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中兽药在猪疫病防治上的应用华南农业大学兽医学院郭世宁郭世宁华南农业大学博士副教授兽医临床系副主任、动物医院副院长中国畜牧兽医学会中兽医学分会常务理事广东畜牧兽医学会中兽医专业委员会副主任委员E-mail:shining@scau.edu.cn电话:020-85280236/139022129901现代化畜禽养殖业面临的问题当前疫病流行特点非典型病毒病、细菌病、病毒与细菌、细菌与细菌混合感染和继发感染,难以诊断,化药与抗菌素预防量添加——病原耐药性,但仍难以控制,发病率和死亡率高,经济损失巨大和药残超标畜禽适应能力和抗病能力下降应激因素和病原侵袭——疫病增多疫病药残畜禽产品国内、国际市场竞争能力国际,随着畜产品贸易技术壁垒的不断提高,病原和药残超标,拒收、扣留、终止合同甚至封关等国内,不能满足绿色安全畜禽产品市场的需求化药抗菌素的使用被严格限制国家颁布无公害兽药使用准则、饲料添加剂使用条例等规范疫病药残2006年1月1日起,欧盟新的食品卫生法规正式生效,食品安全必须建立在“从农田到餐桌”的全过程控制管理基础上。5月29日,日本开始全面实施“肯定列表制度”。规定16种农兽药禁止使用;为739种农药、兽药鸡饲料添加剂设定了54,785个限量标准;只有65种天然和化学合成物质(主要是营养剂)作为豁免物质不设限量。针对猪肉制品,检测项目由原来的14项增加到了438项。数据显示,针对出口,2005年检验检疫机构检验出1093例出口不合格食品,其中农兽药残留超标226批,占到20.7%,添加剂问题150批,占到了3.7%。畜禽健康养殖、安全优质畜禽产品生产呼唤中兽药产品应用于养殖业中兽医药纳入兽医防疫尽快提高我国控制药残和疫病的水平满足国内外绿色畜产品市场需求2当前养殖猪场流行病特点病毒病逐渐增多混合感染普遍细菌病的耐药性增强残次率和死亡率增高危害最大:HC、PRRS、PCV2、霉菌毒素等其次:PRV(伪狂犬)、PPV(细小)、JEV(流脑)、SI(流感)、MP(气喘)、TGE(传染性胃肠炎)等常见继发为:SS(链球菌)、APP(胸膜肺炎)、HP(副嗜血)、Past(气喘)、E.coli(大肠杆菌)、EPE(附红细胞体)、Tox(弓形体)等混感普遍:HC+□、PRRS+□、PRDC(呼吸道疾病综合症)等新病或新的病毒病(?)3养殖场疾病控制程度四大层次1、治疗药费高,死亡率高,生产成本高2、康复药费更高,死亡率稍低,整齐度有所改善3、预防药费低,死亡率小,能赚钱4、保健保健费用属于投资,能产生高额回报,赚大钱4猪场疫病防制原则不能仅停留在免疫、消毒、隔离等,应加强饲养管理并树立并贯彻生物安全体系新理念多层次、多屏障,立体防止病原入侵猪场建场、规划、管理、饲养、免疫、消毒等抓住各猪场主要矛盾,实施个性化科学综合防制措施转变养殖观念防重于治市场迫切需要病毒病预防(关键)治疗(辅助)疫苗(功不可没)饲养管理保健药物药物中药或复方5抗猪病毒病中药的研究中华人民共和国农业部公告第560号金刚烷胺类等人用抗病毒药移植兽用,缺乏科学规范、安全有效实验数据,用于动物病毒性疫病不但给动物疫病控制带来不良后果,而且影响国家动物疫病防控政策的实施抗病毒药物的研究方法直接杀灭或间接杀灭药物体外抗病毒的研究方法药物对免疫功能的影响细胞体外培养药物最大无毒浓度病毒的TCI50先加病毒后加药物先加药物后加病毒观察CPE或感染量中药体外抗猪伪狂犬病毒的效果15种中药在PK细胞的半数毒性浓度TC50结果:毒性按小到大排列为:黄芪香薷板蓝根千里光连翘半枝莲、地胆草大青叶鱼腥草野菊花黄芩金银花贯众冰片蟾酥。实验过程中,观察到药物对PK细胞毒性作用表现为细胞折光性增加、变圆、粘连、破碎、脱落、死亡、吸光值明显下降。