药物分析芳酸类非甾体抗炎药物的分析

第六章芳酸类非甾体抗炎药物的分析非甾体抗炎药（NosteroidalAntiinflammatoryDrugs，NSAIDs）是一类不含有甾体骨架的抗炎药，多数具有芳酸基本结构。本章主要讲芳酸类NSAIDs，同时讲一下尼美利舒和对乙酰氨基酚。第一节典型芳酸类非甾体抗炎药物的结构与性质一、典型药物与结构特点OOHOR'R(Ë®ÑîËáÀà)OHOHO(Ë®ÑîËá)(SalicylicAcid)OOHOCH3O(°¢Ë¾Æ¥ÁÖ)(Aspirin)OOHOOOH(Ë«Ë®Ñîõ¥)(Salsalate)FFOHOHO(¶þ·úÄáÁø)(Difunisal)第一节:结构与性质OHNOCH3CH3¼×·ÒÄÇËáHMefenamicAcidOHNORHÁÚ°±»ù±½¼×ËáÀà酸性酸性光谱特性第一节:结构与性质NROOR'HÁÚ°±»ù±½ÒÒËáÀàNNaOOClClHË«ÂÈ·ÒËáÄÆDiclofenacSodium酸性酸性光谱特性基团特性第一节:结构与性质R'RCH3HOO·¼»ù±ûËáÀàCH3HOOCH3CH3²¼Âå·ÒIbuprofenCH3HOOOͪÂå·ÒKetoprofenCH3HOOOCH3ÝÁÆÕÉúNaproxen酸性第一节:结构与性质NOOH3CHOCH3ClOßÅßáÃÀÐÁIndometacinNR'RCH3OHOßÅßáÒÒËáÀà酸性光谱特性第一节:结构与性质NSOHCH3NROOOH±½²¢àçຼ×ËáÀàNSOHCH3NOONOHßÁÂÞÎô¿µPiroxicamNSOHCH3NOOOSNCH3HÃÀÂåÎô¿µMeloxicam水解光谱特性第一节:结构与性质NO2HNSCH3OOOÄáÃÀÀûÊæNimesulideHONCH3OH¶ÔÒÒõ£°·»ù·ÓParacetamol其它非甾体类抗炎药水解光谱特性1.酸性：a.具有邻位取代苯甲酸结构的药物具-COOH。酸性受苯环、－COOH和其它取代基的相互影响。①取代基为吸e基，如－X，－NO2，－OH时，酸性↑;为供e基，如－CH3,－NH2时，酸性↓②取代基位置：邻位－OH取代酸性强，能与邻位－COOH形成分子内氢键（二）主要理化性质水杨酸阿司匹林苯甲酸HCl芳酸H2CO3苯酚第一节典型药物分类与性质classificationandnature1.酸性：b.羧基不与苯环直接相连的药物，芳环取代的脂肪酸类，酸性较弱双氯芬酸，布洛芬，酮洛芬，萘普生，吲哚美辛c.酰胺结构，无明显酸性吡咯昔康，美洛昔康，尼美舒利，对乙酰氨基酚较强酸性，所以大多数原料药可在中性乙醇、甲醇或丙酮等水溶性有机溶剂中，用氢氧化钠直接滴定含量2.水解特性：ASA、双水杨酯具有酯键，吡咯昔康，美洛昔康，尼美舒利，对乙酰氨基酚具有酰胺键，均可水解。鉴别，含量测定UV和IR光谱特性：分子结构中具有苯环和特征•取代基,有UV和IR特征吸收。4.基团和元素特性：酚羟基，硫元素等用于鉴别第一节典型药物分类与性质classificationandnature一、与铁盐反应1.含有酚羟基药物可与FeCl3反应；能与FeCl3反应不一定含酚羟基。OHRAr-OH+FeCl3紫堇色配位化合物pH4~6第二节鉴别试验Identificationtest⑴SA⑵Aspirin△水解SAFeCl3紫堇色中性或弱酸性紫堇色FeCl3COOHCOOOHOFeFe+4FeCl3()23+12HCl6第二节鉴别试验Identificationtest双水杨酯：紫色二氟尼柳：深紫色均通过产生水杨酸与三氯化铁反应显色水杨酸反应第二节:鉴别试验对乙酰胺基酚与三氯化铁显蓝紫色HONCH3OH¶ÔÒÒõ£°·»ù·ÓParacetamolFeCl3+Fe1/3ONCH3OH+HClÀ¶×ÏÉ«NSOHCH3NOONOHßÁÂÞÎô¿µPiroxicamNSOHCH3NOOOSNCH3HÃÀÂåÎô¿µMeloxicam显玫瑰红色显淡紫色酚羟基反应第二节:鉴别试验二、缩合反应显色CH3HOOOͪÂå·Ò+NHNO2NO2NH2CH3HOONNO2NNO2³ÈºìÉ«H2SO4-H2OH二苯甲酮结构第二节:鉴别试验三、重氮化-偶合反应对乙酰氨基酚具有伯氨基，在酸性条件下反应可生成对氨基酚，再与亚硝酸钠进行重氮化反应，之后再与碱性β-萘酚偶合生成红色偶氮化合物。