药物第十九章中药制剂分析

第十九章第十九章中药及其制剂分析概论紫外分光光度法测定片剂含量：精密称取片剂10片，重量为3.5622g，研细。取上述片粉适量，精密称定重量为：0.0433g，置250ml量瓶中，加规定剂量使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置100ml容量瓶中，加规定溶剂稀释至刻度，摇匀，在257nm处测定溶液的吸光度为0.485.已知：药物吸收系数（E1cm)为715，片剂标示量为每片0.30g)以中医药理论为指导，运用现代分析理论和方法，研究中药材和饮片、提取物和中药制剂质量的一门应用学科。与化学药物比较，难度较大，问题较多，更具挑战性（一）成分复杂，干扰性较大，供试品（溶液）制备困难，多需复杂的预处理。（二）杂质及有害物质易混入，纯度检查工作量较大。（三）被检成分多样且含量较低，多采用现代分析技术，如各种色谱法和光谱法。（四）目前尚有相当多的制剂有效成分（指标性成分）不明确，缺乏客观的内在质量标准，需积极开展药检科研工作，全面提高中成药检验工作水平，故更具挑战性。《中国药典》2010年版中药标准增修订内容介绍建立符合中医药特色、评价中药质量的完整体系，是中药现代化发展的关键2010版《中国药典》一部药典编排格式•凡例•正文•附录2010版药典标准正文内容—药材和饮片名称来源饮片【性状】【炮制】【鉴别】------【检查】【性味与归经】【浸出物】【功能与主治】【含量测定】【用法与用量】【贮藏】2010版药典标准正文内容—中成药药品名称【处方】【制法】【性状】【鉴别】【检查】【含量测定】【功能与主治】【用法与用量】【规格】【贮藏】1.品种大幅增加2010版药典一部品种和项目收载总体情况2、首次明确了中成药处方入药者均为“饮片”，解决了长期以来配方和投料究竟是使用药材还是使饮片的问题。饮片系指药材经过炮制后可直接用于中医临床或制剂生产使用的处方药品3、中药质量标准更符合中药特色（1）专属性鉴别：建立、完善薄层色谱鉴别（2）专属性检测：根据中药具有多组分、多靶点、相互协同作用的特点，尤其是中药复方制剂更是如此，建立多成分、多组份的含量测定方法控制和评价中药的质量。•2010版药典成方制剂中测定二种以上药味含量的有159个品种，•测定二种以上成分总量或含量的达到258个品种。（3）指纹图谱、特征图谱的应用•采用了先进的指纹图谱和特征图谱检测技术，更好的控制中药整体质量的变化和均一程度，较全面的控制中药质量的稳定性和有效性。结合专属性鉴别和多指标成分定量分析，是全面控制中药质量的可行模式，符合中医理论的整体观。5.010.015.020.025.030.0min0255075100mAU10.5010.7511.0011.2511.5011.75MPaA.Press.(Status)248nm,4nm(1.00)123456S6、金雀异黄素S、5-甲基蜂蜜曲菌素乌灵胶囊样品色谱图4、新方法、新技术应用（1）聚合酶链式反应法鉴别饮片：乌梢蛇、蕲蛇（2）薄层-生物自显影技术法鉴别地黄、熟地黄（检测成分：毛蕊花糖苷；显色剂：0.1%2，2-2苯基-1-苦肼基无水乙醇溶液）（3）液相色谱-质谱联用限量及定量技术千里光•国际上因其有肝肾毒性和胚胎毒性等而禁用。•国内多种中成药中含有千里光，致使出口骤停。•中国产千里光药材中adonifoline（吡咯里西啶生物碱）含量相对较低或几乎没有•该化合物结构上无生色团，常规方法无法测定5.中药安全性评价更受重视•在标准中大幅度增加或完善安全性检查项目，进一步加强对重金属及有害元素、有害成分、树脂残留等的控制，加强了有害物质的检测，使标准的安全性控制加强。重金属检测标准的研究大孔吸附树脂有机残留物检测标准的研究毒性成分的限量控制雄黄、朱砂中有害成分的控制强化中药注射剂的安全性控制一部附录新增了异常毒性检查法、溶血与凝聚检查法、降压物质检查法、过敏反应检查法以及渗透压摩尔浓度测定法等5个附录方法，提高对中药注射剂品种的安全性控制技术要求如：注射用灯盏花素相关物质、注射剂有关物质、异常毒性、降压物质、过敏反应、溶血与凝聚检查增补本将对中药注射剂剂中的铅、镉、汞、砷、铜分别进行了的限定，改变过去仅仅笼统地测定重金属总量的质量控制方式•有毒成分（也是有效成分）含量测定均制定了含量上下限度。