中草药替代抗生素对淡水养殖鱼类常规致病菌抑菌研究进展

中草药替代抗生素对淡水养殖鱼类常规致病菌抗菌研究进展——读书报告三旺集团技术中心主要内容中草药替代抗生素及其抗菌研究的意义1现阶段中草药抗菌的研究成果2中草药替代抗生素研究中存在的问题和未来趋势3学习意义4中草药替代抗生素及其抗菌研究的意义•抗生素产生了诸多问题：–抗生素耐药性：细菌耐药性提高，导致鱼病越来越难治；–抗生素残留：生物富集等作用，危害人类健康；–抗生素破坏性：破坏微生态平衡；–抗生素的抑制作用：抑制免疫系统，使机体对抗生素产生依赖。•中药相对抗生素所具有的优势无耐药性中草药无残留价格低廉改善机能免疫低毒•1、借鉴中医研究看，中草药对人类的改善不仅仅表现在价格低廉、取材方便、多功能抗菌等方面，还能以最天然、最全面的作用调节机体免疫系统。2、抗菌试验是作为治疗疾病的基础，有坚实的抗菌试验数据和作用理论，才能更好的使用中草药和治疗鱼病。现阶段抑菌研究成果•在淡水养殖鱼类中，常见致病菌有嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、爱德华氏菌和鱼害黏球菌，其中大部分细菌感染性强，破坏性大，致死率高，它们每年均会给水产养殖业带来巨大的损失。因此着重介绍在这四中细菌方面的研究成果。•对鱼害黏球菌的抑菌研究：•叶元土等，1996年，对大黄、地榆、黄柏、黄连、黄芩、栀子、大蒜、烟叶8种中草药对鲤鱼烂鳃病病原菌的抑制作用，结果表明，除栀子外的其余7种中草药均有明显的抑菌作用，且抑菌作用的强弱与药物浓度成正相关。•而在2000年，罗琳等测定大黄、黄芩、黄柏、金银花、穿心莲单独用和以大黄为基础两两连时抑制鱼害粘球菌的效果。大黄、黄柏、黄芩、金银花抑菌明显，而两两连用时，大黄与黄芩、大黄与金银花有协同作用，而大黄与黄柏则出现拮抗作用。•对爱德华氏菌的抑菌研究•经（李瑞等，2008）针对9种中草药及17种组方对迟钝爱德华氏菌的体外抑菌试验采用M-H琼脂稀释法，测定了黄连、大黄、黄芩等9种中草药及其配伍组成的17种复方对迟钝爱德华氏菌的体外抗菌活性。•结果表明，五倍子+黄芩、大黄+五倍子、黄芩+黄连和大黄+黄芩的抑菌效果明显，MIC和MBC值均≤3.125mg/mL；而蒲公英、金银花、板蓝根、金银花+蒲公英和连翘+板蓝根的抑菌和杀菌效果不明显，MIC和MBC值均≥200mg/mL。•在2011，陈言峰用琼脂扩散法和二倍稀释法测定了20种中草药•对迟缓爱德华氏菌的体外抑菌试验：五倍子、乌梅、大青叶、石榴皮的抑菌作用明显，最小抑菌浓度(MIC)＜6.25mg/mL，最小杀菌浓度(MBC)＜50mg/mL；吴茱萸和菖蒲有一定的抑菌作用，MBC为50-100mg/mL；而苦地丁、栀子的抑菌作用不明显，MBC＞200mg/mL。•在今年5月发表的，斑马鱼迟缓爱德华氏菌的鉴定、致病性及药物敏感性文章中，刘春等发现，五倍子、石榴皮的抑菌作用明显，最小抑菌质量浓度(MIC)和最小杀菌质量浓度(MBC)均≤6.25mg/mL；艾叶等有一定抑菌作用，MIC和MBC均在25-200mg/mL；而野菊花等抑菌作用不明显，MBC＞200mg/mL。