猪抗原抗体检测方案

猪抗原抗体检测方案辰丰生物检测的目的1．疾病预警（1）了解疾病在场内的污染状况，制定相应策略（2）提前了解免疫抗体的高低及整齐度，及时纠正2．免疫程序的评估与优化（1）了解母源抗体的消长情况（2）疫苗接种的效果-----免疫抗体监控3．疾病控制和清除计划：通过系统检测和措施，实施疾病的控制或清除计划4．疾病诊断重点进行监测四大猪病：猪瘟、蓝耳、伪狂犬、圆环1.猪瘟主要问题（1）抗体水平偏低（2）疫苗的选择及剂量：细胞苗？脾淋苗？，150RID=37PD50（3）持续性感染猪的存在猪瘟抗原检测（1）常用方法：PCR、荧光抗体和ELISA（2）检测目的：引进种猪或后备母猪时的检查，疑似病例的确诊，猪群带毒率的定期评估（3）结果分析：猪瘟抗原ELISA阳性结果代表野毒阳性，PCR和荧光抗体阳性结果有可能是疫苗毒的干扰。猪瘟抗体ELISA检测要点:A.怎样评估母源抗体和免疫效果1）当母源抗体的降到阻断率（Block）50%以下时，才能不干扰疫苗的免疫。（确定首免日龄）2）免疫后阻断率（Block）上升到50%以上才能代表免疫合格。良好的种猪场要求：阳性率100%（40），合格率90%（50）cv25%）CSFV判定标准:若%PC值大于或等于0.4则判定阳性；若PC%值小于0.4则判定阴性表1：猪血清CSFV抗体检测结果编号OD值阻断率结果63060.3470.625+58410.2770.718+58050.2180.797+37110.1720.858+保10.1590.875+后备0.6990.157-阴性对照0.818成立0.817阴性平均值0.8175阳性对照0.073成立0.057阳性平均值0.065CSFV判定标准:若%PC值大于或等于0.4则判定阳性；若PC%值小于0.4则判定阴性B.剔除持续感染猪或无抗体反应猪1）持续性感染的种猪可间断性或持续性排出病毒，他们成为整个猪群的感染源。2）首次使用应对母猪群进行检测，对抗体低下猪只进行补针后6周复检。若仍然没有抗体产生，应进行淘汰。C.猪瘟抗体检测结果分析1）Cutoff值是1：16代表抗体阳性2）实际生产中至少要在1：64以上才有一定的保护，经产母猪多次疫苗免疫后抗体水平一般会在1：256到1：1024左右波动。D.猪瘟抗体ELISA检测时间表品项种类时间目的取样数量日常评估后备母猪在配种前野毒感染和抗体水平全部经产母猪3个月一次个月一次评估母猪群的健康状态和抵抗力20商品猪二免后4-6周4-6周监控免疫效果20首免日龄仔猪21日龄日龄评估母源抗体衰减水平，选择最佳首免时间1528日龄日龄1535日龄日龄1542日龄日龄15蓝耳病的主要问题（1）毒株的变异与交叉保护（2）疫苗的选择：灭活疫苗、弱毒疫苗、毒株（3）猪群稳定性评估蓝耳病的检测方法（1）抗原：RT-PCR（2）抗体：ELISA蓝耳病的抗体检测结果分析（1）对于稳定的种猪群，S/P值为0-2左右，很少大于2.5.（2）良好免疫群的典型的S/P比值范围为：0.7to1.8；有些可能2.0。（3）如果每年免疫两次，仍有多于20％的猪抗体为阴性，需要对疫苗的管理和使用进行检查。（4）当S/P2.5–病毒血症（5）当S/P3.5-高于5.0–急性感染蓝耳病的抗体检测结果分析（6）6-7周龄时，多数仔猪抗体可变为阴性（无病毒循环）（7）引进种猪，要剔出阳性值SP1.2的猪只，保证种群的稳定（8）公猪抗体阳性值SP2.5的最好不要使用（9）母猪群间隔1-2个月对群体进行监控，了解猪群等稳定状态（10）仔猪了解病毒的感染时间，加强药物保健（11）当S/P2.5时，猪群即呈现不稳定状态，需要采取措施进行控制稳定性标准非免猪稳定S/P≤1.0者比例≥90%者比例≥90%非免猪不稳定S/P1.0者比例90%免疫猪稳定S/P≤2.0者比例≥90%者比例≥90%免疫猪不稳定S/P2.0者比例90%PRRSV判