•处方中含化学药的品种均建立化学药成分的含量测定并制定含量限度范围。•如：维Ｃ银翘片测定处方中的化学药维生素Ｃ、对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏，均按标示量计（一）中药及其制剂的生产和使用有中医理论的指导第一节概述一、中药的特色与分析特点和对策•中药是以中医药学理论体系的术语表达其性味、功效和使用规律，并且按中医药学理论指导其临床应用的传统药物。•整体观是中医理论体系中的重要概念中药药效的发挥是多种成分协同作用的结果，因此应从整体（物质群）上来控制中药的质量。分析对策：1.运用整体理论对中药进行化学成分的定性轮廓分析。指纹图谱注射用双黄连指纹图谱2.运用“君臣佐使”理论对制剂中君药及贵重药的主要成分进行分析。首选君药、贵重药和毒剧药建立分析方法。例：补脾益肠丸（18味药）的含量测定：白芍（芍药苷）、补骨脂（补骨脂素、异补骨脂素）3.运用中药药性理论，针对中药药性的化学表征发展科学的分析方法例：生物热动力学法定性、定量表示寒、热、温、凉（二）中药及其制剂的质量有多环节多因素的影响产地、生长环境、采收季节、加工炮制、生产工艺、包装运输、储藏等因素对策：健全科学的中药质量分析体系，对每个环节进行全面质量控制例：板蓝根、复方丹参片等质量标准（三）中药及其制剂成份有复杂多变的特点。1.单一植物中含多类不同结构的多种成分人参皂苷不能仅以某一成分或某类成分进行分析对策：指纹图谱2.不同来源中药的同一待测成分含量差异显著来源、产地、采收期、生长年限与不同部位对策：取样的科学性3.中药在煎煮炮制和制剂过程中化学成分有量和质的变化在确定目标成分及分析方法时要充分考虑。（四）中药不同工艺和不同制剂中同一成分的质量标准有不同要求针对性制定质量标准二、中药及其制剂的分类与质量分析要点中药材和饮片、植物油脂和提取物、成方制剂与单味制剂（一）中药材和饮片化学显色反应、沉淀反应、光谱鉴别不适于中药鉴别。含量测定提倡推广指纹图谱、特征图谱（二）植物油脂和提取物含量达90%以上的单一有效成分（三）中药成方与单方制剂1、丸剂指药材细粉或药材提取物加适宜的黏合剂或其他辅料制成球形或类球形制剂，分为蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、浓缩丸、蜡丸、微丸等。检查项目水分、重量差异装量差异(按一次剂量分装的)溶散时限、微生物限度水分规定大蜜丸、小蜜丸、浓缩蜜丸≤15.0%水蜜丸、浓缩水蜜丸≤12.0%水丸、糊丸、浓缩水丸≤9.0%装量差异高低溶散时限6丸，照崩解时限检查法%限量标示装量装量瓶每袋2、散剂一种或多种药材混合制成的粉末状制剂，分内服和外用散剂。检查项目外观均匀度水分：≤9.0%装量差异（单剂量）微生物限度均匀度取供试品适量置光滑纸上，平铺约5cm2，将其表面压平，在亮处观察，应呈现均匀的色泽，无花纹、色斑。3、颗粒剂药材提取物与适宜辅料或药材细粉制成的颗粒状制剂，分为可溶性颗粒剂、混悬性颗粒剂、泡腾性颗粒剂。检查项目粒度水分≤6.0%溶化性装量差异微生物限度粒度＞1号筛＜5号筛≤15.0%(左右轻轻往返3分钟)溶化性溶化搅拌热水5ml20010gpH装量相对密度微生物限度一般检查项目4、合剂与口服液合剂系指药材用水或其他溶剂，采用适宜方法提取，经浓缩制成的内服液体制剂，单剂量合剂也可称为“口服液”。5、其他中药制剂酒剂、酊剂、煎膏剂、贴膏剂片剂、胶囊、注射剂酒剂与酊剂酒剂酊剂含乙醇量（GC）甲醇量检查（GC）总固体最低装量微生物限度一般检查项目药材用蒸馏酒提取制成的澄清液体制剂药物用规定浓度的乙醇提取或溶解而制成的澄清液体制剂注射剂•药材经提取、纯化后制成的供注入体内的溶液、乳状液及供临用前配置成溶液的粉末或浓溶液的无菌制剂。