NHCOCH3HO+HCl+H2ONH2HO¡¤HCl+CH3COOHN2ClHO+2H2ONH2HO¡¤HClHNO2+N2ClHO++OHNaOHOHNNOHºìɫżµª»¯ºÏÎï水解反应产生芳伯胺芳伯胺重氮化偶合反应第二节鉴别重氮化-偶合反应OCOCH3COONHCOCH3+3H2OHCl贝诺酯HONH2HCl+OHCOOHNaNO2,2HClHON2+Cl-OHNaOHOHNNOH橙红色(三)氧化反应第二节鉴别甲芬那酸＋H2SO4　　　　　深蓝色(O)K2Cr2O7△黄色并产生绿色荧光随即变为棕绿色(四)水解反应COOHOCOCH3Na2CO3COONaOHCH3COONa+CO2+H2SO4COOHOHH2SO4CH3COOH阿司匹林白色水杨酸第二节:鉴别试验六、特征元素反应：分子中含有氯、硫等元素可以转化为氯化物或硫化物进而进行鉴别。七、光谱法1、UV2、IR第二节鉴别(七)IR：阿司匹林-COOH-OH-COOHPh-C邻位取代Ph第二节鉴别N-HO-HN-HPh:C=C芳胺酚第二节:鉴别试验八、色谱法供试品保留时间对照品保留时间第三节:特殊杂质及其检查法一、阿司匹林和双水杨酯生产工艺ONaCO2¼Óѹ£¬ONaCOONaOHCOOHH+COOHOCOCH3(CH3CO)2OH2SO4,70~75C¡£ASAOH-CO2副产物水杨酸COOHOOOH双水杨酯第三节:特殊杂质及其检查法COOHOHCOOHOHHOOOCOOH[O][O]HOOHCOOHCOOHHOOOCOOHHOCOOHOO+COOHOOOCOOH-+HPLC法淡黄、红棕、深棕色限量原料：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林肠溶片：1.5%；肠溶胶囊：1.0%；阿司匹林栓、泡腾片：3.0%（HPLC法）第三节:特殊杂质及其检查法其它有关物质OH(CH3CO)2OOCOCH3+OCOCH3COOHOCOCH3COO+OHCOOHOHCOO醋酸苯酯水杨酸苯酯乙酰水杨酸苯酯HPLC法第三节:特殊杂质及其检查法双水杨脂中游离水杨酸的检查限量原料：0.5%；双水杨脂片：1.5%；（VIS法A530nm）二、甲芬那酸中2,3二甲基苯胺的检查第三节:特殊杂质及其检查法甲芬那酸ClCOOHH3CCH3NH2NHCOOHH3CCH3+CuGC法限量：0.01%；第三节:特殊杂质及其检查法三、二氟尼柳中有关物质的检查FFNH2FFCOCH3FFOCOCH3FFOHFFOHCOOHFF+CużÁªÒÒõ£»¯(CH3CO)2O,AlCl3Ñõ»¯H2O2Ë®½âOH/H-+ôÈ»¯CO2,CH3ONaTLCHPLC所谓物质A和物质B的检查是采用自身对照法进行检查的相同药物,不同浓度,相互比较,主点限量薄层色谱法（TLC)(1)杂质对照品法：适用于已知杂质并能制备杂质对照品的情况。121—供试品溶液2—杂质对照品溶液供试品中所含杂质的斑点，不得超过相应杂质的对照斑点。(2)供试品自身稀释对照法：适用于杂质的结构不能确定，或无杂质对照品的情况。要求供试品与所检杂质对显色剂所显的颜色应相同，显色灵敏度也应相同或相近。方法1、将供试品溶液按限量要求稀释至一定浓度作为对照溶液，2、与供试品溶液分别点加于同一薄层板上，展开、定位、检查。3、供试品溶液所显杂质斑点不得深于对照溶液所显主斑点颜色(或荧光强度)。供试品溶液自身稀释法，与对照溶液所显示的主斑点比较不得更深。问：觉得这个主斑点指的不是杂质所显的斑点，而是供试品所产生的主斑点。答：所谓主斑点，就是主要成分的斑点，也就是供试品中所含主要成分的斑点。双氢青蒿素中有关物质检查供试品溶液（1）：每1ml中含20mg对照品溶液（2）：精密量取（1）适量，加氯仿稀释每lml中含0.4mgAB供试品溶液如显杂质斑点(A)，不得多于1个，其颜色与对照品溶液所显的主斑点(B)比较．