正常细胞(高倍)病变细胞(高倍)PRV的TCID50测定结果根据Reed-Muench两氏法得PRVTCID50=10-4.16/0.1mlMTT法测定PRV对PK细胞的生长抑制率%(X±S.E,n=4)中药抗PRV的药效结果治疗作用预防作用直接杀灭作用15种单味中药中,三种作用方式都对PRV有较强抑制作用的中药有金银花、野菊花、蟾酥、板蓝根、鱼腥草、半枝莲复方对小鼠脾脏指数影响的结果分析051015202530354045脾脏指数复方Ⅰ复方Ⅱ复方Ⅲ复方Ⅳ正对图2.1复方制剂对小鼠脾脏指数的影响脾脏指数复方对小鼠脾淋巴细胞增殖的结果分析复方Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ对ConA诱导的T淋巴细胞,LPS诱导的B淋巴细胞以及细胞对照组均有很明显的促增殖作用(P0.05);复方Ⅳ对ConA诱导的T淋巴细胞和细胞对照组的促增殖作用尤其明显(P0.05);复方Ⅲ则对LPS诱导B淋巴细胞的促增殖作用尤其突出(P0.05)注:A1表示24hConA;A2表示24hLPS;A3表示24h细胞对照组;A4表示48hConA;A5表示48hLPS;A6表示48h细胞对照组。复方对小鼠血清IFN-γ影响的结果分析血液生化指标的测定结果分析55复方制剂对小鼠血清SOD的结果分析MDA测定结果分析复方制剂Ⅲ效果显著复方Ⅲ对感染PRV的PK细胞凋亡及周期的影响中药TC50中药对感染PRV的PK15细胞周期的影响细胞DNALadder分析复方Ⅲ在PK单层细胞的安全浓度测定复方Ⅲ不同浓度对细胞抑制率(%)药物在稀释倍数为2-5时,随药液浓度下降对细胞的毒性越少.计算抑制率,根据公式得出复方Ⅲ对PK细胞的半数毒性浓度为31.26mg/ml.复方Ⅲ对感染PRV的PK15细胞周期的结果复方Ⅲ对感染PRV的PK15DNALadder分析结果图感染PRV的PK15细胞DNALadder分析电泳图谱注:M:DLMark2000;1为阴性对照;2为预防组;3为直接杀灭组;4为治疗组;5为阳性对照组。1.复方Ⅲ能够使由于感染PRV的PK细胞周期G2期受阻滞减轻(P0.05),尤其是预防组;并且随着时间的延长,作用更明显。2.复方Ⅲ可使感染PRV的PK15细胞DNA损伤降低,DNA断裂减少,尤其是预防组。关于抗菌抗病毒药物研究的几点思考体内的病菌是否需要消灭?和谐体外的药效与体内有无关联性?6提高生产性能,改善畜禽产品品质的药物增重产品多,精品少提高瘦肉率化学药物盐酸克伦特罗中药??改善品质项目ABCDTP(g/L)68.16±0.86a68.76±0.84a67.75±0.72a67.01±1.19aALB(g/L)46.08±0.28a43.28±0.4b44.75±0.35c44.92±0.31cGLU(mmol/L)3.97±0.08a2.91±0.24b3.44±0.34ab3.65±0.09acCHO(mmol/L)2.85±0.02a2.22±0.05b2.65±0.05c2.57±0.08cTG(mmol/L)0.29±0a0.18±0.01b0.28±0.01ac0.28±0.01acCRE(mmol/L)135.57±1.02a83.52±1.08b108.9±2.47c116.27±0.82dUA(mmol/L)7.33±0.03a4.69±0.22b6.33±0.03c6.57±0.01cALT(U/L)70.59±0.7a33.49±0.94b57.26±3.22c53.22±1.55cAST(U/L)37.68±0.97a32.54±0.33b35.68±0.31c35.89±0.36acLD(U/L)527.14±2.14a320.35±1.14b427.64±2.2c441.26±8.65cALP(U/L)214.52±2.41a206.75±0.86b215.26±2.43a216.47±0.81a表1.中草药添加剂对生长育肥猪血液生化指标的影响*A:空白对照组;B:1%中草药添加剂组;C:0.5%中草药添加剂组;D:半胱胺组abcd:行中不含有相同字母表示差异显著(P<0.05)。