幽门螺杆菌检测系统芯片介绍(医学知识)（PPT45页)

幽门螺杆菌IgG抗体分型检测系统泰州欣康基因数码科技有限公司幽门螺杆菌的认知11982年4月，Warren和Marshall发现并分离出幽门螺杆菌（HelicobacterPylori;HP）；HP是一种微厌氧、对生长要求十分苛刻的革兰氏阴性杆菌，体内呈螺旋状，体外呈杆状；HP位于胃黏膜上皮表面、胃小弯或小弯之间，在胃窦部多见；鞭毛在运动中起推进器作用，在定居过程中起抛锚作用；幽门螺杆菌的发现幽门螺杆菌幽门螺杆菌的发现2005年澳大利亚科学家BarryJ.Marshall和J.RobinWarren，因为发现了导致胃炎和胃溃疡的细菌-幽门螺杆菌而获得诺贝尔奖，委员会在授奖时说：由于幽门螺杆菌的发现，使得原本慢性的、经常无药可救的胃溃疡变成了只需抗生素和一些其他药物短期就可治愈的疾病。BarryJ.MarshallRobinWarren（HelicobacterPylori;HP）一美国/加拿大30-40%拉丁美洲70-90%西欧30-50%非洲70-90%澳大利亚20%亚洲70-80%东欧70-90%世界范围内幽门螺旋杆菌感染现状Hp在全球的人群的感染率均很高；其中发展中国家的感染率远超发达国家；Hp在亚洲人群的感染率超过40%-80%；幽门螺杆菌感染亚洲现状华东地区--------59.36%华南地区----------50.08%58.27%--------华西地区华北地区---------46.84%华中地区-------------66.26%我国感染率超过40%-70%左右；幽门螺杆菌中国感染现状人与人的直接和间接接触传播：发达国家，口-口传播的可能性大；发展中国家，则以粪-口传播为主；医源性传播：胃镜吸引阀、活检孔道及活检钳可分离出Hp；患者胃镜检查次数越多，Hp阳性率越高；Hp的传播方式H.pylori致病机制2H.pylori进入机体定植于胃上皮细胞刺激机体释放各种细胞因子胃粘膜炎症、坏死和免疫反应胃泌素和生长抑素调节失衡胃酸分泌异常胃部疾病幽门螺杆菌侵袭性感染进程幽门螺杆菌侵袭性感染进程毒素胃泌素生长抑素宿主胃粘膜损伤直接免疫反应失衡Hp定值胃酸分泌异常Hp致病因素Hp产生的尿素酶（Ure）能将尿素分解为氨和二氧化碳，氨在Hp周围形成“氨云”，影响胃壁细胞表面的局部微环境，形成细胞损伤；Hp能够产生细胞毒素：空泡细胞毒素（VacA）细胞毒素相关基因A蛋白(CagA)；90%的十二指肠溃疡和80%的胃溃疡都是由HP引起的，同时与胃癌的发生密切相关，1994年世界卫生组织已将HP定为Ⅰ类致癌因子；Hp的致病因素主要：尿素酶细胞毒素鞭毛粘附素超氧化物歧化酶活性氧细胞因子VacA：是对上皮细胞有害的细胞毒素，称之为空泡毒素，存在于细胞的外壁，可使上皮细胞因空泡形成而遭受破坏。CagA：细胞毒素相关基因A蛋白，可影响细胞毒素的表达。有研究证实：含CagA单克隆抗体阳性者比阴性者，患胃癌的危险性高4倍。Hp的致病因素细胞毒素CagA、VacA被认为Hp最重要的致病因子：CagA细胞密度胃上皮损伤IL-8分泌炎症改变胃酸分泌诱变剂更快的发展成萎缩性胃炎胃溃疡发生的危险性胃癌发生的危险性胃黏膜相关性淋巴组织（MALT）淋巴瘤：早期根除HP，胃MALT淋巴瘤可以缩小或消失；根除Hp已成为Hp阳性低级别胃MALT淋巴瘤的一线治疗方法。