立式压力蒸汽灭菌器效果验证记录

立式压力蒸汽灭菌器效果再验证记录1.验证可接受标准验证项目验证可接受标准验证方法细菌挑战性试验灭菌后指示菌应全部死亡微生物限度检查121℃压力蒸汽灭菌化学指示卡变色反应灭菌后指示卡颜色应达到或深于标准颜色（黑色）目测法生物指示剂灭活实验灭菌后指示菌应全部被灭活培养法2.验证的实施步骤2.1试验条件2.1.1检测用仪表确认名称型号编号校验日期校验结论有效时间压力表结论：检查人/日期复核人/日期3检测用菌种、指示剂（卡）等的确认名称规格来源枯草芽孢杆菌大肠埃希菌沙门菌铜绿假单孢菌金黄色葡萄球菌嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂枯草杆菌黑色变种芽胞菌片121℃压力蒸汽灭菌化学指示卡结论：检验人/日期：复核人/日期：3.1菌培养物制备：分别取枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌1白金耳于装有9ml营养肉汤培养基的试管中，于30～35℃培养18～24小时后，出现浑浊，说明各种菌均有生长，即得枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌的培养物，备用。3.2取样方法：3.2.1取样点：立式压力蒸汽灭菌器内上、中、下三部位各取样点（见物品放置图）第2页共5页3.2.2取样频次：每个试验进行三次。3.3生物指示剂灭活试验：3.3.1枯草杆菌黑色变种芽胞菌片(115℃灭菌20分钟)3.3.1.1验证方法：取9张枯草杆菌黑色变种芽胞菌片按物品放置图位置放于立式压力蒸汽灭菌器内，按立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于115℃灭菌20分钟后，取出于30~35℃培养24~48小时。同时取两片未灭菌枯草杆菌黑色变种芽胞菌片作对照，分别于24小时和48小时观察，记录结果。3.3.1.2结果判定：当加入未灭菌枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养肉汤经培养后显混浊，而灭菌后的枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养肉汤经培养后清亮，无混浊，说明枯草杆菌黑色变种芽胞菌全部被灭活。3.3.1.3验证结果：取样点标准培养后现象结论第一次第二次第三次1培养基清亮、无混浊23456789阳性对照1号培养基混浊2号检验人/日期：复核人/日期：315467892第3页共5页4.嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂(121℃灭菌15分钟)4.1验证方法：取9瓶嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂按物品放置图位置放于立式压力蒸汽灭菌器内，按立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于121℃灭菌15分钟后，取出于54℃培养48小时。同时取2支未灭菌的嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂作对照。4.2结果判定：当未灭菌的嗜热脂肪芽孢杆菌生物指剂经培养后由紫色变为黄色、而灭菌后的仍为紫色时，说明嗜热脂肪芽孢杆菌全部被灭活。4.3验证结果：检测结果灭菌时间及温度123456789阳性对照12121℃15分钟第一次第二次第三次结论：检查人/日期复核人/日期5121℃压力蒸汽灭菌化学指示卡变色反应试验：5.1验证方法：将每组9张“121℃压力蒸汽灭菌化学指示卡”按物品放置图位置放于立式压力蒸汽灭菌器内，按立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于121℃灭菌15和30分钟各一次后，取出与化学指示卡自带标准颜色（黑色）比较。5.2结果判定：121℃压力蒸汽灭菌化学指示卡灭菌后颜色如达到或深于标准颜色（黑色），则本试验合格。5.3验证结果：第4页共5页6细菌挑战性试验：6.1验证方法：将枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌的培养物各9支培养物按物品放置图位置放于立式压力蒸汽灭菌器内，按立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于121℃灭菌30分钟后，取出，即得枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌的灭菌培养物。取各灭菌培养物1ml，置直径90mm的灭菌平皿中，将预先准备好的营养琼脂培养基熔化，冷至约45℃时，倾注上述平皿各约15-20mL，混匀待凝。将各凝固平板倒置于30～35℃培养箱中培养，分别于24小时和48小时观察，记录结果，每管平行测定2份。同时用两个灭菌平皿各加注0.9%的无菌氯化钠溶液1mL作为阴性对照；并用大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌作阳性对照。6.2结果判定：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌培养物灭菌后，经培养应无菌生长，则细菌挑战性试验合格。6.3验证结果：检测结果灭菌培养物123456789阳性对照12枯草芽孢杆菌第一次第二次第三次大肠杆菌第一次第二次检测结果灭菌时间及温度123456789121℃15分钟第一次第二次第三次121℃30分钟第一次第二次第三次结论：检查人/日期复核人/日期第5页共5页第三次沙门菌第一次第二次第三次铜绿假单孢菌第一次第二次第三次金黄色葡萄球菌第一次第二次第三次结论：检查人/日期复核人/日期