项目ABCD头数3333宰前活重/kg109.1±1.3112.3±1.8110.8±0.2108.9±0.8胴体重/kg78.59±0.3282.77±1.3780.88±0.278.94±0.33屠宰率/%72.7±0.06ac73.69±0.1b73±0.05a72.5±0.21ac瘦肉重/kg49.23±0.2555.31±0.9751.93±0.1549.86±0.17瘦肉率/%62.64±0.06a66.82±0.06b64.21±0.04c63.15±0.07d脂肪重/kg10.23±0.056.91±0.048.05±0.099.47±0.03脂肪率/%13.02±0.02a8.35±0.09b9.95±0.08c12±0.02d眼肌面积/cm241.27±0.18a46.28±0.19b44.13±0.12c41.93±0.05d平均背膘厚/cm3.2±0.09a2.38±0.02b2.52±0.02c3.1±0.01d表2.中草药添加剂对生长育肥猪胴体品质的影响*A:空白对照组;B:1%中草药添加剂组;C:0.5%中草药添加剂组;D:半胱胺组abcd:行中不含有相同字母表示差异显著(P<0.05)。表3.中药添加剂对生长育肥猪肌肉理化特性和肌肉肌苷酸的影响项目ABCDpH值6.53±0.06a6.41±0.02ab6.44±0.06ab6.38±0.02b肉色/分3.3±0.2a3.3±0.1a3.2±0.1a3.3±0.2a大理石纹/分3.6±0.1a3.2±0.1b3.4±0.1ab3.5±0ab熟肉率/%72.34±0.32a76.14±0.2b75.35±0.23c73.44±0.11d肌苷酸(mg/g)2.19±0.112.68±0.342.37±0.242.21±0.44A:空白对照组;B:1%中草药添加剂组;C:0.5%中草药添加剂组D:半胱胺组abcd:同一行中含有字母相同者表示差异不显著(P>0.05);不含有相同字母表示差异显著(P<0.05)表4.肌肉品味鉴定评分结果*项目ABCD外观3.874.64.383.92嫩度3.74.44.254.02滋味4.14.524.224.12汤味3.724.654.224.03总分15.3818.1717.0716.09A:空白对照组;B:1%中草药添加剂组;C:0.5%中草药添加剂组;D:半胱胺组*品尝评定标准:“优良”(4.6-5.0)、“良好”(4.0-4.5)、“好”(3.6-3.9)、“尚可”(3.0-3.5)及“差”(<3)。7兽医中药在养猪业上应用的发展展望一、兽医中药与绿色无公害畜牧业兽药残留环境污染食品安全二、新的防治模式的应用“五屏防疫”“养殖观念的转变”五屏防疫——在养猪业中的应用思路中兽医与健康养殖的思路中兽医“治未病”的理念五屏防疫——中西医结合的兽医防疫技术模式猪高热病的中药防治中兽医与健康养殖的思路遗传育种动物营养家畜环境工程兽医防疫满足动物生理行为需求动物福利以畜为本健康养殖核心思想“阴平阳秘,精神乃治”——用中药调理动物的健康状态,使动物在健康的状态下生产安全优质畜产品。民间格言“栀子黄芩一大把,又治骡子又治马”“春灌茵陈与木通,消黄三伏有奇功,理肺散宜秋季灌,茴香冬月莫教空”“春季放大血,则夏无热壅之疾病”“冬吃萝卜夏吃姜,不用医生开处方”现代化畜禽养殖业追求最佳生产状态最佳生产状态(人工饲养、无公害养殖)健康状态(阴平阳秘)亚健康状态(应激状态)亚临床状态(隐性失衡)临床状态(显性失衡)健康状态亚健康状态病理状态工厂化养殖人类所追求偏性很强的非正常状态以畜为本、在最佳心理、生理状态下高效优质生产畜产品的最佳模式适应能力抗病能力生产性能生产性能抗病能力适应能力资源分配理论中兽医“治未病”的理念与中兽药的应用中兽医防治理论核心——治未病。含义概括为:未病先防既病防变进一步衍化为:治未生治未发治未成治未传
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