医学寄生虫――阿米巴鞭毛虫

Amoebaandflagella阿米巴和鞭毛虫.Entamoebahistolytica(E.histolytica)溶组织内阿米巴.Giardialamblia(G.lamblia)兰氏贾第鞭毛虫.Trichomonasvaginalis(T.vaginalis)阴道毛滴毛虫.Leishmaniadonovani(L.donovani)杜氏利什曼原虫PurposeandRequirements.MastermorphologicalfeaturesoftrophozoiteandcystofEntamoebahistolyticaandGiardialamblia;Mastermovementcharacteristicsoftrophozoites;.MastermorphologicalfeaturesandmovementcharacteristicsofTrichomonasvaginalis;.FamiliarwithdiffertiationsofE.histolyticacystandothernon-pathogenicamoebaecyst;.Familiarwithiodinestainforcyst;.UnderstandingBalantidiumcoli;.UnderstandingmorphologicalfeaturesofamastigoteofLeishmaniadonovaniandsandfly..1.独立观察玻片标本No.原-1至No.原-4：2.示教内容学习：1）图片及视频示教：2）镜下示教标本：3.完成实验操作：①直接涂片法观察活动的阿米巴滋养体；②直接涂片法观察活动的阴道毛滴虫；③碘染色法观察包囊4.完成实验报告：本次课学习任务1.ObservationofglassslideNo.原-1至No.原-4拿到玻片标本后请马上检查核对是否有漏、重复或破损，有问题的请马上举手报告老师！No.原-1:溶组织内阿米巴包囊、结肠内阿米巴包囊、微小内蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊CystofE.histolytica,E.coli,E.nana,I.buetschliiNo.原-2:蓝氏贾第鞭毛虫滋养体G.lambliatrophozoite(仅双号同学有，2个同学共用1张)No.原-3:蓝氏贾第鞭毛虫包囊G.lambliacystNo.原-4:阴道毛滴虫滋养体T.vaginalistrophozoite注意：①在观察玻片标本前，先将显微镜光线调到最强！②本次课只使用10倍镜和油镜；No.原-4:阴道毛滴虫滋养体T.vaginalistrophozoiteAxostyle轴柱4anteriorflagellum4根前鞭毛LateralflagellumandUndulatingmembrane波动膜Nucleus1.ObservationofglassslideNo.原-1至No.原-4先10倍镜下调出焦距平面，然后转油镜下观察细微结构要求拍照姬姆萨染色法(Giemsastainingmethod)No.原-3:蓝氏贾第鞭毛虫包囊G.lambliacystSteinedwithiron-hematoxylinCystwall囊壁Nucleus核Axostyle轴柱Medianbody中体.Cystwall:.Axostyle:.Medianbody:.Nucleus:1.ObservationofglassslideNo.原-1至No.原-4先10倍镜下调出焦距平面，然后转油镜下观察细微结构要求拍照No.原-2:蓝氏贾第鞭毛虫滋养体G.lambliatrophozoiteAnteriorflagellum前鞭毛Ventralflagellum腹鞭毛Posteriorflagellum后鞭毛Caudalflagellum尾鞭毛Adhesivedisc吸盘NucleusMedianbody中体Axostyle轴柱1.ObservationofglassslideNo.原-1至No.原-4先10倍镜下调出焦距平面，然后转油镜下观察细微结构要求拍照姬姆萨染色法(Giemsastainingmethod)No.原-2:蓝氏贾第鞭毛虫滋养体G.lambliatrophozoiteSteinedwithiron-hematoxylinAdhesivediscandnucleus吸盘和核Medianbody中体Axostyle轴柱1.ObservationofglassslideNo.原-1至No.原-4先10倍镜下调出焦距平面，然后转油镜下观察细微结构要求拍照No.原-1:溶组织内阿米巴包囊、结肠内阿米巴包囊、微小内蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊CystofE.histolytica,E.coli,E.nana,I.buetschlii(铁苏木素染色)Chromatoidbody拟染色体Glycogenvacuole糖原泡Immaturecyst未成熟包囊nucleusnucleusMaturecyst成熟包囊E.histolyticacyst溶组织内阿米巴包囊要求拍照：未成熟包囊先10倍镜下找出焦距平面，然后转油镜下观察细微结构1.ObservationofglassslideNo.原-1至No.原-4E.colicyst结肠内阿米巴包囊maturecyst(8nucleus)immaturecystnucleuschromatoidbody(Slimwithtapersharpend)1.ObservationofglassslideNo.原-1至No.原-4No.原-1:溶组织内阿米巴包囊、结肠内阿米巴包囊、微小内蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊CystofE.histolytica,E.coli,E.nana,I.buetschliiE.nanacyst微小内蜒阿米巴Verysmall,6-12um,oval,only4nuclei1.ObservationofglassslideNo.原-1至No.原-4No.