第四章 药典中常见定量分析方法概述(2)

第四章药典中常见定量分析方法概述（2）2010.9.17第六节定量分析计算•药物的定量分析–准确测定药品有效成分或指标性成分的含量–原料药与制剂含量表示方法不同•原料药的含量用百分含量表示•制剂的含量则用标示量的百分含量表示。原料药的百分含量%mmx100%含量xmm为实测值为供试品的重量制剂标示量的百分含量%100)(%标示量实测量每支每片标示量%100%标示量SmxxmS为每片（每支）实测量；为标示量一、原料药百分含量的计算•（一）滴定分析法•（二）分光光度法•（三）色谱法（HPLC、GC）（一）滴定分析法•1．直接滴定法•2．剩余滴定法%10010%30mFT)V(V含量V0V为供试品消耗滴定液的体积（ml）；为空白试验消耗滴定液的体积（ml）TF为滴定度（mg/ml）；为滴定液浓度校正因数m为供试品取样量（g）1．直接滴定法滴定液规定浓度滴定液实际浓度F校正因数F实例分析•呋塞米含量测定：取本品0.4988g，加乙醇30ml，微温使溶解，放冷，加甲酚红指示液4滴与麝香草酚蓝指示液1滴，用氢氧化钠滴定液（0.1003mol/L）滴定至溶液显紫红色，消耗氢氧化钠滴定液（0.1003mol/L）14.86ml；并将滴定的结果用空白试验校正，消耗氢氧化钠滴定液（0.1003mol/L）0.05ml。每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于33.07mg的呋塞米。按干燥品计算，含C12H11ClN2O5S不得少于99.0%。%10010%30mFT)V(V含量%48.98%1004988.0101.01003.007.33)05.086.14(3由于98.48%＜99.0%，故本品含量不合格2．剩余滴定法%mFTV)(V10010%30含量公式推导•司可巴比妥钠原料药含量测定：取本品0.1041g，置250ml碘瓶中，加水10m1，振摇使溶解，精密加溴滴定液（0.1mol/L）25ml，再加盐酸5ml，立即密塞并振摇1min，在暗处静置15min后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（0.1012mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml溴滴定液（0.1mo1/L）相当于13.01mg的C12H17N2NaO3。按干燥品计算，含C12H17N2NaO3不得少于98.5%。已知样品消耗硫代硫酸钠滴定液（0.1012mol/L）17.20ml，空白实验消耗硫代硫酸钠滴定液（0.1012mol/L）25.02ml。实例分析%10010%30mFTV)(V含量%7.98%1001043.0101.01012.001.13)20.1702.25(3测定结果大于98.5%，故本品含量合格。（二）分光光度法•1．对照品对照法•2．吸收系数法1．对照品对照法%100A%RxmDVACR含量XARCRAmDV为供试品溶液的吸光度；为对照品溶液的浓度（g/ml）；为对照品溶液的吸光度；为称取的供试品重量（g）；为供试品的稀释倍数；为供试品初次配制的体积（ml）•奥沙西泮原料药含量测定：精密称定0.0150g，置200ml量瓶中，加乙醇150ml，于温水浴中加热，振摇使奥沙西泮溶解，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，在229nm的波长处测定吸光度为0.480；另精密称取奥沙西泮对照品0.0149g，同法操作，测得229nm的波长处测定吸光度为0.460；药典规定本品按干燥品计算，含C15H11ClN2O2应为98.0%～102.0%。该供试品含量是否合格？%100%mDVAACRxR含量%0.99%1000159.05100200460.0480.010052000149.0测定结果在98.0％～102.0％范围内故本品含量合格。2．吸收系数法%1001001%%11mDVEAcm含量AE%11cmVDm为测定的吸光度；为供试品的百分吸收系数；为供试品初次配制的体积（ml）；为供试品的稀释倍数；为供试品的质量（g）。•对乙酰氨基酚原料药含量测定：精密称取对乙酰氨基酚0.0411g，置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀。依照分光光度法，在257nm波长处测得吸收度为0.582。按C8H9NO2的百分吸收系数为719计算对乙酰氨基酚的百分含量。实例分析%1001001%%11mDVEAcm含量%5.98%1000411.051002501001719582.0（三）色谱法（HPLC、GC）•1．外标法•2．内标加校正因子法1．外标法%mDVAACRxR100%含量XARARCVDm为供试品峰面积或峰高；为对照品的峰面积或峰高；为对照品的浓度（mg/ml）；为供试品初次配制的体积（ml）；为供试品的稀释倍数；为供试品的质量（g）2．内标加校正因子法SARASCRC为内标物质的峰面积或峰高；为对照品的峰面积或峰高；为内标物质的浓度（mg/l）；为对照品的浓度（mg/l）。SSRRA/CfA/C校正因子（）（1）计算校正因子：（2）计算供试品的百分含量：SSXXCAAfC/mAVDCAfmVDCSSX%100%x含量XAXCSASCfDm为供试品（或其杂质）峰面积或峰高；为供试品（或其杂质）的浓度（mg/ml）；为内标物质的峰面积或峰高；为内标物质的浓度（mg/ml）；为校正因子；为供试品的稀释倍数；为供试品的质量（g）•氢化可的松原料药含量测定：•色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂甲醇-水（70∶30）为流动相；检测波长为240nm。