胃癌：世界卫生组织已将HP列为Ⅰ类致癌因子；HP感染率与胃癌发生率明显正相关；HP主要定植部位与胃癌好发部位一致；慢性胃炎：浅表性胃炎；弥漫性胃窦炎；多灶性萎缩性胃炎；HP持续感染，浅表性胃炎可发展为萎缩性胃炎、肠上皮化生和非典型增生（上皮内瘤变），上述病变都属于癌前病变；消化性溃疡：HP的发现是消化性溃疡在发病机制及病因学的革命；“没有胃酸就没有溃疡”；“没有HP就没有溃疡和溃疡复发”；HP与消化系统疾病心脑血管疾病：冠状动脉硬化性心脏病（CHD）；缺血性心脏病；脑血管疾病，中风等；偏头痛和原发雷诺现象；血液系统疾病：缺铁性贫血；特发性血小板减少性紫癜；白血病；代谢性疾病肥胖、糖尿病等；幽门螺杆菌与胃外疾病自身免疫性疾病类风湿性关节炎、自身免疫性甲状腺炎；干燥综合征等；呼吸系统疾病慢性阻塞性肺疾病（COPD）；支气管扩张；精神性疾病自闭症、抑郁症等；皮肤病慢性荨麻疹；食物过敏；酒槽鼻；•Maastricht-Ⅳ国际共识中提出HP感染与不明原因缺铁性贫血、特发性血小板减少性紫癜症、维生素B12缺乏等等相关性；•近几年，关于HP感染与其他疾病的发生，也受了很多重视，如肝胆疾病、脑血管病、皮肤病等等。H.pylori根除治疗及存在问题3•幽门螺杆菌胃炎是一种感染性疾病—传染病•幽门螺杆菌胃炎无论有无症状、伴或不伴有消化性溃疡和胃癌，均应该定义为一种感染性疾病•根除幽门螺杆菌治疗是改善消化不良症状的一线治疗方案•所有感染幽门螺杆菌的个体都需要接受根除治疗17三联疗法四联疗法序贯疗法复合疗法治疗策略PPIs+两种抗生素PPIs+两种抗生素+铋剂PPIs+两种抗生素7天PPIs+另外两种抗生素14天四联疗法为基础中药辅助治疗微生物辅助治疗抗生素+PPIs为基础的治疗策略根除幽门螺杆菌中的临床问题随着Hp耐药率的上升，标准三联疗法(PPI+克拉霉素+阿莫西林或PPI+克拉霉素+甲硝唑)的根除率已低于或远低于80%。推荐用于根除治疗中抗菌药物，甲硝唑耐药率60%～70%，克拉霉素达20%～38%，左氧氟沙星达30%～38%，耐药显著影响根除率;此外抗生素使用的副作用，不良反应发生率高，进而导致患者依从性差；抗生素的耐药抗生素的副作用抗生素的滥用根治HP治疗方案的难点根除幽门螺杆菌中难点“发现即根除”策略是否适合我国？•高Hp感染率：Hp感染率超过50%，引起胃癌患者只占1%？Hp都是有害菌吗？过分根除是否会引发菌群紊乱？21临床根除幽门螺杆菌的思考H.pylori分型检测的重要意义4精准治疗+个体化治疗应对措施解决问题的办法医生：有明确适应症再使用抗生素；•精准诊断：•查明致病病原体；•辨别有效抗生素；•精准治疗：制定个体化精准治疗方案；•病情跟踪；•抗生素疗效跟踪；患者：正确选择抗生素药物和治疗方式；•普及合理使用抗生素知识；精准诊断准确检测/诊断幽门螺杆菌的重要性幽门螺杆菌的研究是胃肠道领域最热门的研究课题：1999年，第一次全国幽门螺杆菌专家共识会在海南召开；“1999海南共识”2000年，“中华医学会消化疾病分会幽门螺杆菌学组”正式成立；香港大学玛丽医院林兆鑫教授指出：“越来越广泛的检测和治疗HP感染的过程中，出现的第二个问题就是耐药性和感染复发率”；中华医学会消化学会、全国幽门螺杆菌学组副组长胡伏莲教授在“中国幽门螺杆菌研究现状”中指出：“HP耐药性是HP根除失败的主要原因”；幽门螺杆菌的清除中外要有别，中国的清除计划要依据中国国情来建立，不能盲目参照国外方案！在中国，幽门螺旋杆菌的分型性剖析非常重要。幽门螺杆菌共识H.pylori的毒力因子与分型H.pylori菌株的基因型多态性与其致病性有密切的关系，其中最主要的是空泡毒素A(vacA)和细胞毒相关基因(cagA)蛋白。H.pylori的检测分型根据是否表达VacA、CagA抗体，将H.pylori分为:Ⅰ型(VacA/CagA抗体阳性),Ⅱ型（VacA、CagA抗体阴性)。Hp分离细菌致病不致病Ⅰ型有毒株Ⅱ型无毒株检测CagA、VacA有无H.pylori的毒力分型与致病性的关系国内外研究表明，95％的十二指肠溃疡、75％的胃溃疡病人、80％以上的胃癌病人感染的是CagA阳性I型H.pylori。幽门螺杆菌IgG抗体分型检测系统——泰州欣康基因数码科技有限公司52016跨越获幽门螺旋杆菌三类医疗器械注册证，6项产品专利；泰州欣康基因数码科技有限公司坐落于中国国家级医药高新科技园区——江苏泰州中国医药城，成立于2012年2月，是一家集研发、生产、销售和服务于一体的生物高新科技创新企业。