原-1:溶组织内阿米巴包囊、结肠内阿米巴包囊、微小内蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊CystofE.histolytica,E.coli,E.nana,I.buetschliiI.buetschliicyst布氏嗜碘阿米巴StainedwithIron-hematoxylinStainedwithIodineGlycogenvacuole糖原泡(verylarge)nucleus1.ObservationofglassslideNo.原-1至No.原-4No.原-1:溶组织内阿米巴包囊、结肠内阿米巴包囊、微小内蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊CystofE.histolytica,E.coli,E.nana,I.buetschlii2.示教内容学习:1）图片及视频示教：Nucleus核Erythrocyte红细胞NucleusErythrocyteStainedwithIron-hematoxylinE.histolyticatrophozoite2.示教内容学习:1）图片及视频示教：Amastigote(Leishman-Donovanbody)无鞭毛体(利杜体)Kinetoplast动基体Basalbody基体Rhizoplast根丝体Nucleus核Amastigotesparasitizeinmononuclearcell-macrophage(单核-巨噬细胞)ofhuman2.示教内容学习:Sandfly(白蛉)驼背、眼大、多毛、翅竖1）图片及视频示教：2.示教内容学习:1）图片及视频示教：Balantidiumcolitrophozoite结肠小袋纤毛虫滋养体Cytopyge胞肛Macronucleus大核Sytostome胞口Cytopharynx胞咽Foodvacuole食物泡Micronucleus小核Cilia纤毛2.示教内容学习:1）图片及视频示教：Balantidiumcolitrophozoite结肠小袋纤毛虫包囊Roundornear-round,diameter40-60umCystwall囊壁Macronucleus大核知识花絮:染色方法1铁苏木素染色(Iron-hematoxylinstainingmethod)主要用于各种阿米巴和蓝氏贾第鞭毛虫滋养体和包囊的鉴定，具有操作简单，现象明显的特点，呈墨蓝色。2碘液染色(Iodinestainingmethod)可以使真核细胞的细胞核呈黄褐色，所以,加碘液可以用来观察细胞核。3姬姆萨染色法(Giemsastainingmethod)姬姆萨染液(天青色素、伊红、次甲蓝的混合液)的染色法。最适于血液涂抹标本,用以染血球、疟原虫、立克次体以及骨髓细胞、脊髓细胞等的染色，呈祡红色。4瑞氏染色法(Wright’sstainingmethod)用瑞氏染色液对细菌进行染色以便进行显微镜检查的染色法。瑞氏染色液是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料,溶于甲醇后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。5瑞氏-姬姆萨染色法(Wright-Giemsastainingmethod)主要应用于血液和骨髓涂片染色，它是利用RomanowwskyStain技术原理改良而成的。标本涂片经瑞氏-姬姆萨染色液染色后，各类细胞呈现不同的着色，红细胞呈浅红色，白细胞的核着色非常明显，易于对白细胞进行分类。6苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)染色方法简称HE染色方法，是生物学和医学的细胞与组织学最广泛应用的染色方法。教学和研究都是用HE染色方法观察正常和病变组织的形态结构。2.示教内容学习:1）图片及视频示教：Iodinestain碘液染色法2.示教内容学习:1）图片及视频示教：Iron-hematoxylinstain铁苏木素染色法2）镜下示教：请拿上实验指导移步到示教显微镜，观察时请勿移动视野！.溶组织内阿米巴滋养体和包囊E.histolyticatrophozoiteandcyst.结肠内阿米巴包囊E.colicyst.微小内蜒阿米巴包囊E.nanacyst.布氏嗜碘阿米巴包囊I.buetschliicyst.蓝氏贾第鞭毛虫滋养体和包囊G.lambliatrophozoiteandcyst.阴道毛滴虫T.vaginalistrophozoite.杜氏利什曼原虫利杜体Amastigote(Leishman-Donovanbody).白蛉Sandfly.结肠小袋纤毛虫滋养体Balantidiumcolitrophozoite.结肠小袋纤毛虫包囊Balantidiumcolitrophozoite2.示教内容学习:3.Operationandobservation操作和观察碘液观察活动阿米巴观察碘染包囊.直接涂片法观察活动阿米巴滋养体和碘染色法观察包囊：①操作前先看“碘液染色法”视频；②取1张载玻片，先用吸管吸取阿米巴培养基，在载玻片左右各滴1滴，然后在其中1滴另滴加1滴碘液（如右图），加盖玻片，先10镜下观察，然后转40倍镜观察；③用过的载玻片请放到指定的铝锅内！3.Operationandobservation操作和观察.直接涂片法观察活动的阴道毛滴虫：用吸管吸取阴道毛滴虫培养基，滴1滴玻片上，加盖玻片即可，先10镜下观察，光线稍弱，然后转40倍镜观察；用过的载玻片请放到指定的铝锅内！3）提交实验报告方法：双击“教师机”图标→打开文件夹“上传”→打开你本人所在组别对应的文件夹，如“1组”→粘贴实验报告。2）实验报告命名格式：学号姓名-4，例如20070001张三-43.实验报告要求及提交：1）本次实验报告内容:要求4张图片①溶组织内阿米巴未成熟包囊E.histolyticaImmaturecyst②蓝氏贾第鞭毛虫滋养体G.lambliatrophozoite③蓝氏贾第鞭毛虫包囊G.lambliacyst④阴道毛滴虫滋养体T.vaginalistrophozoite离开实验室前做好以下工作：1.清点玻片标