理/费用缓解视疲劳人体试食试验•眼部症状•明视持久度•远视力•随机、双盲分组，视力水平均衡•对照组用安慰剂•症状总积分、明视持久度和总有效率明显改善•平均明视持久度提高大于等于10%•可判定该受试样品具有缓解视疲劳的作用促进排铅作用动物实验•体重•血铅•骨铅•肝组织铅•动物模型成立•实验组与模型对照组比较，肝组织铅或骨铅含量明显下降•经统计处理差异有显著性，可判定该受试样品动物实验结果阳性促进排铅作用人体实验•按血铅、尿铅随机分组•铅接触史、年龄、性别等均衡•阳性物、空白或安慰剂对照•尿钙、尿锌•儿童体检简化•24小时尿液样本（可以晨尿代替24小时尿,尿肌酐校正）•试食前后自身比较，尿铅排出量明显增加•试食后，试食组与对照组组间比较，尿铅排出量或总尿铅排出量明显增加•对尿钙、尿锌的排出无明显影响，或尿钙、尿锌排出增加幅度小于尿铅排出增加幅度•可判定该受试样品具有促进排铅作用清咽动物实验•大鼠棉球植入实验•同一实验，所用棉球重量应近似，棉球形状和植入部位的形状一致，以mg（肉芽肿）/100g（体重）表示•大鼠足趾肿胀实验•任选其一•任一时间点刺激前后足跖厚度的差值明显减少，差异有显著性•肉芽肿净量明显下降，差异有显著性•可判定该受试样品动物实验结果阳性清咽人体试食试验•按咽部症状、体征随机分组•病程、年龄、性别等，进行均衡性检验•阳性物或安慰剂对照•咽部临床症状、体征积分明显降低•且症状、体征改善率较对照组有明显增加•差异有显著性•可判定该受试样品具有清咽的作用。辅助降血压动物实验•体重•血压•心率•血压明显低于对照组•对心率和正常动物血压及心率无影响•可判定动物结果阳性•间接测压——尾脉搏法•自发高血压大鼠(SHR)模型，雌雄可以兼用•肾血管型高血压大鼠模型，手术、筛选•停止给予受试样品后，继续观察：血压恢复至对照组水平或7－14天辅助降血压人体实验•体重•血压•心率•达到以下任何一项有效•舒张压下降≥10mmHg或降至正常•收缩压下降≥20mmHg•原发性高血压患者，18-65岁•病程、病情、服药种类、年龄、性别等均衡•安慰剂或空白对照，按血压随机分组•试食组自身比较舒张压或收缩压下降，差异显著平均下降幅度达到有效标准•试食组与对照组比较舒张压或收缩压下降，差异显著舒张压或收缩压下降百分率差异显著•满足上述两条，功效阳性改善睡眠动物实验模型动物•戊巴比妥纳睡眠时间•戊巴比妥钠(或巴比妥