公司所生产的组合式生物芯片获得了行业最高级别的知识产权奖项——中国专利金奖和联合国世界知识产权组织金奖。2012坚持获斑点试验芯室一类注册证、医疗器械生产许可证；2013发展检测仪器获得医疗器械二类注册证、一项产品专利；2014创新获得三项产品专利；2015认证取得ISO13485体系认证证书，4个一类注册证，5项产品专利；公司介绍2012成立国内首批进行生物芯片研发、生产及销售的高新技术企业；系统构成幽门螺杆菌检测芯片蛋白生物芯片阅读仪数据报告所生产的组合式生物芯片获得了行业最高级别的知识产权奖项——中国专利金奖和联合国世界知识产权组织金奖，同时取得两项实用新型专利。产品质量体系认证研发技术团队闫小君原中国人民解放军第四军医大学教授，博士生导师。是国内最早从事基因诊断技术研发和产业化的科学家之一，研发的组合式生物芯片制备技术，获2005年国家发明专利金奖及世界知识产权组织金奖，这是迄今我国生物芯片研究领域所获得的级别最高的知识产权奖项。任泰州欣康基因数码科技公司首席科学家。采用微量点样等方法，将大量生物大分子有序地固化于硝酸纤维膜表面；生物大分子组成密集二维分子排列；生物大分子与待测物结构形成抗体复合物，并显色；电荷偶联摄影像机（CCD）对杂交信号的强度进行快速分析；判断待测样品中靶分子的数量；芯片原理35尿素酶（Ure）细胞毒素相关蛋白A(CagA)细胞毒素相关基因A蛋白，可影响细胞毒素的表达，诱导宿主胃粘膜局部产生多种细胞因子。血清中检测到GagA抗体是Hp感染的一个高度特异性标志，在慢性胃炎、胃和十二指肠溃疡、胃癌中，CagA抗体的阳性率分别可以高达67.54%、73.17%、9.00%、53.33%。VacA因其可致细胞空泡变性而得名，与消化性溃疡密切相关，从消化性溃疡患者分离到VacA阳性菌株的频率比慢性胃炎高。细胞空泡毒素A蛋白（VacA）Hp蛋白芯片筛查项目尿素酶是Hp主要抗原之一，也是Hp感染后诱导胃粘膜炎症反应的重要诱发因子之一，所有的野生型的Hp都产生尿素酶，Hp是人胃内产生高活性尿素酶的唯一菌株，可以引起Hp感染患者的血清中抗HpIgG和IgA的滴度显著升高，因此可以确定是否存在Hp感染，并可以判定感染严重程度和抗Hp疗效。指导临床合理用药分型意义CagAVacAUre临床意义Ⅰ型有感染有毒性+++重度感染致病菌，建议进行根除治疗++-重度感染致病菌，建议进行根除治疗+-+感染致病菌，建议根据临床症状用药进行根除治疗-+-感染致病菌，建议根据临床症状用药进行根除治疗+--感染致病菌，建议根据临床症状用药进行根除治疗-+-感染致病菌，建议根据临床症状用药进行根除治疗Ⅱ型有感染无毒性--+低毒力株感染，建议进行密切观察，根据临床症状及患者个人意愿进行选择性治疗阴性无感染无毒性---无感染人群分型检测，细分患者类型，服务于临床精准治疗和个体化治疗；指导临床合理用药，打击抗生素滥用，建立行业金标准；Hp抗体分型检测的重要意义1分型检测：实现联合检测幽门螺杆菌CagA、VacA、Ure3种毒力因子的特异性抗原检测，将感染Hp患者细分为Ⅰ型和Ⅱ型，精准检测，指导临床合理用药，打击抗生素滥用，建立行业金标准；2实现对胃内相关疾病的诊断：对浅表性胃炎、萎缩性胃炎、胃、十二指肠溃疡及胃癌诊治有较高的参考价值；3指导胃外相关疾病的早期诊断：对胃外相关疾病如血液系统疾病、心脑血管疾病、呼吸道疾病等、自身免疫系统疾病的早期发现，早期治疗提供有价值的临床数据。方法分类侵入法（依赖内镜活检法）组织细胞学方法光镜法电镜法微生物学方法直接镜检快速尿素酶实验分离培养非侵入法（非内镜依赖法）同位素示踪方法13C、14C呼气试验15N-尿素排出试验血清学方法抗体检测分子生物学方法PCR临床常用HP检测方法比较公司名称检测项目检测方法检测时间检测样本检测优势泰州欣康基因数码科技有限公司尿素酶（Ure）血清学方法——蛋白芯片法5-