理论板数按氢化可的松峰计算不低于2000，氢化可的松峰与内标物质峰的分离度应符合要求实例分析•内标溶液的制备：取炔诺酮，加甲醇制成每1ml中含0.40mg的溶液，即得。•测定法：精密称取供试品12.48mg，配成25ml，精密量取该溶液与内标溶液各5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，取10µl注入液相色谱仪，记录色谱图，测得数据如下：实例分析•内标溶液测得数据如下：保留时间峰面积供试品7.252989311内标物11.004020105•另取氢化可的松对照品13.75mg，配成25ml，同法测定。测得数据如下：保留时间峰面积对照品7.253381565内标物11.004020000SC）（mlmgCR/55.025/75.136345.155.0/338156540.0/4020000//)(RRSSCACAf校正因子）（mlmgCAAfCSSXR/49.040.0/402010529893116345.1/%2.98%10048.122549.0%100mVDCX含量按内标法以峰面积计算，求供试品的百分含量：=0.4（mg/ml）；•某药厂用高效液相色谱法外标法测定头孢唑林钠含量，取含量为99.5%的头孢唑林钠对照品25.13mg，配成溶液，取此溶液10µl注入液相色谱仪，测定峰面积，3次测定值分别为：2490189、2492796和2492178；另外称取头孢唑林钠供试品3份，分别为28.13mg、29.35mg和27.10mg，按上法测定，分别取10µl溶液注入液相色谱仪，测得峰面积分别为2634858、2763699和2536847，求供试品的百分含量。%100%mDVAACRXR含量供试品和对照品配制溶液的方法、稀释倍数完全相同，故%100%mAAmRXR含量24917213249217824927962490189对照品平均峰面积：%99.93%10013.28249172126348585.9913.25%含量%49.94%10035.2924917212763699%5.9913.25%含量%94.93%10010.2724917212536847%5.9913.25%含量%1.943%94.93%49.94%99.93%平均含量第1次测定第2次测定第3次测定二、制剂标示量的百分含量计算片剂标示量百分含量的计算：%100(g)g)(%100%标示量供试品重平均片重供试品中测得量标示量每片实测的含量标示量注射剂标示量百分含量的计算%100%100%标示量）供试品取量（）每支容量（供试品中测得量标示量每支实测的含量标示量mlml•（一）滴定分析法•（二）紫外-可见分光光度法•（三）色谱法（HPLC、PC）（一）滴定分析法•1.片剂•直接滴定法•剩余滴定法（1）直接滴定法：310%100%VTFWmS标示量%10010)(%30SmWFTVV标示量WS为平均片重（g）；为片剂的标示量（g）（2）剩余滴定法：%10010)(%30SmWFTVV标示量•甲苯磺丁脲片剂（标示量0.5g）的含量测定：取甲苯磺丁脲10片，精密称定为5.948g，研细，精密称取片粉0.5996g，加中性乙醇25ml，微热，使其溶解，放冷，加酚酞指示剂3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1008mol/L）滴定至粉红色，消耗量18.47ml。每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.04ml的甲苯磺丁脲。《中国药典》现行版规定本品含甲苯磺丁脲应为标示量的95.0%～105%。试计算本品的标示量百分含量，并判断是否符合规定。%10010%3SmWFTV标示量%9.99%1005.05996.010948.5101.01008.004.2747.183含量合格（一）滴定分析法•2.注射剂•直接滴定法•剩余滴定法（1）直接滴定法：%100每支容量10%3SmFTV标示量mS为供试品的取样量（ml）；为标示量，即每支注射剂的标示量（g）；每支容量指每支注射剂的容积（ml）；（2）剩余滴定法：%100每支容量10%30SmFTV)(V标示量•盐酸普鲁卡因注射剂（规格1ml∶50mg）含量测定：精密量取盐酸普鲁卡因注射液2ml，加水40ml，盐酸溶液（1→2）15ml，溴化钾2克，照永停滴定法，用亚硝酸钠滴定液（0.1032mol/L）滴定，消耗亚硝酸钠滴定液（0.1032mol/L）滴定液3.50ml。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.18mg的C13H2lN30·HCI。%100每支容量10%3SmFTV标示量%17.98%100105021101.01032.018.2750.333（二）紫外-可见分光光度法•1．片剂•（1）对照品比较法：•（2）吸收系数法：（1）对照品比较法：%100%SmWDVAACRxR标示量（2）吸收系数法：%100S1001%%11mWDVEAcm标示量（二）紫外-可见分光光度法•1．片剂•（1）对照品比较法：•（2）吸收系数法：•甲硝唑片（标示量为50mg）含量测定：取本品10片，精密称定为0.5988g，研细，精密称取片粉0.05978g置200ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约180ml，振摇使甲硝唑溶解，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，滤过。精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在277nm的波长处测定吸光度为0.4493，按吸收系数为377计算，即得%100S1001%%11mWDVEAcm标示量%5.95%100105005978.0105988.05100200100137