不得更深(2％)。12第六章芳酸类非甾体抗炎药物的分析萘普生的有关物质检查MeOMeOCH3Oõ£»¯ôÈ»¯MeOOHCH3COOH´ß»¯Ç⻯MeOCH3COOH2-ÝÁ¼×ÃÑ6-¼×Ñõ»ù-2-ÝÁÒÒͪ2-ôÇ»ù-2-(6-¼×Ñõ»ù-2-ÝÁ»ù)±ûËáÝÁÆÕÉú色谱条件杂质限量二、对乙酰氨基酚中氨基酚和对氯苯乙酰胺第三节:特殊杂质及其检查法HPLCClNO2NH2HOHONO2HONHCOCH3Ë®½â»¹Ô­õ£»¯ClNHCOCH3对氯苯乙酰胺第四节含量测定一、酸碱滴定法(Acid-basetitrationmethod)苯甲酸　pKa4.20水杨酸　pKa2.98　酸性较强COHOHO羧酸邻位-OH，吸电子基团，使酸性增加；分子内氢键，更增加了其极性直接滴定Aspirin、丙磺舒(Ch.P.BP.JP等)苯甲酸(Ch.P等)均采用本法一、酸碱滴定法（以Aspirin为例）原理：药物具-COOH；可用碱直接滴定（一）直接滴定法Ch.P（2010版）1：1第四节含量测定Assay条件：在中性乙醇中2.以酚酞作指示剂所含SA超过限量时，不宜直接滴定3.应用：多国药典用于阿司匹林、双水杨酯、苯甲酸、丙磺舒、布洛芬测定；USP和BP还用于甲芬那酸的测定。第四节含量测定Assay每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。讨论①中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯键水解。“中性”是对中和法所用的指示剂而言②优点：简便、快速缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）酸性杂质干扰（如水杨酸）③适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定pKa3-6的药物溶于中性醇,可直接用NaOH滴定pKa6-9的药物要用非水溶液滴定法第四节含量测定NSOHCH3NOOOSNCH3HÃÀÂåÎô¿µMeloxicam本品在甲醇、乙醇及水中极微溶或者几乎不溶，在丙酮中微溶。所以CHP使用定量过量的氢氧化钠滴定液溶解后，再用盐酸滴定液回滴剩余的氢氧化钠。烯醇式结构:酸性为什么氢氧化钠能溶解之？（二）水解后剩余滴定法USP（32版）酯的一般含量测定方法1.原理：2.方法：供试品1.5g0.5mol/LNaOH50.0ml煮沸10’放冷酚酞0.25mol/LH2SO4(V)空白·······································································(V0)定量、过量剩余第四节含量测定Assay3.讨论：空白试验的目的SA超过限量时也不适用4.计算：T的计算含量％的计算第四节含量测定Assay每1ml的氢氧化钠滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。第四节含量测定º¬Á¿%=(V0-V)¡ÁF¡ÁTW¡Á100%T=0.5¡Á¡Á12180.16=45.04(mg/ml)滴定度滴定度浓度待测物反应系数滴定液物反应系数滴定液物摩而质量空白反应体积样品测定消耗体积样品称重量I份NaOH供试品I份NaOH空白VVOVo-V相当于Asipirin消耗NaOH的ml数剩余％）－（含量％＝100WTFVV0第四节含量测定Assay反应摩尔比为1∶2优点：消除了酯键水解的干扰缺点：酸性杂质干扰羟苯乙酯含量测定亦可用此法T=166.2mg/mlCOOC2H5OH（三）两步滴定法用于：阿司匹林片/肠溶片的含量测定水解1.原理：片剂中加稳定剂：酒石酸/枸橼酸AspirinSA+HAc酸性有干扰，所以采用两步滴定法第二步水解后剩余滴定第一步中和Aspirin+NaOH钠盐+H2O水解产物SA+NaOHSA