•在固定中药材品种、产地和采收期的前提下，需制订中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。中药制剂分析的一般程序取样鉴别含量测定检查提取纯化样品制备（一）取样与样品保存取样原则：代表性（均匀、合理）取样方法：中药材取样法中药制剂取样法三、中药分析用样品制备方法中药材取样法：1.取样前的检查2.从同批药材包件中抽取供检验用样品的原则不足５件的，逐件取样5~99，取5件100--1000件的，按5％取样超过1000件的，超过部分按1％取样贵重药材不论件数多少，均逐件取样3.取样方法和取样量一般包件的取样量一般生药100-500克粉末状生药25-50克贵重生药5-10克“四分法”再取样一般所得样品不得少于做一次全面检查用量的３倍中药制剂取样法1、粉末状中药制剂100g2、液体制剂200ml3、固体中成药片剂200片、100g、丸剂10丸、胶囊20个4、注射剂取样两次；取200支（二）中药分析用样品的制备（1）样品的提取1.超声提取法利用超声波的助溶作用进行提取简便，省时，提取率高冷浸法样品置溶剂里，室温下浸泡一段时间的提取方法。亲脂性←→亲水性石油醚苯氯仿乙醚乙酸乙酯丙酮乙醇甲醇水2.回流提取法样品置有机溶剂中加热回流的提取方法。加快溶出速度，省时适宜受热稳定的药物适宜较难溶出的组分特点仪器普通回流装置3.连续回流提取法样品置有机溶剂中加热，蒸发的溶剂经冷凝流回样品管的提取方法。节省溶剂，提高提取效率适宜受热稳定的药物费时特点仪器索氏提取器4.萃取法利用溶质在两种互不相溶的溶剂中溶解度的不同，使物质从一种溶剂转移到另一种溶剂中，将测定组分提取出来的方法正丁醇——用于皂苷类醋酸乙酯——用于黄酮类氯仿——用于生物碱类乙醚、石油醚——用于挥发油萃取溶剂的选择水相pH的选择酸性成分——比其pKa低1~2个pH单位碱性成分——比其pKa高1~2个pH单位仪器和提取次数酒剂和酊剂——先挥去乙醇防止和消除乳化分液漏斗鉴别——1次含量测定——3~4次5.水蒸气蒸馏法适用于具有挥发性的可随水蒸气蒸出的组分的测定。麻黄碱、槟榔碱、丹皮酚、挥发油等超临界：当压力和温度超过气体的临界点时所形成的单一相态。超临界流体：是一种处于超临界点之上的流体，是介于气体与液体之间的一种物相，兼有气体与液体的一些特性。如CO2：31℃，7390kpa6.超临界流体萃取法（SFE法）超临界流体萃取与化学法萃取相比有以下突出的优点：（1）它具有与液体相似的密度，因而具有与液体相似的较强的溶解能力；（2）溶质在流体中的扩散系数与气体相似，具有传质快，提取时间短的优点；（3）超临界流体的表面张力为零，易渗透到样品中，带走测定组分；（4）超临界流体在通常状态下为气体，萃取后溶剂可立即变成气体而逸出，易达到浓集的目的；（5）CO2是一种不活泼的气体,萃取过程不发生化学反应,且属于不燃性气体，无味、无臭、无毒，故安全性好；（6）CO2价格便宜，纯度高，容易取得，且在生产过程中循环使用，从而降低成本；（7）CO2对极性组分的溶解性较差。可加入适量的有机溶剂作为改性剂，如甲醇、氯仿。（2）样品的分离和纯化柱色谱法（固相萃取法）（1）保留测定组分在柱上，洗去杂质，再用适当溶剂洗下组分（2）保留杂质于柱上。步骤：上样----淋洗------洗脱固相萃取柱和固相萃取仪•性状鉴别•显微鉴别•理化鉴别中药制剂的鉴别包括：第二节：中药的鉴别中药及其制剂的鉴别药味的选取原则1.单味制剂2.中药复方制剂3.选择尽量多的药味进行鉴别(超过1/3)一、性状鉴别•性状鉴别的内容–颜色–形状–气、味–表面特征–质地方面–其他§2显微鉴别•显微鉴别是利用显微镜直接观察药材（饮片）切片、粉末、解离组织或表面制片及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别。注意：处方中的主要药味及化学成分不清楚或尚无化学鉴别方法的药味，应做显微鉴别。处方中多味药物共同具有的显微特征不能作为定性的鉴别方法。六味地黄丸粉末显微特征图三、理化鉴别理化鉴别：用物理