定标准:S/P值大于等于0.4判定为阳性；S/P值小于0.4判定为阴性编号OD值S/P值结果原种场一场520.5050.652+原种场一场540.5320.693+原种场一场580.9471.322+原种场一场660.3240.378-原种场一场610.2450.258-原种场一场680.2310.237-原种场一场712.4494.171+原种场一场751.8862.746+阴性对照0.072成立0.078阴性平均值0.075阳性对照0.735成立0.734阳性平均值0.7345蓝耳病抗体检测时间表品项种类时间目的取样数量日常评估后备母猪在配种前防止引入不稳定猪只全部经产母猪2个月一次个月一次了解猪群稳定性20商品猪3个月一次个月一次监控免疫效果和稳定性20伪狂犬的主要问题（1）种猪群野毒抗体（gE抗体）阳性率居高不下（2）中大猪的呼吸道问题（3）散发性母猪繁殖障碍（4）净化方案的选择伪狂犬的检测方法（1）PRVgB：总抗体，S/N值和阻断率（BLOCK值）（2）PRVgE（I）：野毒抗体（3）通过PRV-gB和PRV-gI抗体检测可了解本场伪狂犬病的流行状况，制定相应的免疫方案及措施。伪狂犬清除计划（1）在阳性率低的种猪群，建议一次性淘汰所有阳性种猪。每个季度筛选一次，加强疫苗免疫，同时保证引入阴性后备母猪和种公猪，一般一年见效。（2）在阳性率很高的种猪群，保证引入阴性后备母猪和种公猪，加强免疫。每季度抽样监控野毒阳性比例防止感染扩大并用PRV-gB评估免疫抗体水平，三年可见效。编号OD值S/N值结果保育（50日龄）0.0490.030+哺乳0.0610.037+保育（36日龄）0.7760.476+哺乳0.0770.047+空怀0.040.025+空怀0.0430.026+妊娠0.0470.029+妊娠0.0250.015+后备1.5670.962-后备1.5570.956-阴性对照1.629+阳性对照0.073+PRV-gI判定标准:若S/N值小于等于0.6则判定为阳性；若S/N大于0.6则判定为阴性伪狂犬检测时间表品项种类时间目的取样数量日常评估后备母猪在配种前野毒感染和抗体水平（gB和gE抗体）gB和gE抗体）全部经产母猪3个月一次个月一次评估母猪群的健康状态和抵抗力（gB和gE抗体）gB和gE抗体）20商品猪免疫后4周4周监控免疫效果（gB抗体）gB抗体）20首免日龄仔猪70-80日龄免疫前日龄免疫前评估母源抗体衰减水平，选择最佳首免时间（gB抗体）gB抗体）15圆环病毒编号OD值S/P值结果后备2.0223.577+后备1.8153.197+妊娠0.9931.686+妊娠1.3682.375+空怀1.3042.257+空怀2.0463.621+哺乳1.3442.331+保育（36日龄）0.230.283-保育（50日龄）2.2033.910+哺乳0.4780.739+阴性对照0.0760.000-阳性对照0.621.000+PCV2判定标准:若S/P值大于0.4则判定为阳性；若S/P小于0.4或大于0.3为可疑；若S/P小于0.3则判定为阴性0.42OD值1为中度感染，OD值1为重度感染，OD值0.42为安全圆环病毒PCV2判定标准:若S/P值大于0.4则判定为阳性；若S/P小于0.4或大于0.3为可疑；若S/P小于0.3则判定为阴性0.42OD值1为中度感染，OD值1为重度感染，OD值0.42为安全编号OD值S/P值结果原种场一场521.2682.237+原种场一场541.9573.525+原种场一场581.312.316+原种场一场661.7053.054+原种场一场611.7533.144+原种场一场681.2372.179+原种场一场711.3262.346+原种场一场751.9013.421+阴性对照0.064成立0.078阴性平均值0.071阳性对照0.577成立0.635阳性平均值0.606