•对嗜水气单胞菌的抑菌研究•1996年，高汉娇等在试管内测定了21种中草药对嗜水气单胞菌8个菌株的抑菌作用，在试管内测定了21种中草药对嗜水气单胞菌8个菌株的抑菌作用，结果表明五倍子、辣蓼、大黄、黄芩、乌梅抑菌作用明显；黄柏、菖蒲、金银花、龙胆草有一定抑菌效果；而其他抑菌作用不明显；•2001年，宋学宏用酒精回流法提取板蓝根、大青叶、地锦草、斑地锦、乌蔹莓、蒲公英、马齿苋、车前草、铁苋菜9种常见中草药的有效成分，进行强毒株嗜水气单胞菌体外抑菌试验，结果表明这9种药均表现出一定的抑菌效果，但不明显；同年，陈学年等根据中医中药理论及鱼类生理特点，初步筛选了9种中草药组成5个复方，结果表明其中的一个复方有很强的抗菌作用。最近研究中，张海宾等测定了嗜水气单胞菌菌株对12种中草药的敏感性。结果表明：五倍子﹑大黄﹑乌梅﹑黄连的抑菌作用明显；地榆﹑黄柏﹑野菊有一定的抑菌作用；而白头翁﹑山豆根﹑贯众的抑菌作用不明显。•2011年的罗新等的最新表明，在药液pH值调节至中性后，五倍子、诃子和黄连三种中草药能有效抑杀嗜水气单胞菌，五倍子的MIC和MBC都为7.813mg/mL，诃子的MIC和MBC均为15.625mg/mL，黄连的MIC和MBC均为62.5mg/mL；石榴皮和艾叶的MIC和MBC均为250mg/mL；乌梅的MIC和MBC均为1000mg/mL，且分析知乌梅和石榴皮抑菌效果不好可能与调节pH有关系。•对温和气单胞菌的抑菌研究2003年，张海宾等通过测试温和气单胞菌对中草药的耐药性，结果表明所选取的10种生药中，五倍子、黄柏、大黄、野菊的抑菌性强，抑菌效果好，缺点是药力减退快。地榆、黄连、黄芩、乌梅抑菌性没有以上4种强，但药效持久、稳定。2002年，钟全福等研究发现黄莲、地锦草、乌梅、黄芩对该病原菌的抑制效果显著；2010年，梁利国等研究了18种中草药煎液对温和气单胞菌的抑杀菌效果。其中7种有效抗菌中草药抗菌浓度如下：•同在2010年，陈晓利的研究，也论证了五倍子、黄芩敏感，其中五倍子的抑菌效果较显著；•而彭金菊等的研究结果也表明，乌梅、五倍子组成的复方对罗非鱼温和气单胞菌的治疗效果最佳；山茱萸、五倍子组成的复方对罗非鱼感染温和气单胞菌的防治效果最佳。中草药替代抗生素研究中的问题和未来趋势•1、理论研究较少：•以体外抑菌为主，而体内抑菌或临床疾病治疗较少，缺乏对药物成分、作用的全面分析。•2、抑菌研究与体内试验的差异：•穿心莲、水辣蓼等中草药，在防治鱼类传染性疾病时，确实具有较好的疗效，但在体外抗微生物试验中却无明显作用。还有体外抗菌筛选有效的水溶性黄酮成分，却在进行体内抗菌试验证实药效时却无效。•3、中草药抗菌的误区：•因为抑菌≠杀菌，抗菌≠能治愈细菌疾病，实验室能治愈疾病≠池塘边上也可以。所以中草药抗菌的研究要以本着治愈疾病的角度出发。•4、缺少中药配伍的量化理论：•无配药理论依据。•5、中药制剂制作工艺不完善：3、水剂虽然在水产应用上比较好，但是水剂成分难于确定，无相关量化标准，监管容易失位。1、直接把药物原料投放于水中，或只是采取煎煮等粗提的方法；2、中药散剂可进行拌饵内服，但是因鱼类肠道较短，药物有效成分在肠道停留时间短，吸收不完全，抗菌效果也大打折扣；•6、中草药现在并不能完全替代抗生素抗生素抗菌谱较宽，对几乎所有鱼类细菌均有抑菌和杀菌作用，而中草药的研究还很浅，仅已知部分中草药有抗菌效果，还有很多细菌需要使用抗生素才有效。中草药抗菌功能中草药其他功能可替代抗生素不能替代学习意义•1、鱼病越来越难治，抗生素的耐药和对机体的破坏性，迫使我们需要去改变现有的治疗用药。•2、学习中草药的抗菌成分及抗菌成果，有助于对中草药治疗鱼病的认识。•2、了解中草药抗菌效果，并进一步研究抗菌机理，才能熟练运用中草药方剂。谢谢各位